研究目的濾泡輔助性T細(xì)胞（T follicular helper cell,Tfh）為重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞,趨化因子受體7型（Chemokine receptor type 7,CCR7）是趨化因子受體超家族中的重要成員,可介導(dǎo)細(xì)胞遷移侵襲,但它們?cè)趶?fù)發(fā)性流產(chǎn)（Recurrent spontaneous abortion,RSA）的作用機(jī)制并不明確。本課題研究Tfh細(xì)胞和CCR7在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中的表達(dá)及具體作用機(jī)制。研究方法收集RSA和因自愿要求終止妊娠行人工流產(chǎn)術(shù)的正常早孕婦女（孕8-10周）的對(duì)照組患者外周血和蛻膜,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)兩組間外周血和蛻膜組織中Tfh細(xì)胞亞型表達(dá)差異,并進(jìn)行相關(guān)性分析。收集RSA和對(duì)照組患者絨毛組織,利用定量PCR和Western Blot方法檢測(cè)兩組絨毛組織CCR7表達(dá)差異;在JEG-3和JAR細(xì)胞系中,通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CCR7對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞遷移和侵襲能力的作用,采用干擾RNA、添加CCR7配體激動(dòng)劑等實(shí)驗(yàn),通過(guò)定量PCR和Western Blot等方法研究CCR7對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞遷移侵襲能力的具體調(diào)控機(jī)制;最后在RSA和對(duì)照組患者絨毛組織... 

【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytometry,FCM)檢測(cè)外周血CD4+CXCR5+memoryTfh細(xì)胞比例Figure1-1ThepercentageofCD4+CXCR5+memoryTfhcellsinperipheralbloodweredetectedbyFlowcytometry(FCM)

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文143.外周血中CD4+CXCR3-CCR6-memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3-CCR6+memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3+CCR6-memoryTfh細(xì)胞和CD4+CXCR3+CCR6+memoryTfh細(xì)胞的表達(dá)采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)外周血中CD4+CXCR3-CCR6-memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3-CCR6+memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3+CCR6-memoryTfh細(xì)胞和CD4+CXCR3+CCR6+memoryTfh細(xì)胞的表達(dá)。細(xì)胞分離后取單個(gè)核細(xì)胞，然后依次以CD4+，CXCR5+，PD1+，CCR6+,CXCR3+設(shè)門(mén)，如圖1-3所示，計(jì)算四組細(xì)胞分型的百分比。圖1-2FCM檢測(cè)外周血CD4+CXCR5+PD-1+memoryTfh細(xì)胞比例Figure1-2ThepercentageofCD4+CXCR5+PD-1+memoryTfhcellsinperipheralbloodweredetectedbyFCM在流式分析中，結(jié)果顯示：外周血中，相對(duì)于對(duì)照組CD4+CXCR3-CCR6-memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3-CCR6+memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3+CCR6-memoryTfh細(xì)胞和CD4+CXCR3+CCR6+memoryTfh細(xì)胞在流產(chǎn)組表達(dá)無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P>0.05,見(jiàn)圖1-4。4.外周血中CD4+CXCR5+PD1+CCR7-memoryTfh細(xì)胞的表達(dá)

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文16圖1-4FCM兩組CD4+CXCR3-CCR6-memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3-CCR6+memoryTfh細(xì)胞、CD4+CXCR3+CCR6-memoryTfh細(xì)胞和CD4+CXCR3+CCR6+memoryTfh細(xì)胞比值Figure1-4ThepercentageofCD4+CXCR3-CCR6-memoryTfhcells、CD4+CXCR3-CCR6+memoryTfhcells、CD4+CXCR3+CCR6-memoryTfhcellsandCD4+CXCR3+CCR6+memoryTfhcellsintwogroups圖1-5FCM檢測(cè)外周血CD4+CXCR5+PD-1+CCR7-memoryTfh細(xì)胞比例Figure1-5ThepercentageofCD4+CXCR5+PD-1+CCR7-memoryTfhcellsinperipheralbloodweredetectedbyFCM


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