目的:睡眠剝奪與許多精神和神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān),睡眠時間的不足以及睡眠質(zhì)量的下降均會誘發(fā)多種嚴重的心律失常的發(fā)生。三七莖葉總皂苷（SLSP）主要來源于三七的地上莖葉部分,三七神安片臨床用于用于心氣血不足、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸悶,具有益氣安益氣安神、活血止痛功效,用于心氣血不足、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸悶,但其對睡眠剝奪條件下的神經(jīng)及心臟是否具有保護作用尚不明確。本研究以SLSP為研究對象,在睡眠剝奪小鼠、小鼠海馬神經(jīng)元和大鼠心肌H9C2細胞中,探討其對睡眠剝奪小鼠海馬神經(jīng)元損傷和心臟損傷的保護作用及機制,以期為SLSP臨床應(yīng)用于因SD誘發(fā)的學(xué)習(xí)記憶下降及心臟損傷的防治提供理論基礎(chǔ)。方法:1.SLSP改善SD小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力研究:采用Morris水迷宮訓(xùn)練小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,并用改良多平臺法對小鼠進行48小時的睡眠剝奪,通過行為學(xué)指標包括逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)觀察SLSP對睡眠剝奪小鼠學(xué)習(xí)記憶改善的作用。2.SLSP改善SD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力作用機制研究:采用尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)、透射電鏡觀察海馬組織中的自噬小體數(shù)量、組織免疫熒光觀察自噬標記物L(fēng)C3B的... 

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

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摘要
Abstract
縮略詞對照表
引言
第一章 三七莖葉總皂苷(SLSP)對睡眠剝奪(SD)小鼠神經(jīng)保護作用及機制研究
    第一節(jié) SLSP對 SD小鼠在體神經(jīng)保護作用及機制研究
        1.材料與儀器
            1.1 實驗動物
            1.2 試劑與材料
            1.3 實驗儀器
        2 實驗方法
            2.1 行為學(xué)實驗
            2.2 Western Blot法檢測小鼠海馬組織中自噬相關(guān)蛋白和凋亡相關(guān)蛋白表達
            2.3 尼氏染色
            2.4 透射電鏡
            2.5 免疫熒光法
            2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
        3 實驗結(jié)果
            3.1 SLSP明顯改善SD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力
            3.2 SLSP抑制SD小鼠海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)改變
            3.3 SLSP抑制SD小鼠海馬神經(jīng)元自噬
            3.4 SLSP調(diào)控SD小鼠海馬凋亡和自噬蛋白的表達
        4 結(jié)果分析與討論
    第二節(jié) SLSP對雷帕霉素誘導(dǎo)HT-22 細胞過度自噬和凋亡的抑制作用機制研究
        1.材料與儀器
        2.實驗方法
            2.1 CCK-8法檢測細胞活力
            2.2 細胞培養(yǎng)、蛋白提取及Western Blot 操作
            2.3 細胞轉(zhuǎn)染及加藥
            2.4 細胞免疫熒光(ICC)
            2.5 吖靛橙染色
            2.6 流式細胞術(shù)
            2.7 統(tǒng)計方法
        3.實驗結(jié)果
        4.結(jié)果分析與討論
    第三節(jié) 三七皂苷 Fc 對雷帕霉素誘導(dǎo)的小鼠海馬神經(jīng)元 HT-22 細胞過度自噬和凋亡的抑制作用及機制研究
        1. 材料與儀器
        2. 實驗方法
        3. 實驗結(jié)果
        4 結(jié)果分析與討論
第二章 SLSP對 SD小鼠心臟損傷的抑制作用及機制研究
    第一節(jié) SLSP對 SD小鼠心臟損傷在體保護作用及機制研究
        1.材料與儀器
        2.實驗方法
        3.實驗結(jié)果
        4.結(jié)果分析和討論
    第二節(jié) SLSP對雷帕霉素誘導(dǎo)的大鼠心肌H9c2 細胞過度自噬和凋亡的抑制作用及機制研究
        1.材料與儀器
        2.實驗方法
            2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2 細胞轉(zhuǎn)染及加藥
            2.3 吖靛橙染色
            2.4 流式細胞法
        3.實驗結(jié)果
            3.1 SLSP可抑制雷帕霉素誘導(dǎo)的H9c2 細胞的異常自噬和凋亡
            3.2 SLSP可調(diào)控雷帕霉素誘導(dǎo)的H9c2 細胞自噬和凋亡相關(guān)蛋白的表達
        4.討論與分析
創(chuàng)新點
結(jié)論
致謝
References
附錄一 綜述 三七皂苷藥理作用研究進展
    參考文獻
附錄二 博士期間發(fā)表的論文



本文編號：3654303