目的:睡眠剝奪與許多精神和神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān),睡眠時(shí)間的不足以及睡眠質(zhì)量的下降均會(huì)誘發(fā)多種嚴(yán)重的心律失常的發(fā)生。三七莖葉總皂苷（SLSP）主要來源于三七的地上莖葉部分,三七神安片臨床用于用于心氣血不足、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸悶,具有益氣安益氣安神、活血止痛功效,用于心氣血不足、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸悶,但其對(duì)睡眠剝奪條件下的神經(jīng)及心臟是否具有保護(hù)作用尚不明確。本研究以SLSP為研究對(duì)象,在睡眠剝奪小鼠、小鼠海馬神經(jīng)元和大鼠心肌H9C2細(xì)胞中,探討其對(duì)睡眠剝奪小鼠海馬神經(jīng)元損傷和心臟損傷的保護(hù)作用及機(jī)制,以期為SLSP臨床應(yīng)用于因SD誘發(fā)的學(xué)習(xí)記憶下降及心臟損傷的防治提供理論基礎(chǔ)。方法:1.SLSP改善SD小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力研究:采用Morris水迷宮訓(xùn)練小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,并用改良多平臺(tái)法對(duì)小鼠進(jìn)行48小時(shí)的睡眠剝奪,通過行為學(xué)指標(biāo)包括逃避潛伏期、穿越平臺(tái)次數(shù)觀察SLSP對(duì)睡眠剝奪小鼠學(xué)習(xí)記憶改善的作用。2.SLSP改善SD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力作用機(jī)制研究:采用尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)、透射電鏡觀察海馬組織中的自噬小體數(shù)量、組織免疫熒光觀察自噬標(biāo)記物L(fēng)C3B的... 

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞對(duì)照表
引言
第一章 三七莖葉總皂苷(SLSP)對(duì)睡眠剝奪(SD)小鼠神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究
    第一節(jié) SLSP對(duì) SD小鼠在體神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究
        1.材料與儀器
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 試劑與材料
            1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)
            2.2 Western Blot法檢測(cè)小鼠海馬組織中自噬相關(guān)蛋白和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)
            2.3 尼氏染色
            2.4 透射電鏡
            2.5 免疫熒光法
            2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 SLSP明顯改善SD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力
            3.2 SLSP抑制SD小鼠海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)改變
            3.3 SLSP抑制SD小鼠海馬神經(jīng)元自噬
            3.4 SLSP調(diào)控SD小鼠海馬凋亡和自噬蛋白的表達(dá)
        4 結(jié)果分析與討論
    第二節(jié) SLSP對(duì)雷帕霉素誘導(dǎo)HT-22 細(xì)胞過度自噬和凋亡的抑制作用機(jī)制研究
        1.材料與儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活力
            2.2 細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白提取及Western Blot 操作
            2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及加藥
            2.4 細(xì)胞免疫熒光(ICC)
            2.5 吖靛橙染色
            2.6 流式細(xì)胞術(shù)
            2.7 統(tǒng)計(jì)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.結(jié)果分析與討論
    第三節(jié) 三七皂苷 Fc 對(duì)雷帕霉素誘導(dǎo)的小鼠海馬神經(jīng)元 HT-22 細(xì)胞過度自噬和凋亡的抑制作用及機(jī)制研究
        1. 材料與儀器
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
        3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 結(jié)果分析與討論
第二章 SLSP對(duì) SD小鼠心臟損傷的抑制作用及機(jī)制研究
    第一節(jié) SLSP對(duì) SD小鼠心臟損傷在體保護(hù)作用及機(jī)制研究
        1.材料與儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.結(jié)果分析和討論
    第二節(jié) SLSP對(duì)雷帕霉素誘導(dǎo)的大鼠心肌H9c2 細(xì)胞過度自噬和凋亡的抑制作用及機(jī)制研究
        1.材料與儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及加藥
            2.3 吖靛橙染色
            2.4 流式細(xì)胞法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 SLSP可抑制雷帕霉素誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞的異常自噬和凋亡
            3.2 SLSP可調(diào)控雷帕霉素誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞自噬和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)
        4.討論與分析
創(chuàng)新點(diǎn)
結(jié)論
致謝
References
附錄一 綜述 三七皂苷藥理作用研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄二 博士期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3654303