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炎癥微環(huán)境下miR-140-5p靶向作用Smad3影響軟骨細胞生物學(xué)特性的機制研究

發(fā)布時間:2021-12-10 11:02
  顳下頜關(guān)節(jié)(Temporomandibular joint,TMJ)是頜面部唯一同時具備轉(zhuǎn)動和滑動運動的左右聯(lián)動關(guān)節(jié),參與了咀嚼、吞咽、言語、表情和呼吸等精細且復(fù)雜的功能活動。骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)是關(guān)節(jié)疾病中的典型代表,其發(fā)病率高,對人體危害大,嚴重影響了患者的生活質(zhì)量。雖有不少學(xué)者對這類關(guān)節(jié)疾病進行了相關(guān)研究報道,但目前對骨關(guān)節(jié)炎,尤其是顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎(Temporomandibular joint osteoarthritis,TMJ-OA)復(fù)雜的病理機制尚缺乏完整認識。以往的研究表明,miR-140-5p在軟骨細胞分化和軟骨內(nèi)穩(wěn)態(tài)過程中發(fā)揮著重要的作用,miR-140-5p基因敲除鼠會出現(xiàn)增齡性骨關(guān)節(jié)炎的癥狀。然而,臨床研究卻發(fā)現(xiàn)骨關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)軟骨中miR-140-5p表達顯著增加。雖然越來越多的研究認為miR-140-5p與OA關(guān)系密切,但其功能作用至今仍存在爭議。有關(guān)miR-140-5p在OA,尤其在TMJ-OA中的作用機制亟需被闡明。本研究第一部分通過建立炎癥微環(huán)境體外實驗?zāi)P?模擬了 TMJ-OA樣病損改變。第二部分探索了 miR-140... 

【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】:120 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

炎癥微環(huán)境下miR-140-5p靶向作用Smad3影響軟骨細胞生物學(xué)特性的機制研究


圖1.下頜髁突軟骨細胞及脛骨生長板軟骨細胞染色鑒定??

細胞生長曲線,軟骨,髁突,脛骨


定波長450nm,測定各組軟骨細胞在Id、3d、5?d、7??d、9?d時的光密度(表6),其光密度值(Optical?density,?0D)可間接反映活細??胞數(shù)量。結(jié)果可見下頜髁突軟骨細胞與脛骨生長板軟骨細胞在培養(yǎng)至3?d時兩組??間的OD值無明顯差別。當(dāng)培養(yǎng)至5?d后兩種軟骨細胞開始迅速分裂增殖,進入對??數(shù)生長期,且脛骨生長板軟骨細胞的OD值較下頜髁突軟骨細胞高。第9?d時0D??值無明顯增長,細胞進入增殖的平臺期。兩種軟骨細胞增殖趨勢大體一致,均呈??“S”形的生長曲線(圖2)。經(jīng)兩因素重復(fù)測量方差分析(整體比較)發(fā)現(xiàn):脛骨??生長板軟骨細胞的增殖水平整體上升幅度大于髁突軟骨細胞。再對兩組在各個時??間點的0D值進行單因素方差分析以及各時間點數(shù)據(jù)差值t檢驗,結(jié)果提示5?d時脛??骨生長板軟骨細胞組和下頜髁突軟骨細胞組的OD值差異顯著?傊y(tǒng)計結(jié)果??提示脛骨生長板軟骨細胞的細胞增殖能力強于髁突軟骨細胞。??表6.?CCK-8檢測的0D值表達變化([土s)??^MCCs?(n=3)?TGPCs?(n=3)??Td?0.312±0.017?0.290±0.017??3d?0.327±0.0I9?0.359±0.014??5d?0.406±0.0I6*?0.510±0.025??7d?0.497±0.014?0.549±0_031??9d?0.489±0.046?0.574±0.058??注:a’=0.05,正態(tài)分布數(shù)據(jù)。??0.8-1??-?-MCCs??T?-m-?TGPCs??!::??O?r??0.2-??〇?〇?I?i?i?i?i?i?i?i?i?

相關(guān)蛋白,炎癥,微環(huán)境,軟骨


p-CREB?CREB??-151?.邊?151??re'l'??c?tj?*?—?g?ns??P:illi?1JIUI??S????1???1???£????I?j?I?4?1^1^??o?o??o?o??MCCs?TGPCs?MCCs?TGPCs??圖7.炎癥微環(huán)境下軟骨細胞表型相關(guān)蛋白表達降低??Fig.?7?Reduction?of?chondrocyte?phenotype-related?proteins?in?inflammatory??microenvironment.?MCCs?and?TGPCs?were?treated?with?IL-ip?for?24?h,?then?the??chondrocyte?phenotype-related?proteins,?including?Sox9??CREB,?p-CREB,?TGF-P3,??were?determined?by?Western?blotting.?All?values?are?presented?as?means?士?SD?(n=3).??*P<0.05?compared?with?control?group?in?MCCs.?**尸<0.01?compared?with?control??group?in?MCCs.?#尸<0.05?compared?with?control?group?in?TGPCs.?##P<0.01??compared?with?control?group?in?TGPCs.?&P<0.05?comparison?between?MCCs?and??TGPCs?in?the?infla

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3532494

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