研究背景前列腺癌（prostate cancer,PCa）是男性最常見的惡性腫瘤之一,有90%的PCa轉(zhuǎn)移都發(fā)生在骨組織中。外泌體是細(xì)胞釋放的一種細(xì)胞外囊泡。外泌體攜帶著蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等在細(xì)胞間傳遞信息。許多研究都指出,外泌體能促進(jìn)癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。在PCa骨轉(zhuǎn)移里,外泌體也發(fā)揮了巨大的作用。在正常生理情況下,成骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨形成和破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收維持著平衡,使骨組織按人體需要有序地更新改造。但在病理情況下,這種平衡被打破,成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活性都有所改變。有研究認(rèn)為破骨細(xì)胞主導(dǎo)的骨吸收能為PCa侵襲骨組織提供幫助。MiRNAs是大概22個核苷酸長度的非編碼小RNA。最近,越來越多的研究展現(xiàn)了 miR-214在破骨細(xì)胞分化過程中的作用。我們猜想PC-3外泌體是通過改變破骨細(xì)胞內(nèi)的miR-214水平來實(shí)現(xiàn)影響的。目前,有關(guān)PCa外泌體對破骨細(xì)胞影響的研究還比較少,相關(guān)的機(jī)制還不明確。研究目的探究PC-3來源的外泌體對破骨細(xì)胞分化的影響,探究miR-214在外泌體干擾破骨細(xì)胞分化過程中所發(fā)揮的作用,為臨床治療前列腺癌骨轉(zhuǎn)移提供新的思路。研究方法1.PC-3外泌體的分離與鑒定培養(yǎng)... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１．電鏡下ＰＣ－３外泌體的形態(tài)??

?第一章ＰＣ－３外泌體的分離與鑒定???１?６＂｜?．??Ｉ５?ｉ??〇?〇－１?■?１——Ｉ??０?５０?８５１００?１５０?２００?２５０??Ｄｉａｍｅｔｅｒ?（ｎｍ）??圖１－２．?ＰＣ－３外泌體的粒徑分析??Ｆｉｇ?１－２．?Ｐａｒｔｉｃｌｅ?ｓｉｚｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣ－３?ｃｅｌｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ?ｅｘｏｓｏｍｅｓ??１．２．３流式細(xì)胞術(shù)鑒定外泌體表面標(biāo)記??為了對所提取的外泌體進(jìn)行鑒定，我們采用了流式細(xì)胞術(shù)來檢測外泌體表??面的特異性標(biāo)記。結(jié)果顯示，空白對照組可見儀器背景干凈，干擾少，系統(tǒng)誤??差少。陰性對照組（ＮＣ）可見大部分外泌體（９４．６％）發(fā)出的熒光都在較低水??平，而加入了?ＣＤ６３抗體的外泌體有６９．６％為陽性，３０．４％為陰性，與ＮＣ組的??比較有顯著性差異（尸＜０．０５）；加入了?ＣＤ８１的外泌體有８４．２％表現(xiàn)為陽性，１５．８％??為陰性，與ＮＣ組的對比有顯著性差異（尸＜０．０５）（圖１－３）。結(jié)果表明本次實(shí)驗(yàn)??使用超速離心法提取的外泌體純度及產(chǎn)率均良好。??１４??

圖２－１．不濃ＰＣ－３泌體培破細(xì)的


本文編號：3619086