第一部分未成熟腦SC后不同時期海馬神經發(fā)生和Notch信號途徑的動態(tài)演變特征目的:探索未成熟腦在驚厥持續(xù)狀態(tài)（Status convulsion,SC）后不同時期海馬區(qū)神經干細胞（Neural stem cells,NSCs）增殖、遷移、分化的動態(tài)演變過程,明確Notch信號途徑在SC后不同時期的變化特點。方法:選取20日齡的健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠120只,隨機分為SC模型組60只和正常對照組60只。采用氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射誘導建立SC模型,進行如下實驗:（1）用Ki67標記細胞增殖狀態(tài),免疫熒光染色檢測SC后1d、3d、60d時海馬齒狀回（dentategyrus,DG）中細胞增殖情況。（2）SC模型建立后腹腔注射Brd U標記NSCs,于SC后7天免疫熒光染色檢測Brd U分布情況,分析NSCs的遷移情況。（3）于SC后28天熒光染色雙標Brd U和GFAP或雙標Brd U和Neu N,以檢測NSCs分化為星型膠質細胞和神經元的情況。（4）免疫印跡法檢測SC后7d、28d、60d海馬Neu N和GFAP蛋白的表達。（5）尼氏染色分析SC后28d海馬神經... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

動物分組及實驗流程

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文46對照組，第3天增加更加明顯。而在SC后60天，SC組Ki67陽性細胞的數(shù)量迅速減少，顯著低于正常對照組。SC組在以上檢測時間點Ki67陽性細胞數(shù)變化的差異有統(tǒng)計學意義。說明長時程驚厥后急性期幼年鼠海馬神經發(fā)生顯著增加，而慢性期神經發(fā)生減少。圖1-2SC后不同時期大鼠海馬DG區(qū)Ki67表達的動態(tài)變化（Ki67：綠色，DAPI：藍色，100×，標尺100μm，n=5）Figure1-2DynamicchangesofKi67+cellnumberlocatedwithinDGregionofratsfollowingSC（Ki67:green,DAPI:blue.Scalebars:100μm.n=5foreachtimepoint）表1-1SC后不同時期大鼠海馬DG區(qū)內Ki67陽性細胞數(shù)變化（x±SD，n=5）Table1-1ChangeofKi67positivecellsinhippocampusDGregionofatdifferenttimeafterSC(x±SD，n=5)SC組對照組t值P值1d3d60d18.34±3.42***31.57±8.89***△3.05±1.13*7.22±2.165.03±1.865.98±1.746.1476.5343.1580.00030.00020.0134

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文49圖1-4SC后28天不同組大鼠海馬不同分區(qū)NSCs分化為神經元（BrdU綠色；NeuN紅色；DAPI藍色；黃箭頭：BrdU/NeuN雙標；白箭頭：BrdU單標；200×，標尺:100μm)Figure1-4DifferentiationofNSCsintoneuronsinthehippocampus28daysafterSC(BrdUgreen;Neunred;DAPIblue;Yellowarrow:BrdU/Neundoublelabel;whitearrow:BrdUsinglelabel;200×,scale:100μm)圖1-5SC后28天不同組大鼠海馬不同分區(qū)NSCs分化為膠質細胞（BrdU綠色；GFAP紅色；DAPI藍色；黃箭頭：BrdU/GFAP雙標；白箭頭：BrdU單標；200×；標尺:100μm)Figure1-5NSCsdifferentiatedintoglialcellsindifferenthippocampaldivisions28daysafter


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