目的:原發(fā)性肝癌是一種嚴重威脅我國人民健康的惡性腫瘤。目前的治療策略包括手術治療、化學藥物治療、放射治療、介入治療。其中化學藥物治療對早中晚期肝癌均有一定的療效,而且經常與其他治療方法配合使用,是一種治療肝癌的常用策略。然而化學藥物原藥由于存在非特異性藥物遞送、毒副作用等問題,臨床使用效果不理想。因此,尋找一種安全有效的肝癌治療藥物是亟需解決的關鍵問題。根據古文獻研究和現代藥理研究結果,活血化瘀藥姜黃中的姜黃素被認為是一種安全有效的廣譜抗腫瘤藥物,在體內外實驗中姜黃素均表現良好的抗腫瘤藥效,姜黃素抑制腫瘤細胞的藥理作用包括抑制增殖、誘導凋亡、抑制轉移和侵襲、逆轉多藥耐藥性。此外,姜黃素具有保護肝細胞的作用,可以顯著降低小鼠血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶水平,減輕小鼠急性肝細胞壞死的程度。然而姜黃素的臨床應用受到其自身理化性質的限制,例如,水溶性差、生物利用度低、光穩(wěn)定性差等。這些問題隨著納米技術的發(fā)展,得到了一定程度的改善,姜黃素載藥膠束在提高抗腫瘤藥效、利用EPR效應被動靶向至腫瘤組織等方面表現出一定的優(yōu)勢。但早期研制的膠束大多不具有功能性,所以在主動靶向、智能釋放藥物、載藥量方面存在一...

【文章來源】： 中國中醫(yī)科學院北京市

【文章頁數】：143 頁

【文章目錄】：
全文摘要
Abstract
英文縮略詞表
創(chuàng)新點
論文綜述
    1 肝癌的流行病學概況及現有治療策略
    2 活血化瘀藥治療肝癌的理念和姜黃素的抗腫瘤藥理作用
        2.1 抑制增殖
        2.2 誘導凋亡
            2.2.1 上調Caspase
            2.2.2 調節(jié)Bcl-2家族基因表達水平
            2.2.3 上調P53蛋白表達
        2.3 抑制侵襲和轉移
            2.3.1 抑制基質金屬蛋白酶
            2.3.2 抑制血管生成
        2.4 逆轉多藥耐藥性
            2.4.1 下調ABC跨膜轉運蛋白表達水平
            2.4.2 上調DNA拓撲酶表達水平
    3 姜黃素臨床應用面臨的問題
        3.1 口服生物利用度低
        3.2 體內代謝迅速
        3.3 水溶性差
    4 抗腫瘤納米制劑
        4.1 主動靶向膠束
            4.1.1 葉酸
            4.1.2 透明質酸
            4.1.3 甘草次酸
            4.1.4 轉鐵蛋白
            4.1.5 單克隆抗體
        4.2 環(huán)境響應膠束
            4.2.1 pH響應型
            4.2.2 還原響應型
            4.2.3 酶響應型
            4.2.4 溫度響應膠束
            4.2.5 光響應膠束
            4.2.6 磁響應膠束
        4.3 多功能混合膠束
    5 設計思路
技術路線圖
第一章 基于F68的衍生物合成和結構確認
    1 引言
    2 儀器與試劑
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 實驗方法
        3.1 FAP合成路徑
        3.2 FBP合成路徑
        3.3 FGA合成路徑
        3.4 FAC合成路徑
        3.5 FBC合成路徑
        3.6 聚合物結構分析
            3.6.1 核磁共振氫譜
            3.6.2 傅里葉紅外圖譜
    4 結果
        4.1 核磁共振氫譜
        4.2 傅里葉紅外圖譜
    5 討論
第二章 姜黃素油水分配系數測定和聚合物材料的HLB與包封率、載藥量相關性研究
    1 引言
    2 儀器與試劑
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 實驗方法
        3.1 建立姜黃素含量測定方法
            3.1.1 供試品溶液制備方法
            3.1.2 色譜條件
            3.1.3 線性范圍
            3.1.4 方法學研究和含量測定
        3.2 姜黃素油水分配系數測定
            3.2.1 水飽和正辛醇和正辛醇飽和水制備
            3.2.2 正辛醇中姜黃素飽和濃度測定
            3.2.3 水中姜黃素飽和濃度測定
        3.3 聚合物材料HLB計算
            3.3.1 建立表面活性劑親水基團系數與HLB線性函數
            3.3.2 F68及其衍生物的HLB值計算
        3.4 聚合物HLB與包封率、載藥量相關性研究
            3.4.1 制備不同材料的姜黃素載藥膠束溶液
            3.4.2 檢測各組膠束的包封率和載藥量
    4 實驗結果
        4.1 姜黃素含量測定方法
            4.1.1 色譜條件適用性
            4.1.2 線性范圍
            4.1.3 精密度
            4.1.4 穩(wěn)定性
            4.1.5 重復性
            4.1.6 加樣回收率
        4.2 姜黃素油水分配系數計算
        4.3 聚合物HLB計算
        4.4 HLB與包封率、載藥量的相關性
            4.4.1 不同聚合物材料制備膠束的載藥量和包封率測定
            4.4.2 各組膠束的包封率和載藥量與HLB的相關性
    5 討論
第三章 FAP、FBP和MIX的姜黃素載藥膠束制備工藝優(yōu)化
    1 引言
    2 儀器與試劑
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 實驗方法
        3.1 考察FAP/姜黃素膠束制備方法
        3.2 考察制備FAP/姜黃素膠束的最佳溶劑
        3.3 考察制備FAP/姜黃素膠束的最佳投藥量
        3.4 考察制備FAP/姜黃素膠束的最佳溫度
        3.5 考察制備FAP/姜黃素膠束的最佳水相體積
        3.6 FAP/姜黃素膠束工藝條件驗證
        3.7 考察最優(yōu)工藝對FBP/姜黃素膠束制備的適用性
        3.8 考察制備MIX/姜黃素膠束的最佳材料比例
        3.9 MIX/姜黃素膠束工藝條件驗證
    4 結果
        4.1 制備FAP/姜黃素膠束的最佳制劑方法
        4.2 制備FAP/姜黃素膠束的最佳有機溶劑
        4.3 制備FAP/姜黃素膠束的最佳投藥量
        4.4 制備FAP/姜黃素膠束的最佳溫度
        4.5 制備FAP/姜黃素膠束的最佳水相體積
        4.6 最佳工藝條件驗證
        4.7 考察最優(yōu)工藝對FBP/姜黃素膠束制備的適用性
        4.8 考察制備MIX/姜黃素膠束的最佳材料比例
        4.9 MIX/姜黃素膠束工藝條件驗證
    5 討論
第四章 疏水鏈段修飾后CMC下降和溫度對膠束制備影響的熱力學研究
    1 引言
    2 儀器與試劑
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 實驗方法
        3.1 疏水鏈段分子量對材料熱力學函數的影響
            3.1.1 F68供試品溶液配制
            3.1.2 FAC供試品溶液配制
            3.1.3 FAP供試品溶液配制
            3.1.4 MIX供試品溶液配制
            3.1.5 不同材料量熱曲線測定
        3.2 溫度對混合膠束的熱力學性質的影響
            3.2.1 MIX溶液配制
            3.2.2 不同溫度對MIX膠束形成過程中的熱力學函數影響
    4 實驗結果
        4.1 疏水鏈段分子量對材料熱力學函數的影響
        4.2 溫度對混合膠束熱力學函數的影響
    5 討論
第五章 姜黃素載藥膠束的制劑學評價
    1 引言
    2 儀器與試劑
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 方法
        3.1 膠束外觀形態(tài)評價
        3.2 穩(wěn)定性
            3.2.1 儲存穩(wěn)定性
            3.2.2 在10% FBS的PBS中的穩(wěn)定性
        3.3 pH敏感性
        3.4 CMC和丁達爾現象
            3.4.1 制備FAP、FBP、MIX和F68空白膠束溶液
            3.4.2 丁達爾現象觀察
            3.4.3 CMC
        3.5 體外累積釋放
            3.5.1 含量測定及其方法學研究
            3.5.2 體外累積釋放實驗供試品含量測定
        3.6 材料的溶血性實驗
            3.6.1 MIX膠束溶液制備
            3.6.2 紅細胞分離
            3.6.3 溶血實驗
    4 結果
        4.1 MIX/姜黃素膠束的外觀形態(tài)
        4.2 膠束的穩(wěn)定性
        4.3 膠束的pH敏感性
        4.4 丁達爾現象和CMC
            4.4.1 丁達爾現象
            4.4.2 CMC
        4.5 體外累積釋放率
            4.5.1 線性范圍
            4.5.2 精密度
            4.5.3 穩(wěn)定性
            4.5.4 重現性
            4.5.5 加樣回收率
            4.5.6 體外釋放實驗供試品溶液檢測
        4.6 溶血性實驗
    5 討論
第六章 MIX/姜黃素膠束細胞水平體外藥效學評價
    1 引言
    2 儀器與試劑
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 方法
        3.1 細胞培養(yǎng)
            3.1.1 細胞復蘇
            3.1.2 細胞傳代
        3.2 細胞活性實驗
            3.2.1 MTT溶液配制
            3.2.2 MTT實驗
        3.3 細胞凋亡實驗
        3.4 不同膠束對細胞核形態(tài)的影響
            3.4.1 含4%多聚甲醛(w/v)的PBS配制
            3.4.2 Hoechst 33342溶液配制
            3.4.3 高內涵細胞成像系統(tǒng)觀察細胞核形態(tài)變化
        3.5 不同膠束對細胞內ROS水平的影響
        3.6 尼羅紅含量測定方法和載藥膠束制備
            3.6.1 尼羅紅載藥膠束制備
            3.6.2 供試品溶液制備
            3.6.3 色譜條件
            3.6.4 方法學考察和含量測定
            3.6.5 配制尼羅紅原藥溶液
        3.7 肝癌細胞對不同膠束的攝取能力考察
            3.7.1 流式細胞儀檢測不同膠束給藥后細胞內紅色熒光強度
            3.7.2 流式細胞儀檢測MIX/NR給藥不同時間細胞內紅色熒光強度
            3.7.3 高內涵細胞成像儀比較不同膠束給藥后細胞內紅色熒光強度
            3.7.4 流式細胞儀檢測MIX/NR給藥不同時間細胞內紅色熒光強度
    4 結果
        4.1 細胞活性實驗
        4.2 細胞凋亡實驗
        4.3 不同膠束對細胞核形態(tài)的影響
        4.4 不同膠束對胞內ROS水平的影響
        4.5 尼羅紅含量測定方法和載藥膠束制備
            4.5.1 色譜條件適用性
            4.5.2 線性范圍
            4.5.3 精密度
            4.5.4 穩(wěn)定性
            4.5.5 重復性
            4.5.6 加樣回收率
            4.5.7 含量測定
        4.6 細胞攝取實驗
    5 討論
全文總結
    1 總結
    2 不足之處及展望
參考文獻
致謝
個人簡歷
附件


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[3]基于普朗尼克P123-聚（β-氨基酯）多功能納米系統(tǒng)的研究[D]. 蔡曉青.山東大學. 2016

碩士論文
[1]pH敏感型姜黃素殼聚糖膠束制劑的研究[D]. 戴書暢.江蘇大學. 2019
[2]姜黃素對甲狀腺乳頭狀癌TPC-1細胞侵襲和遷移的影響[D]. 孫麗靜.華北理工大學. 2019
[3]腫瘤CD44受體靶向混合聚合物膠束的構建與評價[D]. 林靜.佳木斯大學. 2018
[4]姜黃素聯合生態(tài)動力素對CC14誘導的肝損傷的保護作用及機制[D]. 賈玉華.延邊大學. 2018
[5]姜黃素對缺氧HepG2細胞誘導的人臍靜脈內皮細胞血管生成作用的研究[D]. 楊傳玉.福建醫(yī)科大學. 2018
[6]優(yōu)化姜黃素納米脂質體的制備及其體內外特性研究[D]. 王雪婷.安徽醫(yī)科大學. 2018
[7]二甲雙胍和姜黃素合用抑制肝癌HepG2細胞侵襲轉移作用及機制研究[D]. 張輝輝.山東大學. 2017
[8]氧化還原敏感型姜黃素聚合物膠束的制備及其性質研究[D]. 曹延武.天津大學. 2015
[9]環(huán)境響應性姜黃素納米給藥系統(tǒng)的制備及體外評價[D]. 張曉麗.浙江大學. 2014



本文編號：3552921