目的COPD是一種常見的、可以預(yù)防和治療的疾病,其死亡率高,嚴(yán)重危害人類健康。復(fù)方龍星片為根據(jù)全國名老中醫(yī)黃吉賡處方制備而來的曙光醫(yī)院院內(nèi)制劑,臨床治療COPD療效顯著,但其作用機制尚不明確。本研究對其機制進行了探討。方法（1）將Wistar大鼠隨機分為空白組、模型組、龍星片低、中、高劑量組、陽性沙丁胺醇和地塞米松組,煙熏4周后開始給藥干預(yù)直至處死,煙熏12周后氣管滴注脂多糖溶液,煙熏16周后全部處死,檢測肺功能,取肺組織HE、Masson染色觀察氣道病理及形態(tài),ELISA測血清炎癥因子IL-8、TNF-α、LTB4水平,生化法測氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白MDA、SOD、GSH/GSSG水平。（2）基于Illumina hiseq平臺,對空白、模型、龍星片組大鼠肺組織在某個時期轉(zhuǎn)錄出來的所有m RNA進行測序,完成原始數(shù)據(jù)質(zhì)控、轉(zhuǎn)錄組整體質(zhì)量的評估后,分析表達量,對樣本兩兩間比較,以FDR<0.05&|log2FC|≥1為標(biāo)準(zhǔn),篩選顯著差異表達基因,對其進行GO功能注釋分類、富集分析、KEGG通路富集分析及剪切分析。（3）參考藥效結(jié)果以“inflammatory response”... 

【文章來源】：上海中醫(yī)藥大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
主要縮略詞表
摘要
Abstract
引言
第一章 復(fù)方龍星片對COPD大鼠的藥理作用
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥物與試劑
        1.3 實驗儀器
    2 實驗方法
        2.1 動物分組與處理
        2.2 動物造模
        2.3 肺功能檢測
        2.4 收集血清及BALF
        2.5 肺組織病理切片與染色
        2.6 肺組織病理學(xué)觀察及形態(tài)定量分析
        2.7 支氣管形態(tài)學(xué)測量
        2.8 炎癥因子IL-8、TNF-α、LTB4 水平的測定
        2.9 氧化應(yīng)激水平蛋白MDA、SOD、GSH/GSSG含量的測定
        2.10 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果
        3.1 狀態(tài)觀察
        3.2 肺功能指標(biāo)
        3.3 氣道病理變化觀察
        3.4 肺組織病理學(xué)觀察及分析結(jié)果
        3.5 支氣管形態(tài)學(xué)測量結(jié)果
        3.6 炎癥因子IL-8、TNF-α、LTB4 的測定結(jié)果
        3.7 氧化應(yīng)激水平蛋白MDA、SOD、GSH/GSSG的測定結(jié)果
    4 討論
第二章 復(fù)方龍星片防治COPD大鼠的轉(zhuǎn)錄組測序研究
    1 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
    2 實驗方法
        2.1 樣本的選擇
        2.2 測序?qū)嶒灹鞒?br>        2.3 信息分析流程
    3 結(jié)果
        3.1 原始測序數(shù)據(jù)說明
        3.2 原始測序數(shù)據(jù)質(zhì)控
        3.3 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量剪切及統(tǒng)計
        3.4 與參考基因組比對
        3.5 轉(zhuǎn)錄組整體質(zhì)量評估
        3.6 表達量分析
        3.7 樣本間表達量評估
        3.8 表達差異分析
        3.9 差異基因表達模式聚類
        3.10 venn圖
        3.11 差異基因GO分類統(tǒng)計及富集分析
        3.12 差異基因KEGG通路富集分析
        3.13 可變剪切分析
    4、討論
第三章 復(fù)方龍星片防治COPD大鼠靶基因的預(yù)測及驗證
    1 實驗材料
        1.1 試劑及抗體
        1.2 主要儀器及耗材
    2 方法
        2.1 基因功能為主因素的篩選
        2.2 基因組間差異值為主因素的篩選
        2.3 Real-time PCR檢測篩選基因m RNA的變化
        2.4 Western blot檢測侯選靶基因蛋白的表達
    3 實驗結(jié)果
        3.1 龍星片功能基因的主要參與過程及基因數(shù)量
        3.2 顯著表達功能基因的文獻檢索結(jié)果
        3.3 功能為主因素預(yù)測靶基因的篩選結(jié)果
        3.4 表達差異為主因素預(yù)測靶基因的篩選結(jié)果
        3.5 篩選基因擴增結(jié)果
        3.6 篩選基因RT-PCR檢測結(jié)果
        3.7 預(yù)測靶基因Western-blot檢測結(jié)果
        3.8 龍星片防治COPD作用靶基因的分析及信號途徑的預(yù)測
    4 討論
第四章 以靶基因為導(dǎo)向的藥效成分的篩選及定量
    1 材料
        1.1 儀器
        1.2 試藥
    2 方法與結(jié)果
        2.1 復(fù)方龍星片處方藥材所含化學(xué)成分的統(tǒng)計
        2.2 以靶基因為導(dǎo)向的藥效成分的篩選
        2.3 復(fù)方龍星片藥效成分的定量-指紋圖譜研究
    3 結(jié)論
    4 討論
創(chuàng)新點
全文小結(jié)
致謝
參考文獻
附錄一 文獻綜述 慢性阻塞性肺疾病發(fā)病機制研究概況
    參考文獻
附錄二 在讀期間論文發(fā)表及專利申請情況
附錄三 攻讀博士學(xué)位期間成果


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3546824