發(fā)布時(shí)間：2022-01-24 06:36

　　目的:從組織、細(xì)胞和分子層面,研究RUNX3、miR-10b-5p與TIAM1之間上下游的靶向調(diào)控關(guān)系,進(jìn)而證明其在胃癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移生物學(xué)行為的信號(hào)通路途徑及作用機(jī)制。方法:1.預(yù)測miRNAs:通過生物信息學(xué)分析方法,利用現(xiàn)今人類miRNAs信息收錄覆蓋較為全面、靶基因預(yù)測算法較為科學(xué)合理且科研應(yīng)用較為廣泛的七個(gè)常見在線預(yù)測miRNAs的數(shù)據(jù)庫,Targetscan、miRNet、miRWalk、miRDB、Micro T-CDS、miRSystem和miRNAMap,預(yù)測可能靶向TIAM1 mRNA 3’-UTR的miRNAs,選取至少出現(xiàn)在3個(gè)數(shù)據(jù)庫的11種miRNAs進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。2.驗(yàn)證miR-10b-5p和TIAM1的靶向關(guān)系:（1）胃癌細(xì)胞系BGC823中分別轉(zhuǎn)染11種miRNAs的模擬物（mimics）和抑制劑（inhibitors）,使相應(yīng)miRNAs過表達(dá)或抑制后,提取細(xì)胞中總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過RT-q PCR檢測TIAM1mRNA變化。（2）TIAM1 mRNA 3’-UTR全長序列構(gòu)建到psi CHECKTM-2載體中海腎熒光素酶基因（Renilla ... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

miRNA生成及經(jīng)典和非經(jīng)典作用方式

第 2 章 文獻(xiàn)綜述如圖 2.2）[25]。一般情況下，植物 miRNAs 可經(jīng) RISC 降解靶RNA 會(huì)抑制靶基因 mRNA 的翻譯過程，從而在不同的腫瘤中也有研究表明，除經(jīng)典作用方式外，miRNAs 還可以結(jié)合 m5’-untranslated regions, 5’-UTR）和編碼區(qū)（Coding sequence,通過其他方式發(fā)揮作用（圖 2.1 B~F）[24]，雖然大多數(shù) miRN通過不同的算法，預(yù)測miR-10b-5p可作用于多種基因mRNA 序列上，但尚未有文獻(xiàn)進(jìn)行深入的實(shí)驗(yàn)研究。

吉林大學(xué)博士學(xué)位論文（一）篩選 miR-10b-5p 靶向作用 TIAM1 mRNA-3’UTR 調(diào)控其表達(dá)。（二）miR-10b-5p 是否在胃癌發(fā)生時(shí)表達(dá)減低，是否抑制胃癌細(xì)胞增殖襲遷移等生物學(xué)行為？（三）RUNX3 是否在胃癌發(fā)生時(shí)表達(dá)減低，是否能夠抑制胃癌細(xì)胞的、侵襲遷移等生物學(xué)行為？RUNX3 在胃癌中是否與 miR-10b-5p、TIAM1上下游調(diào)控關(guān)系？（四）CBFβ 作為 RUNX3 的輔助因子，是否能夠在胃癌發(fā)生時(shí)參與到UNX3 調(diào)控 miR-10b-5p 進(jìn)而影響胃癌細(xì)胞增殖和侵襲遷移等生物學(xué)行為？

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1表達(dá)水平與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系[J]. 關(guān)寶杰,劉力華,張恩穎,續(xù)薇.  中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2007(09)
[3]Tiam1-Rac1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其表達(dá)量值水平與胃癌惡性表型的相關(guān)性研究[J]. 續(xù)薇,劉力華,張明威,所劍,張恩穎,關(guān)寶杰,王冠軍.  中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2007(04)
[4]Tiam1表達(dá)與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的臨床和實(shí)驗(yàn)研究[J]. 朱金明,余佩武.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2006(01)
[5]細(xì)胞角蛋白18基因診斷胃癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移[J]. 續(xù)薇,張明威,黃晶,王欣,許淑芬.  吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2004(01)



本文編號(hào)：3606058