采用具有環(huán)境響應(yīng)性能的藥物輸送材料可降低藥物的毒性,提高藥物的靶向釋放。本文通過合成金屬有機(jī)框架材料——沸石咪唑框架（ZIF）系列中的ZIF-8納米粒子,基于原位包埋法和葉酸修飾,用ZIF-8輸送細(xì)胞自噬抑制劑（3-甲基腺嘌呤）、茶多酚主要成分（表沒食子兒茶素沒食子酸酯）及其衍生物（單取代表沒食子兒茶素沒食子酸酯棕櫚酸酯）;圍繞ZIF-8的形貌結(jié)構(gòu)、pH響應(yīng)特征、對(duì)細(xì)胞毒性和自噬的影響,以及體內(nèi)抗腫瘤效果展開研究,以期為ZIF-8藥物載體在醫(yī)藥、材料等領(lǐng)域的應(yīng)用提供一定的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。全文主要工作及其成果如下:系統(tǒng)測(cè)定了順鉑分別與雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤聯(lián)合后對(duì)HeLa細(xì)胞自噬效果的影響,觀察到順鉑聯(lián)合自噬特異藥物后其細(xì)胞毒性及對(duì)細(xì)胞自噬的促進(jìn)能力有所增強(qiáng)。通過光譜法獲得了順鉑聯(lián)合藥物與HSA相互作用的熱力學(xué)函數(shù)。用等溫滴定量熱儀跟蹤測(cè)量了順鉑、雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤作用下的細(xì)胞放熱功率變化,在透射電子顯微鏡下同步觀察細(xì)胞內(nèi)自噬體。結(jié)果顯示,細(xì)胞自噬被促進(jìn)時(shí),其放熱速率提高,同時(shí)細(xì)胞中的自噬泡明顯增加。合成了一種基于ZIF-8的pH響應(yīng)型納米粒子,用于輸送3-甲基腺嘌呤（3-MA）... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：164 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１細(xì)胞自噬的示意圖

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文?第１章緒論??＼?７??Ａｔｉ％３?ＭＡ?／?ｌ＾ｔ＇ｏｎｄｒｉａ＇＇＊?Ｊ??．；：攻、?￣??ＣＱ?‘，４??卜ｙ?Ｄ＆＊ｍｉ＾ｅｃｌ?ｎ＇ｊｔｏｃ／ＫＸｖ＞ｖＪ??｜?Ｆｏ＾Ａｕ??Ｖ?’?ｃｉｈｉＭｏｎ?Ｊ??Ｃｒｆｌ?ｄ＾ａｔｈ?ｏｒ?ｇｒｏｗｔｈ?ａｒｒｒ＾ｌ?＾＾??Ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ?Ｈｅａｌｔｈｙ?ｃｅ＾ｌｓ??圖１．２Ｆｅ＠Ａｕ通過線粒體介導(dǎo)自噬選擇性地引起細(xì)胞毒性。［４７］??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｆｅ＠Ａｕ?ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｅｌｓ?ｌｅａｄ?ｔｏ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ?ｔｈｒｏｕｇｈ?ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ??ａｕｔｏｐｈａｇｙ．??１．２．３細(xì)胞自噬的檢測(cè)手段??在自噬過程中，半碗狀的雙層膜結(jié)構(gòu)延展并融合形成閉合的自噬體。然后，??與溶酶體融合生成了自噬溶酶體，降解自噬體內(nèi)由于病理或生理原因損傷的細(xì)胞??器及其他的細(xì)胞結(jié)構(gòu)或過量?jī)?chǔ)存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等來滿足細(xì)胞代謝的需求，從而維持??細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。目前普遍采用的自噬檢測(cè)方法包括透射電子顯微鏡、免疫熒光、蛋白??印跡等方法可檢測(cè)自噬體的生成及自噬標(biāo)志蛋白。［４８］自噬的研究發(fā)展也提高了??自噬的檢測(cè)要求，檢測(cè)自噬體形態(tài)和動(dòng)態(tài)觀察自噬的降解過程（即自噬流分析）??可精確評(píng)估包括降解障礙和自嗤體形成在內(nèi)的自嗤功能障礙，全面準(zhǔn)確地評(píng)測(cè)自??６??

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文?第１章緒論??￣￣?．?．?？?乂，ｒ?．?．．‘乂，＜??．?＇：，您＞＇．：．，輪?ｒ??，．表ｒ??．．？Ｖ?Ｉ：?．“．．４??參…：」ｙ：觀??ｉＭｆｅａ??圖１．３?ＴＥＭ下觀察小鼠的纖維母細(xì)胞。其中單箭頭代表雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬體，雙??箭頭代表自溶酶體。箭頭所指的碎片為自噬體貨物。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?ＴＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｓｔａｒｖｅｄ?ｍｏｕｓｅ?ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ．?Ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ??ｄｏｕｂｌｅ－ｍｅｍｂｒａｎｅｄ?ａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍｅｓ，?ａｎｄ?ｄｏｕｂｌｅ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ??ａｕｔｏｌｙｓｏｓｏｍｅｓ／ａｍｐｈｉｓｏｍｅｓ．?Ａｒｒｏｗｈｅａｄｓ?ｄｅｓｉｇｎａｔｅ?ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ?ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ?ｄｅｂｒｉｓ?ａｓ??ａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍａｌ?ｃａｒｇｏ．??②檢測(cè)自噬體標(biāo)記蛋白ＬＣ３??微菅相關(guān)蛋白?１?輕鏈３（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?１?ｌｉｇｈｔ?ｃｈａｉｎ?３，?ＬＣ３／Ａｔｇ８）??作為位于自噬體膜上的自噬體標(biāo)記蛋白，在細(xì)胞內(nèi)以兩種形式存在：ＬＣ３－Ｉ和??ＬＣ３－ＩＩ。細(xì)胞中ＬＣ３蛋白被合成后，Ａｔｇ４蛋白酶會(huì)切割ＬＣ３的Ｃ端使其變成ＬＣ３－Ｉ，??散布于細(xì)胞內(nèi)。在細(xì)胞中形成自嗤體后，鱗脂酰乙醇胺（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）??和ＬＣ３－Ｉ偶聯(lián)形成ＬＣ３－ＩＩ，其主要位于自噬體內(nèi)外膜上。區(qū)別于其他位于自噬膜??上的Ａｔｇ蛋白僅影響自噬的某些階段不同，ＬＣ３－ＩＩ能穩(wěn)定地存在于自噬體膜上直??到其與溶酶體進(jìn)行融合


本文編號(hào)：3543387