MicroRNAs（miRNAs）是一類存在于真核細(xì)胞內(nèi)的非編碼RNA分子,由18~24個(gè)核苷酸組成。miRNAs通過降解目標(biāo)mRNA或抑制其轉(zhuǎn)錄后翻譯調(diào)控基因表達(dá)。miRNAs可以調(diào)控多種生物過程,例如早期發(fā)育、免疫反應(yīng)、造血、細(xì)胞增殖、分化和凋亡等。此外,越來越多的研究表明,miRNAs的異常表達(dá)與癌癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),已被用作重要的癌癥診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。因此,miRNAs的特異和靈敏檢測對于癌癥的診斷和治療具有重要意義。miRNA具有一些特有性質(zhì),例如尺寸短、表達(dá)水平低、同源之間序列相似、易被酶降解等。針對這些特性,研究者構(gòu)建了一些基于核酸擴(kuò)增策略的miRNA檢測方法。雖然這些方法在一定程度上提高了 miRNA檢測的靈敏度和特異性,然而miRNA的檢測仍然存在一些不足和挑戰(zhàn):1)現(xiàn)有的miRNA識別模式只能在有限的功能區(qū)域內(nèi)發(fā)揮識別作用,不能完全區(qū)別堿基錯(cuò)配位置分布在各種區(qū)域的同源性miRNA;2)蛋白酶介導(dǎo)的信號擴(kuò)增策略用于細(xì)胞內(nèi)miRNA的檢測時(shí),蛋白酶的入胞需要將細(xì)胞固定化,容易造成細(xì)胞受損或死亡,無法滿足活細(xì)胞中miRNA檢測的需要;3)目前miRNA的檢測多為單... 

【文章頁數(shù)】：161 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

miRNA的形成過程[24]

RCA的反應(yīng)原理}sz}

圖１．３基于直接雜交識別模式的ＲＣＡ反應(yīng)檢測ｍｉＲＮＡ［７ｎ??［７２１


本文編號：3672083