已有的研究表明,NLRP3炎癥小體介導(dǎo)了腦缺血再灌注損傷并且NLRP3炎癥小體的活化加重腦缺血再灌注損傷;腦缺血再灌注激活線粒體自噬,并且線粒體自噬的活化能減輕腦缺血再灌注損傷,線粒體自噬成為了腦缺血再灌注干預(yù)的重要潛在靶點(diǎn);而且線粒體自噬是負(fù)性調(diào)控NLRP3炎癥小體活化的重要因素;因此本課題探討腦缺血再灌注中線粒體自噬對NLRP3炎癥小體活化的調(diào)控作用,揭示線粒體自噬-NLRP3炎癥小體途徑在腦缺血再灌注病理過程中的作用。基于三七總皂苷和黃芪甲苷在腦缺血再灌注中的多靶點(diǎn)保護(hù)機(jī)制,基于線粒體自噬和NLRP3炎癥小體在腦缺血再灌注中的作用,本課題進(jìn)一步從線粒體自噬-NLRP3炎癥小體途徑探討三七總皂苷和黃芪甲苷抗腦缺血再灌注機(jī)制。第一部分本部分旨在探討本研究探討腦缺血再灌注中線粒體自噬對NLRP3炎癥小體的調(diào)控作用,揭示線粒體自噬對NLRP3炎癥小體的調(diào)控在腦缺血再灌注中的作用。采用改良線栓法制備大鼠大腦中動脈栓塞腦缺血再灌注模型,我們發(fā)現(xiàn)在大鼠腦缺血再灌注中存在NLRP3炎癥小體的活化,并且抑制NLRP3炎癥小體或或抑制其下游的Caspase-1能減輕大鼠腦缺血再灌注損傷,表明在腦缺血... 

【文章來源】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

大鼠腦缺血再灌注后不同時間點(diǎn)皮層NLRP3、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1、Pro-IL-1β、IL-1β、Pro-IL-18、IL-18蛋白水平的變化

Ac-YVAD-CMK 和 MCC950 組腦梗死體積均顯著降低（。假手術(shù)組大鼠神經(jīng)功能行為正常，神經(jīng)功能缺失評分 0的神經(jīng)功能缺失癥狀，出現(xiàn)對側(cè)前爪不能伸直，或行走時走時向損傷對側(cè)傾倒，或無自發(fā)活動等神經(jīng)功能障礙，神于假手術(shù)組（p<0.01，圖 2C）；與模型組比較，Ac-YVAD經(jīng)功能缺失評分均顯著降低（p<0.01，圖2C）。以上研究提化加大鼠重腦缺血再灌注損傷。

圖 3 線粒體自噬介導(dǎo)了 RAP 對大鼠腦缺血再灌注后 NLRP3 炎癥小體活化的抑制作用(A) 各組大鼠腦組織 NLRP3、Cl. Caspase-1、IL-1β、和 IL-18 的 Westernblot 條帶圖；（B）各組 NLRP3 蛋白表達(dá)比較；(C) 各組 Cl. Caspase-1 蛋白表達(dá)比較;（D）各組 IL-1β 蛋白表達(dá)比較; （E）各組 IL-18 蛋白表達(dá)比較。n=5，與假手術(shù)組比較，**P<0.01；與模型組比較,##P<0.01；與 RAP 組比較，&&P<0.01。3.4 RAP 激活大鼠腦缺血再灌注中 PINK1/Parkin 介導(dǎo)的線粒體自噬有研究報道 RAP 可以促進(jìn)腦缺血再灌注中的線粒體自噬[90]，因此我們進(jìn)一步觀察了 RAP 對腦缺血再灌注后線粒體自噬的影響。結(jié)果如圖 4 所示，與假手術(shù)組相比，模型組 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值顯著升高（p < 0.05，圖 4A 和 4B），P62蛋白水平顯著降低（p<0.01，圖 4A 和 4C），并且模型組腦組織中線粒體標(biāo)志蛋白 COX4I1 和 TOMM20 的水平顯著降低（p < 0.05 和 p < 0.01，圖 4A、4E 和4F），這提示腦缺血再灌注后存在線粒體自噬活化。與模型組比較，RAP 組 LC3-

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3526803