本文關(guān)鍵詞：滌痰湯對老年MCI模型大鼠的干預作用及NMDA受體亞基表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:輕度認知功能障礙(mild cognitive impairment,MCI)屬發(fā)生在老年人群中常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變,是介于正常衰老和癡呆之間的一種臨床狀態(tài),是老年癡呆的主要危險因素。中醫(yī)學認為“呆病多痰”,“治呆不治痰非其治也”。結(jié)合本課題組前期研究結(jié)果,我們推測,β淀粉樣蛋白的毒性作用和NMDA受體介導神經(jīng)突觸可塑性相關(guān)分子機制表達異常是MCI的重要致病因素,可能與中醫(yī)學痰邪致病密切相關(guān)。本課題選用13月大鼠D-半乳糖皮下注射合并半高脂飼料喂養(yǎng)復合造模制作老年輕度認知功能障礙大鼠模型,從行為學、神經(jīng)病理、Aβ及其分泌酶、NMDA受體亞基蛋白表達等方面,探討滌痰湯對MCI的作用及機制。方法:13月齡SPF級SD大鼠隨機分為5組,即空白組、模型組、滌痰湯高劑量組(以下簡稱“滌高組”)、滌痰湯低劑量組(以下簡稱“滌低組”)、西藥組,每組12只,另設3月齡SPF級SD青年大鼠12只作為青年組對照。參照文獻造模方法,將模型組、滌高組、滌低組、西藥組均每日頸背部皮下注射D-半乳糖50 mg?kg-1體重,自正式實驗第5周起同時給予半高脂飼料喂食,至第8周末,構(gòu)建老年認知功能障礙大鼠模型。滌高組、滌低組、西藥組大鼠,于第5周開始灌胃給藥,滌痰湯低、高劑量組給藥量分別為滌痰湯折合生藥量4.275、8.55g·kg-1體重,西藥組給藥量為鹽酸多奈哌齊0.9mg?kg-1體重,空白組、模型組、青年組給予等容積的蒸餾水灌胃。各組均按10 mL?kg-1灌胃,每日1次,至第8周末止。采用Morris水迷宮、穿梭箱實驗觀察各組大鼠學習記憶能力;生化比色法檢測大鼠血清、皮質(zhì)SOD、MDA水平;光鏡、透射電鏡觀察大鼠海馬組織形態(tài)學變化;酶聯(lián)免疫吸附法檢測大鼠海馬Aβ1-42含量;免疫組化法觀察大鼠海馬組織PS-1、PS-2表達;生化比色法檢測大鼠海馬、皮質(zhì)神經(jīng)遞質(zhì)Ach、Glu含量;酶聯(lián)免疫吸附法檢測NGFβ、BDNF神經(jīng)生長因子含量水平;免疫組化法觀察大鼠海馬NR2A、NR2B表達情況,利用realtime RT-PCR檢測nr2a、nr2b的mrna表達量。結(jié)果:1.滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠學習記憶及抗氧化能力的影響:(1)morris水迷宮實驗中,模型組大鼠較青年組、空白組定位航行尋找平臺逃避潛伏期、空間探索實驗平臺穿越次數(shù)、目標象限時間均有顯著性差異(p0.05);與模型組相比,滌高組、西藥組潛伏期均明顯縮短(p0.01),滌低組潛伏期亦縮短(p0.05)。穿梭箱實驗中,模型組較空白組大鼠電擊次數(shù)明顯增多(p0.05),主動逃避潛伏期時間顯著延長(p0.01);與模型組比較,滌高組、滌低組、西藥組大鼠電擊次數(shù)、主動逃避潛伏期時間均有顯著性差異(p0.05)。(2)抗氧化能力:模型組較青年組大鼠皮質(zhì)、血清sod水平均顯著下降(p0.05),皮質(zhì)mda水平均顯著下上升(p0.01);與模型組相比,滌痰湯各劑量組大鼠血清、皮質(zhì)sod水平均顯著升高(p0.05),血清、皮質(zhì)mda水平均顯著下降(p0.05)。2.滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠海馬組織形態(tài)學的影響:(1)海馬he染色結(jié)果:模型組大鼠海馬ca1區(qū)大量神經(jīng)元錐體細胞結(jié)構(gòu)破壞、排列分布散亂,大量細胞胞體縮小、正常錐體細胞數(shù)量明顯減少;與模型組相比,滌痰湯各劑量組正常錐體細胞數(shù)量明顯增多。(2)透射電鏡結(jié)果:模型組與青年組比較,有髓神經(jīng)纖維平均直徑增加,神經(jīng)纖維髓鞘厚度明顯增厚;與空白組比較,神經(jīng)氈內(nèi)突觸數(shù)量減少;突觸間隙結(jié)構(gòu)不清晰,突觸前線粒體嵴模糊。與模型組相比,滌痰湯各劑量組線粒體結(jié)構(gòu)大致正常,突觸間隙結(jié)構(gòu)較清晰,突觸后膜的致密物質(zhì)較厚。3.滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠海馬aβ1-42含量及ps-1、ps-2表達的影響:與空白組比較,模型組大鼠海馬ca1區(qū)ps-1、ca3區(qū)ps-2陽性表達增多(p0.01),海馬aβ1-42含量上升(p0.05)。與模型組相比,滌低組、滌高組大鼠海馬aβ1-42含量下降(p0.05),海馬ps-1、ps-2表達均下降(p0.01)。4.滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠海馬神經(jīng)遞質(zhì)及神經(jīng)生長因子含量的影響:與空白組相比,模型組大鼠的海馬、皮質(zhì)ach含量均顯著下降(p0.05),皮質(zhì)glu含量均顯著上升(p0.05);海馬組織ngfβ、bdnf含量亦下降(p0.05);與模型組相比,滌高組、西藥組大鼠的海馬、皮質(zhì)ach含量均顯著上升(p0.01),滌高組大鼠的海馬、皮質(zhì)glu含量顯著下降(p0.01),西藥組、滌低組大鼠的海馬、皮質(zhì)glu水平亦下降(p0.05);滌高組海馬組織ngfβ、bdnf含量均顯著升高(p0.01)。5.滌痰湯對模型大鼠海馬nmda受體亞單位表達的影響:模型組較青年組、空白組大鼠海馬各區(qū)nr2a、nr2b表達明顯減少(p0.05),nr2a、nr2bmrna基因表達量下調(diào)(p0.05);與模型組相比,滌高組、滌低組、西藥組大鼠海馬nr2a、nr2b各區(qū)表達均增加(p0.01),滌高組、滌低組、西藥組nr2a、nr2bmrna基因表達量明顯上調(diào)(p0.05);與西藥組相比,滌高組海馬nr2a、nr2b各區(qū)表達有顯著性差異(p0.01)。結(jié)論:1.模型大鼠的學習記憶能力和空間定位能力下降明顯,抗氧化能力減退,海馬病理表現(xiàn)與自然衰老大鼠相似,是老年輕度認知功能障礙的理想模型。2.改善機體(大腦皮質(zhì)、血清)抗氧化能力,逆轉(zhuǎn)海馬ca1區(qū)突觸結(jié)構(gòu)損傷,可能是滌痰湯保護老年mci模型大鼠突觸功能的作用機制。3.滌痰湯可調(diào)節(jié)大鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)ach、glu含量,增加突觸傳遞。增加大鼠海馬ngf、bdnf蛋白表達,促進新生神經(jīng)元和突觸的生長和分化。4.通過下調(diào)γ-分泌酶(ps1、ps2)的表達起到降低aβ1-42的關(guān)鍵作用,提高神經(jīng)元表面nmda受體亞基水平,保護突觸功能,可能是滌痰湯改善老年mci模型大鼠突觸可塑性的重要機制。主題詞:輕度認知功能障礙,n-甲基-d門冬氨酸受體,痰邪,@滌痰湯
【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-13
• 縮略詞表13-15
• 第一部分 滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠學習記憶及抗氧化能力的影響15-40
• 前言15-17
• 材料與方法17-22
• 結(jié)果22-27
• 討論27-35
• 參考文獻35-40
• 第二部分 滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠海馬組織形態(tài)學的影響40-54
• 前言40-41
• 材料與方法41-43
• 結(jié)果43-47
• 討論47-51
• 參考文獻51-54
• 第三部分 滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠海馬Aβ1-42含量及PS-1、PS-2 表達的影響54-66
• 前言54-55
• 材料與方法55-58
• 結(jié)果58-60
• 討論60-63
• 參考文獻63-66
• 第四部分 滌痰湯對老年輕度認知功能障礙大鼠海馬神經(jīng)遞質(zhì)及神經(jīng)生長因子含量的影響66-80
• 前言66-67
• 材料與方法67-69
• 結(jié)果69-71
• 討論71-76
• 參考文獻76-80
• 第五部分 滌痰湯對模型大鼠海馬NMDA受體NR2A、NR2B亞基表達的影響80-99
• 前言80-81
• 材料與方法81-87
• 結(jié)果87-92
• 討論92-96
• 參考文獻96-99
• 結(jié)語99-100
• 附錄 文獻綜述：輕度認知功能障礙中西醫(yī)診療進展100-119
• 參考文獻111-119
• 在校期間科研成績119-120
• 致謝120-121
• 附圖121-136

  本文關(guān)鍵詞：滌痰湯對老年MCI模型大鼠的干預作用及NMDA受體亞基表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：349613