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HPV16 E7通過(guò)激活CDK6介導(dǎo)FoxM1上調(diào)肺癌細(xì)胞ACP5表達(dá)的分子機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2022-01-06 21:56
  研究目的:肺癌是目前世界范圍內(nèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其男性和女性肺癌發(fā)病率占惡性腫瘤的14%和12%,死亡率占惡性腫瘤的比例高達(dá)27%和25%。目前探索和發(fā)現(xiàn)新的癌基因和抑癌基因,闡明其作用機(jī)制并開(kāi)展有效的靶向治療,成為肺癌研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一種環(huán)狀雙鏈DNA病毒,其感染與人類多種疾病相關(guān),其中高危型HPV的持續(xù)感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。Syrj?nen于1979年首先提出HPV感染可能在肺癌的發(fā)生過(guò)程中起著重要的作用。隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)高危型HPV16在肺癌的發(fā)生中是最常見(jiàn)的感染類型,HPV16中的E6和E7蛋白是肺癌發(fā)生發(fā)展中的主要致癌基因。本研究通過(guò)討論肺癌患者與良性病變患者的胸膜腔積液細(xì)胞中HPV16 E7、CDK4/6、Fox M1、P16和ACP5的表達(dá),在肺癌細(xì)胞系中研究HPV16 E7、CDK4/6、Fox M1、P16和ACP5之間所存在的負(fù)反饋調(diào)控關(guān)系,初步闡明HPV16 E7能通過(guò)P16-p Rb通路中CDK6/Fox M1表達(dá)上調(diào)負(fù)反饋抑制P16蛋白表達(dá)。因此,發(fā)現(xiàn)和研究新的具有... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

HPV16 E7通過(guò)激活CDK6介導(dǎo)FoxM1上調(diào)肺癌細(xì)胞ACP5表達(dá)的分子機(jī)制


腹水患者的ACP染色

胸腔積液,患者,間皮細(xì)胞,表達(dá)強(qiáng)度


中的表達(dá)水平和表達(dá)強(qiáng)度明顯高于惡性積液(p< 0.01)獲得 ACP 陽(yáng)性信號(hào)。者的 ACP 染色。80%的反應(yīng)性間皮細(xì)胞是 ACP 染色陽(yáng)性:細(xì)胞性 (細(xì)胞質(zhì)中沒(méi)有粉紅色)。ACP 染色,x400。ACP,酸性磷

轉(zhuǎn)染,質(zhì)粒,蛋白表達(dá),干擾技術(shù)


圖 3 A、C. 在 H460 細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染 HPV16 E7 質(zhì)粒,采用 Western blot 檢測(cè) E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的蛋白表達(dá),qRT-PCR 檢測(cè) E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1及 ACP5 的 mRNA 表達(dá)。圖 3B、D. 在 LK2 細(xì)胞系中,干擾 E7SiRNA,Western blot 檢測(cè) E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1 和 ACP5 的蛋白表達(dá)水平,q RT-PCR 檢測(cè) E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1 和 ACP5 的 m RNA 的表達(dá)情況。* p<0.05,** p< 0.01。3.3 干擾 HPV16 E7 明顯下調(diào)了 P16、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的蛋白表達(dá),同時(shí)明顯下調(diào)了 CDK6、FoxM1 及 ACP5 的 mRNA 表達(dá)。為進(jìn)一步驗(yàn)證 HPV16 E7 對(duì) P16、CDK4、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的調(diào)控作用,我們通過(guò)干擾技術(shù),采用 HPV16 E7-specific siRNA 將 LK2 細(xì)胞中的 HPV16 E7 敲除,應(yīng)用 HPV16 E7-nonspecific siRNA 和模擬干擾作為空白對(duì)照,結(jié)果顯示抑制HPV16 E7 明顯下調(diào)了 P16、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的蛋白表達(dá),同時(shí) P16、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的 mRNA 表達(dá)也呈現(xiàn)下降趨勢(shì),其中 CDK6、FoxM1 及 ACP5 的mRNA 表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,CDK4 的蛋白和 mRNA 表達(dá)變化均不明顯,結(jié)果見(jiàn)圖

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TMPRSS4基因在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)研究[J]. 李受南,吳正球,盧強(qiáng)昌,雷敬富,羅德豐.  臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐. 2017(02)
[2]DLL4和TMPRSS4在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 王維,池菲,欒艷超,白峰,李強(qiáng).  臨床誤診誤治. 2016(07)



本文編號(hào):3573235

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