PD-1/PD-L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑的應(yīng)用顯著改善了非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的治療,已成為NSCLC患者治療不可或缺的一部分,改變了NSCLC的治療格局。然而,大多數(shù)患者仍不能從中獲益,尤其是某些驅(qū)動(dòng)基因突變陽(yáng)性的患者。已有臨床研究證實(shí),腫瘤PD-L1表達(dá)水平越高,NSCLC患者越可能從PD-1/PD-L1抑制劑中獲益。故腫瘤PD-L1表達(dá)可作為評(píng)估PD-1/PD-L1抑制劑療效的預(yù)測(cè)因子,用于篩選敏感患者。肝激酶B1（LKB1）亦稱(chēng)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶11（STK11）,可磷酸化激活14種AMP依賴(lài)的蛋白激酶（AMPK）超家族成員。15%-35%的NSCLC患者存在LKB1突變,后者常與鼠類(lèi)肉瘤病毒癌基因（KRAS）突變共同發(fā)生,是NSCLC中常見(jiàn)的驅(qū)動(dòng)基因突變。先前的臨床觀(guān)察發(fā)現(xiàn),KRAS/LKB1共突變的NSCLC患者中PD-L1表達(dá)水平低,PD-1/PD-L1抑制劑在該類(lèi)患者中的療效差。然而,LKB1是否可直接調(diào)控NSCLC中PD-L1的表達(dá)及LKB1突變/缺失腫瘤內(nèi)PD-L1低表達(dá)在其抵抗PD-1/PD-L1阻斷治療中的作用尚不清楚。在本研究中,我們通過(guò)癌癥基因組數(shù)據(jù)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：132 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮略詞表
引言
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 非小細(xì)胞肺癌及其治療
    1.2 免疫檢查點(diǎn)治療
        1.2.1 腫瘤免疫逃逸
            1.2.1.1 腫瘤免疫循環(huán)
            1.2.1.2 腫瘤免疫監(jiān)視
        1.2.2 免疫檢查點(diǎn)分子與腫瘤免疫逃逸
            1.2.2.1 CTLA-4
            1.2.2.2 PD-1
        1.2.3 免疫檢查點(diǎn)抑制劑
            1.2.3.1 抗CTLA-4單克隆抗體
            1.2.3.2 抗PD-1/PD-L1單克隆抗體
            1.2.3.3 抗PD-1/PD-L1單克隆抗體的適應(yīng)癥
    1.3 非小細(xì)胞肺癌與免疫檢查點(diǎn)治療
        1.3.1 PD-1/PD-L1阻斷治療在非小細(xì)胞肺癌治療中的應(yīng)用
            1.3.1.1 Pembrolizumab
            1.3.1.2 Nivolumab
            1.3.1.3 Atezolizumab
            1.3.1.4 Durvalumab
            1.3.1.5 Avelumab
        1.3.2 非小細(xì)胞肺癌中PD-1/PD-L1阻斷治療的影響因素
            1.3.2.1 PD-L1
                1.3.2.1.1 PD-L1 表達(dá)對(duì)PD-1/PD-L1 阻斷治療的影響
                1.3.2.1.2 PD-L1表達(dá)檢測(cè)及其局限性
                1.3.2.1.3 PD-L1表達(dá)的調(diào)節(jié)
            1.3.2.2 腫瘤免疫微環(huán)境
            1.3.2.3 驅(qū)動(dòng)基因突變
    1.4 肝激酶B1(LKB1)與非小細(xì)胞肺癌
        1.4.1 LKB1的上下游信號(hào)
        1.4.2 LKB1在非小細(xì)胞肺癌中的作用
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞系
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 非小細(xì)胞肺癌組織樣本
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.5 主要試劑及耗材
        2.1.6 主要溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞傳代
        2.2.3 細(xì)胞凍存
        2.2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)及藥物處理
            2.2.4.1 細(xì)胞計(jì)數(shù)
            2.2.4.2 藥物處理
        2.2.5 蛋白提取
        2.2.6 蛋白免疫印跡(western blot)
        2.2.7 RNA提取
        2.2.8 逆轉(zhuǎn)錄
        2.2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)
        2.2.10 PD-L1 啟動(dòng)子DNA甲基化分析
        2.2.11 皮下腫瘤模型的建立及藥物治療
        2.2.12 石蠟切片及染色
            2.2.12.1 HE染色
            2.2.12.2 免疫組織化學(xué)染色
    2.3 統(tǒng)計(jì)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 NSCLC患者中PD-L1 表達(dá)與LKB1 正相關(guān)
    3.2 LKB1 上調(diào)NSCLC細(xì)胞中PD-L1 的表達(dá)
    3.3 AMPK信號(hào)參與NSCLC細(xì)胞中LKB1對(duì)PD-L1 表達(dá)的調(diào)節(jié)
        3.3.1 AMPK激活逆轉(zhuǎn)LKB1 沉默所致的PD-L1 表達(dá)下調(diào)
        3.3.2 抑制AMPK減少LKB1 誘導(dǎo)的PD-L1 表達(dá)上調(diào)
    3.4 LKB1 沉默對(duì)PD-L1 啟動(dòng)子甲基化的影響
    3.5 LKB1 通過(guò)KEAP1/NRF2 信號(hào)上調(diào)PD-L1 的轉(zhuǎn)錄
        3.5.1 LKB1對(duì)KEAP1/NRF2 信號(hào)的影響
        3.5.2 KEAP1/NRF2 信號(hào)在LKB1對(duì)PD-L1 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)中的作用
    3.6 AMPK激活劑二甲雙胍與抗PD-1 單克隆抗體的聯(lián)合抗腫瘤作用
    3.7 LKB1沉默致抑制性腫瘤免疫微環(huán)境
        3.7.1 二甲雙胍對(duì)LKB1 沉默腫瘤中PD-L1 表達(dá)的影響
        3.7.2 LKB1沉默對(duì)腫瘤內(nèi)免疫細(xì)胞趨化因子表達(dá)的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2014年中國(guó)肺癌發(fā)病和死亡分析[J]. 孫可欣,鄭榮壽,曾紅梅,張思維,鄒小農(nóng),顧秀瑛,夏昌發(fā),楊之洵,李賀,陳萬(wàn)青,赫捷.  中華腫瘤雜志. 2018 (11)
[2]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)



本文編號(hào)：3673727