目的基于TLR4介導(dǎo)的MyD88依.賴信號(hào)通路和TRIF依賴信號(hào)通路,并結(jié)合藥效動(dòng)力學(xué)模型和中位效應(yīng)方程定量地評(píng)價(jià)大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素體外抗炎的分子機(jī)制與量效關(guān)系,進(jìn)一步明確大黃蒽醌類化合物抗炎活性與分子結(jié)構(gòu)關(guān)系的科學(xué)內(nèi)涵。方法1.采用MTT法檢測(cè)大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素對(duì)RAW 264.7巨噬細(xì)胞活性的影響,從而明確三種藥物在該細(xì)胞系中的安全濃度范圍,并確定實(shí)驗(yàn)濃度。2.采用預(yù)給藥實(shí)驗(yàn)方案。大黃酸（80μM、40μM、20μM）、大黃素（80μM、40μM、20μM）、蘆薈大黃素（20μM、10μM、5μM）分別與RAW 264.7巨噬細(xì)胞預(yù)孵育30 min后,加入LPS（終濃度1μg/mL）刺激,以LPS加入時(shí)間為“零”時(shí)間點(diǎn)。在0、5、15、30、60、90、120 min后,取細(xì)胞裂解液采用Western blot檢測(cè)IKKβ、TBK1蛋白及其磷酸化蛋白的表達(dá);0、10、30、60、120、240min后取細(xì)胞裂解液,Western blot檢測(cè)NFκB p65、PI3K、IRF3蛋白及其磷酸化蛋白的表達(dá);0、1、2、4、8、12、24 h后,取細(xì)胞裂解液采用Weste... 

【文章來源】：成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：172 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

LPS激活的TLR4信號(hào)通路Figure1.TheTLR4signalingpathwayinducedbyLPS

的各重要節(jié)點(diǎn)是目前醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。下游炎癥信號(hào)的傳導(dǎo)縱橫交錯(cuò)，牽一發(fā)而動(dòng)全身，動(dòng)力學(xué)研究可以深入、準(zhǔn)確的、定量的研究信號(hào)通路的傳導(dǎo)機(jī)制，有助于我們更全面地了解 TLR4 介導(dǎo)的 MyD88 依賴信號(hào)通路以及 TLR4 依賴信號(hào)通路調(diào)節(jié)的機(jī)制，不論對(duì)于病理生理學(xué)研究，還是治療藥物的開發(fā)評(píng)價(jià)有著不可替代的作用。2. 大黃蒽醌類化合物抗炎作用的研究現(xiàn)狀近代藥理學(xué)研究表明大黃具有抗腫瘤、抗炎、抗菌、退熱、降血脂、降壓等作用。大黃的主要化學(xué)成分為蒽醌類化合物，包括大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等，其中大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素（見圖 2）含量較高。研究表明，此三種蒽醌化合物可通過下調(diào)炎癥信號(hào)通路中的蛋白，降低信號(hào)網(wǎng)絡(luò)末端炎性因子的表達(dá)，從而發(fā)揮抗炎作用。

技術(shù)路線圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]大黃素甲醚和大黃酚對(duì)缺氧神經(jīng)細(xì)胞損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 張明.蘭州大學(xué) 2012
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