雄激素剝奪療法（Androgen Deprivation Therapy,ADT）是臨床前列腺癌治療的主要手段,但幾乎所有接受ADT治療的病患的腫瘤均會復(fù)發(fā),并產(chǎn)生去勢抵抗性。最近的研究表明,免疫細(xì)胞參與去勢抵抗性前列腺癌（Castration-resistant Prostate Cancer,CRPC）的形成,尤其是T細(xì)胞在ADT治療初期的前列腺癌病患和前列腺癌小鼠模型中大量擴(kuò)增。然而,是否存在某一類T細(xì)胞亞型在CRPC發(fā)生過程中發(fā)揮積極和重要的作用仍然未知。在本課題中,我們鑒定出一群新的CD4^lowHLA-G⁺T細(xì)胞亞群,其在接受ADT治療的前列腺癌病患中顯著擴(kuò)增。在前列腺癌小鼠模型中,一群類似表型的CD4^lowow T細(xì)胞亞群在CRPC形成早期大量出現(xiàn)。據(jù)表型特征分析,我們確定這些細(xì)胞均為IL-4表達(dá)的T_H17細(xì)胞,其與病患CRPC的形成相關(guān)且在小鼠模型中對CRPC的發(fā)生和發(fā)展是必需的。從作用機(jī)制方面分析,CD4^low（HLA-G⁺）T細(xì)胞能通過調(diào)... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

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CD4lowT細(xì)胞在接受ADT治療的前列腺癌病人外周血中大量擴(kuò)增

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文31（圖1B，1C和1E）。1.4.2在接受ADT治療的前列腺癌病人中發(fā)現(xiàn)的CD4lowT細(xì)胞是一群新的特異表達(dá)HLA-G的CD4+T細(xì)胞亞群鑒于以往的研究表明，一群免疫抑制性的CD4lowT細(xì)胞亞群曾在異體器官移植的排斥反應(yīng)194，B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血�。˙-cellchroniclymphocyticleukemia,B-CLL）195和獲得性免疫缺陷綜合征（AcquiredImmunodeficiencySyndrome,AIDS）196等疾病發(fā)生過程中出現(xiàn)，我們想知道在接受ADT治療的前列腺癌病人外周血中大量擴(kuò)增的CD4lowT細(xì)胞是否即為這類免疫抑制性的T細(xì)胞亞群。我們檢測了多種免疫抑制相關(guān)的細(xì)胞標(biāo)志物，如FOXP3，CD25，HLA-G，TCRαβ和CD5，在CD4lowT細(xì)胞上的表達(dá)水平。出人意料地是，CD4lowT細(xì)胞并不表達(dá)CD25和FOXP3，且TCRαβ和CD5的表達(dá)水平也未顯著上調(diào)（圖2A-2F）。相反地，大部分CD4lowT細(xì)胞高表達(dá)HLA-G（圖2G），這暗示了CD4lowHLA-G+T細(xì)胞可能是一群不同于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregulatorycells,Tregcells）的新的CD4+T細(xì)胞亞群。另外，流式和免疫熒光染色的分析結(jié)果顯示，CD4lowHLA-G+T細(xì)胞也在接受ADT治療的前列腺癌病人的原位腫瘤組織中特異出現(xiàn)（圖3A-3C），這與分析病人外周血所得到的結(jié)果一致。圖2接受ADT治療的前列腺癌病人外周血中的CD4lowT細(xì)胞特異表達(dá)HLA-G。（A）健康供體，未接受ADT治療的前列腺癌病人及接受ADT治療的前列腺癌病人外周血中CD4lowCD25+T細(xì)胞的比例。（B-D）健康供體（黑線），未接受ADT治療的前列腺癌病人（藍(lán)線）和接受ADT治療的前列腺癌病人（紅線）外周血中CD4+T細(xì)胞上FOXP3（B），TCRαβ（C）和CD5（D）的表達(dá)水平。（E和F）圖2C（E）和圖2D（F）的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文32HD組，n=10；PCa組，n=23；PCa/ADT組，n=10。（G）健康供體，未接受ADT治療的前列腺癌病人及接受ADT治療的前列腺癌病人外周血中CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的比例。MeanSEM，t檢驗(yàn)，P值<0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2E和2F）。圖3CD4lowHLA-G+T細(xì)胞在接受ADT治療的前列腺癌病人腫瘤組織中大量出現(xiàn)。（A）未接受ADT治療及接受ADT治療的前列腺癌病人腫瘤組織中CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的比例。（B）圖3A的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。PCa組，n=20；PCa/ADT組，n=20。（C）未接受ADT治療及接受ADT治療的前列腺癌病人腫瘤組織的免疫熒光切片，顯示CD4lowHLA-G+T細(xì)胞在腫瘤組織中出現(xiàn)（白色箭頭）。比例尺，20μm。MeanSEM，t檢驗(yàn)，***P<0.001（圖3B）。1.4.3接受ADT治療的前列腺癌病人外周血中CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的比例與病人CRPC的形成相關(guān)年齡和性別匹配的健康供體（n=10），未接受ADT治療（n=41）和接受ADT治療（n=33）的前列腺癌病人（表1）外周血中CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的比例被用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行測定。CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的比例在PCa/ADT組病人中顯著升高（圖4A），且通過單變量分析，其比例升高與病人年齡，TNM分期及血清中PSA水平無關(guān)（表2）。此外，對同一病人ADT治療前后的病例對照分析（表3中的18號病人）也表明，較之于ADT治療前的檢測結(jié)果，病人外周血中CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的比例在ADT治療后顯著升高（圖5A），這與上述基于群體研究得到的結(jié)果一致。為了探索CD4lowHLA-G+T細(xì)胞在CRPC形成過程中發(fā)揮的作用，根據(jù)病人外周血中CD4lowHLA-G+T細(xì)胞的百分比，PCa/ADT組


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