背景與目的腎結(jié)石是泌尿系統(tǒng)的常見病和多發(fā)病,是由晶體物質(zhì)在腎臟的異常聚積所致,以草酸鈣（calcium oxalate,Ca Ox）腎結(jié)石最為常見。草酸鈣晶體對腎小管上皮細胞的造成的損傷及凋亡是草酸鈣腎結(jié)石形成的關鍵步驟。活性氧（reactive oxygen species,ROS）可以介導線粒體中的氧化應激,同時活性氧參與草酸鈣晶體促進腎小管上皮細胞損傷及凋亡。SIRT3在清除ROS和減弱氧化損傷和線粒體功能障礙中起重要作用,并在某些腎臟疾病中發(fā)揮腎保護作用。然而,SIRT3在草酸鈣腎結(jié)石中的作用和具體機制還不清楚。有研究發(fā)現(xiàn),SIRT3通過上調(diào)核因子E2相關因子2/血紅素加氧酶-1（nuclear factor erythroid-2-related actor 2/heme oxygenase-1,NRF2/HO-1）通路發(fā)揮其對神經(jīng)細胞的保護功能,而NRF2/HO-1信號通路在改善腎臟疾病中的氧化應激中有著重要作用。因此,本文旨在探討SIRT3在草酸鈣腎結(jié)石中的作用,并探討其作用機制是否與調(diào)節(jié)NRF2/HO-1信號通路有關。方法1.臨床水平探究腎結(jié)石患者腎組織凋亡和SIRT3... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

NRF2/HO-1信號通路

32圖1腎結(jié)石患者的腎組織中SIRT3表達下調(diào)收集草酸鈣腎結(jié)石患者的腎組織作為病例組(n=10)，因腎腫瘤進行腎切除的患者的相鄰非腫瘤腎組織用作正常組(n=10)。(A)免疫組化檢測SIRT3的表達。Scalebar:50μm.(B)Westernblot檢測兩組腎組織中SIRT3的蛋白水平。β-actin作為上樣內(nèi)參。**p<0.01與Normal組比較Figure1HumankidneywithstonesshoweddownregulatedSIRT3Renaltissueswereisolatedfrompatientswithcalciumoxalatekidneystones(KSgroup,n=10)andadjacentnon-tumorousrenaltissuesfrompatientswhounderwentrenalresectionduetorenaltumors(Normalgroup,n=10).(A)ImmunohistochemistryanalysiofSIRT3expressioninrenaltissues.Scalebar:50μm.(B)WesternblotanalysisofSIRT3proteinlevelsinrenaltissues.Quantificationoftheirblotsnormalizedtoβ-actinwasshown.**p<0.01,vs.theNormalgroup.

333.2腎結(jié)石患者的腎組織凋亡增加接下來我們檢測腎結(jié)石患者的腎組織凋亡情況。TUNEL染色結(jié)果表明腎結(jié)石患者的腎組織的TUNEL陽性細胞數(shù)量(棕褐色)高于對照組，差異具有顯著性(圖2)。圖2腎結(jié)石患者的腎組織的TUNEL染色分析收集草酸鈣腎結(jié)石患者的腎組織作為病例組(n=10)，因腎腫瘤進行腎切除的患者的相鄰非腫瘤腎組織用作正常組(n=10)。TUNEL檢測細胞凋亡情況。TUNEL陽性細胞顯示為棕色。Scalebar:50μm.Figure2TUNELstainingofhumanrenaltissuesRenaltissueswereisolatedfrompatientswithcalciumoxalatekidneystones(KSgroup,n=10)andadjacentnon-tumorousrenaltissuesfrompatientswhounderwentrenalresectionduetorenaltumors(Normalgroup,n=10).TUNELstainingwasperformedtoexamineapoptosisinrenaltissuesfromKSpatientsandnormalcontrols.Scalebar:50μm.TUNEL-positivecells(brown)wereexpressedasapercentage.**p<0.01,vs.theNormalgroup.3.3腎結(jié)石患者的腎組織中NRF2/HO-1通路活化接下來我們探究腎結(jié)石患者的腎組織中NRF2/HO-1通路的表達情況。NRF2/ARE通路是細胞內(nèi)源性抗氧化應激最重要的抗氧化途徑之一，其通路的活化可促進下游蛋白HO-1的轉(zhuǎn)錄。Westernblot結(jié)果表明，腎結(jié)石患者的腎組織

【參考文獻】：
博士論文
[1]SIRT3在實驗性蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的作用及分子機制研究[D]. 黃巍.第二軍醫(yī)大學 2016

碩士論文
[1]NRF2/HO-1通路介導復方金錢草對小鼠草酸鈣結(jié)晶腎損傷的實驗研究[D]. 賈猛.第二軍醫(yī)大學 2013



本文編號：3598219