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活血通腑方調(diào)控巨噬細(xì)胞極化和SOCS/JAK2/STAT/PPAR-γ通路防治腹腔粘連的機制研究

發(fā)布時間:2021-12-12 00:05
  背景/目的腹腔粘連(Intraperitoneal Adhesion,IA)是腹部外科手術(shù)中最具挑戰(zhàn)性的問題之一,它的粘連密度、出現(xiàn)癥狀的時間間隔和臨床表現(xiàn)各不相同,沒有可預(yù)測的模式。如今粘連性疾病已經(jīng)成為具有明顯發(fā)病率,而無有效療法的慢性醫(yī)學(xué)疾病。盡管近年來外科手術(shù)技巧和防粘連藥物取得了重要進(jìn)步,但仍舊沒有完全可靠的治療策略。炎癥和纖溶系統(tǒng)失衡是術(shù)后腹腔粘連形成的主要發(fā)病機制。巨噬細(xì)胞功能的改變可以調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和膠原蛋白沉積,密切參與術(shù)后腹腔粘連的生理病理過程。JAK/STAT通路及其上下游信號是巨噬細(xì)胞極化激活的主要途徑,導(dǎo)致巨噬細(xì)胞極化為不同的表型,M1型巨噬細(xì)胞(M1)分泌促炎細(xì)胞因子,M2型巨噬細(xì)胞(M2)分泌抗炎細(xì)胞因子,M1/M2的功能轉(zhuǎn)換影響腹腔粘連的嚴(yán)重程度;钛ǜ侥軌蛴行Х乐胃骨徽尺B,由大黃、延胡索、桃仁、萊菔子、紅花和芒硝組成,臨床已運用二十余年,然而其作用于細(xì)胞的相關(guān)分子機制仍不完全清楚。因此,在本研究中,我們建立RAW264.7巨噬細(xì)胞炎癥模型和大鼠腹腔粘連模型,明確活血通腑方是否通過調(diào)控巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)進(jìn)而改善粘連,從細(xì)胞分子水平和動物整體水平分析活血通... 

【文章來源】:南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:102 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

活血通腑方調(diào)控巨噬細(xì)胞極化和SOCS/JAK2/STAT/PPAR-γ通路防治腹腔粘連的機制研究


圖1-1?JAK/STAT通路影響巨噬細(xì)胞極化【55]??5??

曲線,巨噬細(xì)胞,含藥血清


?第二章活血通腑方調(diào)控巨噬細(xì)胞極化及其作用機制研究???3.結(jié)果??3.1活血通腑方對巨噬細(xì)胞活性的影響??我們使用CCK-8法檢測了含10%FBS的培養(yǎng)基和含2.5%、5%、10%、20%、30%HXTF??含藥血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)的RAW264.7巨噬細(xì)胞的細(xì)胞活性。細(xì)胞活力IC50曲線在本實驗??中無法擬合。但當(dāng)HXTF含藥血清濃度為5%和10%時,細(xì)胞存活率較高,而當(dāng)濃度分別??為20%和30%時,細(xì)胞存活率下降。因此,當(dāng)細(xì)胞活力大致相等時,我們選擇較大的血??清劑量,即10%濃度的HXTF含藥血清。圖2-1。??150-|??g??i100'?■?T?T?T??卜I'y?:??__,__i_rl_,__琴_,——??HXTF-mediated?Serum?(%)??圖2-1活血通腑方對RAW264.7巨噬細(xì)胞活性的影響??注:0指只含有10%FBS,不含活血通腑方含藥血清??36??

巨噬細(xì)胞,極化狀態(tài)


?南京中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文???3.2活血通腑方促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2極化??CD86和CD206分別是巨噬細(xì)胞Ml和M2表型的典型標(biāo)志物。我們使用流式細(xì)胞術(shù)??檢測各組巨噬細(xì)胞的極化趨勢,結(jié)果顯示:空白組CD86和CD206表達(dá)量分別為2.3土2.5%??和3.7±1.7%;?LPS+IFN-y處理過的巨噬細(xì)胞明顯表達(dá)CD86,占比達(dá)73.4±5.3%,CD206??表達(dá)量為13.4土2.4%,表明LPS+IFN-丫成功誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向Ml極化;丨L-4處理過的巨??嗤細(xì)胞明顯表達(dá)CD206,占比達(dá)64土8.9%,?CD86表達(dá)量為5.2±4.7%,表明IL-4成功誘??導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2極化;而經(jīng)HXTF處理的巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出了向M2極化的趨勢,CD206??表達(dá)量為53.6±7.5%,與丨L-4組接近,而CD86的表達(dá)量為5.8±2.8%,明顯低于LPS+IFN-??Y組,說明活血通腑方能夠誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2極化(圖2-2)。???Control???IL-4??——LPS+IFN-y?——HXTF??|〇.9-?\?|12-?|^2〇6p〇sitive??丨',丨::貧??0?100?1e3?1e4?1e5?0?100?1e3?1e4??CD86-APC?CD206-PE-Cy7??A?B??圖2-2活血通腑方影響巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)??37??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
[1]清腸合劑對腸粘連大鼠NLRP3炎癥小體-IL-1β信號通路的影響[D]. 王燕.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2016

碩士論文
[1]電針足三里干預(yù)大鼠腹腔粘連的作用及機制研究[D]. 張立儉.中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院 2010
[2]針刺防治術(shù)后粘連性腸梗阻的臨床觀察[D]. 湯國敏.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2009



本文編號:3535639

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