大葉秦艽（Gentiana macrophylla Pall.）為龍膽科（Gentianaceae）龍膽屬（Gentiana）秦艽組（Gentiana macrophylla）植物,以根入藥,在《神農本草經》中列為中品,具有祛風除濕、清虛熱、退濕熱的功效。在之前研究基礎上,為進一步揭示大葉秦艽藥材中化學成分,發(fā)現(xiàn)大葉秦艽藥材新的藥理作用,探討其作用機制及發(fā)揮作用的關鍵藥效物質,本論文以陜西秦嶺地區(qū)栽培大葉秦艽為研究對象,從以下方面展開研究:（一）大葉秦艽藥材的化學成分研究通過柱層析色譜法、制備液相色譜法和結晶法從大葉秦艽藥材醇提取物中共分離出33個化合物,以波譜分析（MS和NMR）和對照品對照分析對這33個化合物結構進行鑒定,其中12個化合物為首次從大葉秦艽中分離鑒定,分別為:6′-O-乙酰龍膽苦苷、2’-（2,3-二羥基苯甲酰）-龍膽苦苷、6’-O-β-D-葡萄糖基馬錢苷酸、烏蘇醇、山楂酸、1α,2α,3β,24-四羥基-12-烯-28-烏蘇酸、硬脂酸、二十一烷酸、棕櫚酸、棕櫚酸乙酯、5-formylisochromen-1-one和原兒茶醛,上述12個成分中5-formylisoc... 

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【學位級別】：博士

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中文摘要
Abstract
第一章 緒論
    一 大葉秦艽概述
        1 本草記載
        2 大葉秦艽植物形態(tài)
        3 大葉秦艽藥材特征
        4 大葉秦艽的分布
        5 大葉秦艽藥材的栽培與采收
        6 大葉秦艽的化學成分研究
        7 秦艽及其活性成分的藥理作用研究
        8 小結
    二 非酒精性脂肪肝的概述
        1 NAFLD的發(fā)病特點
        2 現(xiàn)代醫(yī)學研究NAFLD的發(fā)病機制
        3 中醫(yī)對NAFLD的認識及治療
        4 NAFLD的藥物治療
        5 小結
    三 中藥藥效物質基礎研究方法概述
        1 當前中藥藥效物質基礎研究方法
        2 當前中藥藥效物質基礎研究方法的優(yōu)勢和不足
        3 基于“譜-效”相關的中藥藥效物質基礎研究方法
    四 本章總結
第二章 大葉秦艽藥材中化學成分的分離和鑒定
    一 引言
    二 實驗材料和儀器
        1 藥材
        2 器材
        3 試劑
    三 化學成分的提取和分離
        1 提取
        2 粗分
        3 粗分后各部分的分離
        4 純度分析
    四 結構鑒定
    五 討論
        1 大葉秦艽藥材中化學成分的提取分離
        2 大葉秦艽藥材中化學成分的鑒定結果
第三章 大葉秦艽中化學成分的定性和定量分析
    引言
    第Ⅰ部分大葉秦艽藥材中4種環(huán)烯醚萜苷類成分的定量分析
        一 引言
        二 材料、儀器和試劑
            1 材料
            2 儀器和試劑
        三 方法
            1 色譜條件
            2 混合對照品溶液和供試品溶液的制備
            3 方法學考察
        四 藥材中4種環(huán)烯醚萜苷類成分的含量分析
        五 討論
            1 洗脫條件的選擇
            2 檢測方法的選擇
            3 測定結果
    第Ⅱ部分 大葉秦艽藥材HPLC-ELSD指紋圖譜的建立
        一 引言
        二 藥材、儀器和試劑
            1 藥材
            2 儀器和試劑
        三 實驗方法
            1 色譜條件
            2 參照物溶液制備
            3 供試品溶液制備
            4 方法學考察
        四 藥材HPLC-ELSD指紋圖譜的建立
            1 藥材指紋圖譜的測定
            2 建立藥材指紋圖譜
            3 計算相關系數(shù)
            4 共有特征色譜峰的鑒別
        五 討論
            1 檢測方法的選擇
            2 共有色譜峰的確認
            3 洗脫條件的選擇
            4 參照峰的選擇
    六 結論
    第Ⅲ部分 本章小結
第四章 大葉秦艽藥材醇提取物抗NAFLD的作用研究
    一 實驗材料
        1 實驗儀器
        2 實驗試劑
        3 實驗動物
        4 實驗藥物
    二 實驗過程
        1 溶液配制
        2 動物分組和給藥
        3 血清生化指標的測定
        4 肝臟中TNF-α和IL-6 的測定
        5 肝組織中GSH、NO、CAT、SOD和 GSH-px的測定
        6 肝臟中甘油三酯的測定
        7 H&E染色
        8 油紅O染色
        9 蛋白質分子印跡
        10 數(shù)據(jù)分析
    三 實驗結果
        1 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠體重的影響
        2 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠肝臟和脂肪組織重量的影響
        3 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠血清生化指標的影響
        4 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠肝臟中TNF-α和IL-6 的影響
        5 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠肝細胞形態(tài)變化的影響
        6 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠肝臟中脂肪蓄積的影響
        7 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠肝臟中氧化應激水平的影響
        8 秦艽醇提取物對脂肪肝小鼠肝臟中蛋白表達的影響
    四 討論
        1 NAFLD動物模型的建立
        2秦艽藥材醇提取物減輕小鼠肝臟脂肪蓄積及代謝紊亂
        3 脂質代謝紊亂與NAFLD的發(fā)展
        4 胰島素抵抗與NAFLD的發(fā)展
        5 肝臟氧化應激與NAFLD的發(fā)展
        6 JNK和 IKK蛋白與NAFLD的發(fā)展
        7 XBP1 蛋白與NAFLD的發(fā)展
第五章 基于譜效關系分析研究大葉秦艽藥材醇提取物抗NAFLD的藥效物質基礎
    一 引言
    二 藥理實驗
        1 實驗材料
        2 藥理實驗過程
        3 藥理實驗結果
    三 譜效關系分析
        1 藥效指標的選取
        2 數(shù)據(jù)分析
        3 灰度關聯(lián)計算結果
    四 討論
        1 基于灰度關聯(lián)分析方法對譜效關系的研究
        2 藥效指標的選取
        3 指紋圖譜的建立與譜效關系分析
        4 數(shù)據(jù)無量綱化
        5 基于關聯(lián)度對大葉秦艽藥材抗NAFLD的主要藥效物質探討
第六章 龍膽苦苷抗NAFLD的作用研究
    一 引言
    二 實驗材料
        1 實驗儀器
        2 實驗試劑
        3 實驗動物
        4 實驗藥物
    三 實驗過程
        1 動物分組和給藥
        2 血清生化指標的測定
        3 肝臟TNF-α和IL-6 的測定
        4 肝組織中MDA、SOD、CAT和 GSH-px的測定
        5 肝臟中XO活性的測定
        6 肝臟中甘油三酯的測定
        7 H&E染色
        8 油紅O染色
        9 蛋白質分子印跡
        10 免疫組織化學染色
        11 數(shù)據(jù)分析
    四 實驗結果
        1 果糖對小鼠體重、血清代謝參數(shù)和肝細胞形態(tài)的影響
        2 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠體重和食物攝入量的影響
        3 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠組織重量的變化
        4 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠血清中甘油三酯和膽固醇的影響
        5 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠血清中葡萄糖、胰島素和胰島素抵抗指數(shù)的影響
        6 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠血清中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶的影響
        7 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中甘油三酯的影響
        8 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟細胞形態(tài)變化的影響
        9 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中脂肪蓄積的影響
        10 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中IL-6和TNF-α水平的影響
        11 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中氧化應激水平的影響
        12 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中FAS表達的影響
        13 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中SREBP-1 表達的影響
        14 龍膽苦苷對脂肪肝小鼠肝臟中ACC1 表達的影響
    五 討論
        1 龍膽苦苷減輕小鼠肝臟脂肪蓄積及代謝紊亂
        2 肝臟脂肪蓄積與NAFLD的發(fā)展
        3 龍膽苦苷調節(jié)SREBP-1、FAS和 ACC1 的表達
        4 龍膽苦苷減輕小鼠肝臟過氧化應激
        5 尿酸與NAFLD的發(fā)展
全文總結
創(chuàng)新點
參考文獻
攻讀博士學位期間取得的科研成果
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]胡蘿卜苷對人肝癌細胞株HepG2增殖、凋亡的影響及其機制探討[J]. 曾俊權,林曄,劉婷婷,柯波,肖游章.  山東醫(yī)藥. 2018(23)
[2]谷甾醇-3-O-葡萄糖苷對瘢痕疙瘩成纖維細胞增殖、凋亡及膠原合成的影響[J]. 呂經緯,王佳婧,胡剛.  中國比較醫(yī)學雜志. 2017(12)
[3]中藥質量控制的研究進展[J]. 佘一鳴,胡永慧,韓立云,劉素香,陳常青.  中草藥. 2017(12)
[4]秦艽化學成分及藥理作用研究進展[J]. 聶安政,林志健,王雨,張冰.  中草藥. 2017(03)
[5]小秦艽花化學成分研究[J]. 張秀艷,王曉琴,溫愛平.  中草藥. 2017(02)
[6]非酒精性脂肪性肝藥物治療研究進展[J]. 付德峰,王印林.  廣州醫(yī)藥. 2016(06)
[7]構樹果實化學成分的分離與鑒定[J]. 龐素秋,王國權,孫愛靜.  中國藥房. 2016(31)
[8]譜-效關系在中藥質量控制中的應用及問題分析[J]. 孔曉妮,馬晶,沈偉.  藥學研究. 2016(10)
[9]獐牙菜苦苷對大鼠膽汁淤積性肝損傷肝纖維化的抑制作用[J]. 衛(wèi)雙連,汪杰,李德民.  世界華人消化雜志. 2016(23)
[10]UPLC法測定7種秦艽中7種指標成分的量[J]. 楊燕梅,馬曉輝,盧有媛,呂培霖,林麗,王振恒,晉玲,朱田田.  中草藥. 2016(11)

碩士論文
[1]大葉秦艽水溶性成分及其抗炎活性的研究[D]. 侯姝冰.北京化工大學 2017
[2]山竹果殼的化學成分和藥理作用研究[D]. 徐濤.東華大學 2016
[3]布渣葉總黃酮調血脂譜效關系研究[D]. 程青云.廣州中醫(yī)藥大學 2014
[4]粗莖秦艽的化學成分及抗炎活性研究[D]. 呂濤.云南中醫(yī)學院 2012
[5]清熱化濕法治療非酒精性單純性脂肪性肝病肝膽濕熱證的臨床療效觀察[D]. 高廣毅.南京中醫(yī)藥大學 2012
[6]小秦艽和秦艽根的結構與有效成分含量及HPLC指紋圖譜研究[D]. 郭偉娜.西北大學 2009
[7]脂肪肝的中醫(yī)證候學研究[D]. 呂英.北京中醫(yī)藥大學 2006
[8]秦艽地上部分化學成分的研究熊膽粉中牛磺熊去氧膽酸鈉和�；蛆Z去氧膽酸鈉的分離與含量測定[D]. 趙勇.西北大學 2005
[9]陜西產秦艽的化學成分研究[D]. 陳千良.西北大學 2003



本文編號：3647359