糖尿病是由基因和環(huán)境相互作用引起的一種慢性代謝性疾病,具有發(fā)病率高、致死率高、并發(fā)癥多等特點(diǎn),其中2型糖尿病患者占糖尿病患病總?cè)藬?shù)的90%以上。目前,2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚不完全明確,缺乏糖尿病發(fā)病前期的診斷標(biāo)志物。為了研究2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的生物化學(xué)機(jī)制及尋找可能的生物標(biāo)志物,本論文首先建立了基于超高效液相色譜-四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UHPLC-QTOF-MS）的尿液代謝組分析方法,并采用該方法研究了 2型糖尿病不同發(fā)病階段的尿液代謝組差異。主要內(nèi)容包括:首先,建立了基于UHPLC-QTOF-MS的尿液代謝組分析方法。通過優(yōu)化色譜柱、流動(dòng)相和質(zhì)譜參數(shù)等檢測(cè)條件,建立了適用于尿液的全局性代謝組分析方法,可以覆蓋三羧酸循環(huán)、脂肪酸β氧化、蛋白質(zhì)代謝、核酸代謝、氨基酸代謝、膽汁酸代謝物,肉堿代謝等多條代謝途徑。采用代謝物標(biāo)準(zhǔn)品,建立了本實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)。同時(shí)優(yōu)化了尿液代謝組分析的樣品前處理方法、稀釋倍數(shù)以及采集條件等,為尿液代謝組的UHPLC-QTOF-MS分析提供了方法。其次,應(yīng)用上述方法研究了 2型糖尿病發(fā)病過程尿液代謝組的變化。采用上述建立的分析方法,研究了正常人、糖尿病前期患者... 

【文章來源】：中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院精密測(cè)量科學(xué)與技術(shù)創(chuàng)新研究院)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：123 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１糖尿病的并發(fā)癥??

?第１章引言???在符合標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)如下［９］：??ＦＰＧ?（ｍｍｏｌ／Ｌ）??３?—?■?—５．７?（Ｉ）??ｎｏｒｍａｌ??０?３．３?７．８?１１．１?ＤＭ：?ＲＰＧ?＞１１．１?ｍｍｏｌ／Ｌ??２ｈＰＧ?（ｍｍｏｌ／Ｌ）??注丨ＧＴ：糖耐量受損．ＩＦＧ：空腹血糖受損，丨ＧＲ：血榑調(diào)節(jié)受損ｉ即ＩＧＴ?＋?ＩＦＧ?＞??圖１．２糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ?ｃｒｉｔｅｒｉａ?ｆｏｒ?ｄｉａｂｅｔｅｓ?ｍｅｌｌｉｔｕｓ??糖尿病前期包括：糖耐量受損（Ｉｍｐａｉｒｅｄ?Ｇｌｕｃｏｓｅ?Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ，ＩＧＴ），空腹血??糖受損（Ｉｍｐａｉｒｅｄ?Ｆａｓｔｉｎｇ?Ｇｌｕｃｏｓｅ，ＩＦＧ），其中：??（１）?ＩＧＴ的診斷標(biāo)準(zhǔn)為空腹血糖＜７．０?ｍｍｏｌ／Ｌ?（１２６?ｍｇ／ｄＬ）且ＯＧＴＴ血糖??多７．８?＜１１．１?ｍｍｏｌ／Ｌ?（多?１４０?到?＜２００?ｍｇ／ｄＬ）；??（２）?ＩＦＧ的診斷標(biāo)準(zhǔn)為空腹血糖為６．１－６．９?ｍｍｏｌ／Ｌ?（１１０到１２５?ｍｇ／ｄＬ）且??ＯＧＴＴ?血糖＜７＿８?ｍｍｏｌ／Ｌ?（?１４０?ｍｇ／ｄＬ）。??糖尿病的判斷標(biāo)準(zhǔn)為：空腹血糖彡７．０?ｍｍｏｌ／Ｌ?（１２６?ｍｇ／ｄＬ）或ＯＧＴＴ血糖??彡?１１．１?ｍｍｏｌ／Ｌ?（２００ｍｇ／ｄＬ）或隨機(jī)血糖＞１１．１?ｍｍｏｌ／Ｌ?（２００ｍｇ／ｄＬ）或?ＨｂＡｌｃ》??４８?ｍｍｏｌ／ｍｏｌ?（等效于?６．５％）。??ＩＤＦ?根據(jù)美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)（Ａｍｅｒｉｃａｎ?Ｄｉａｂｅｔｅｓ?Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，ＡＤＡ）?２００３?年修??訂的分型標(biāo)準(zhǔn)［１（）—１２］和ＷＨ

Ｌａｓｌｅｙ曾說：“基因組學(xué)和??蛋白質(zhì)組學(xué)告訴你什么可能會(huì)發(fā)生，而代謝組學(xué)告訴你什么已經(jīng)發(fā)生了??（Ｇｅｎｏｍｉｃｓ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ?ｔｅｌｌ?ｙｏｕ?ｗｈａｔ?ｍｉｇｈｔ?ｈａｐｐｅｎ，?ｂｕｔ?ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ?ｔｅｌｌｓ?ｙｏｕ??ｗｈａｔ?ａｃｔｕａｌｌｙ?ｄｉｄ?ｈａｐｐｅｎ?）’’?［５１］?〇??＿?？＊￣＊？?＊—？?｜??＿?－—？?｜??＾??Ｖ，?／??Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ??４??Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ／Ｆｕｎｃｔｉｏｎ??圖１．３系統(tǒng)生物學(xué)的組成??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｓｙｓｔｅｍｓ?Ｂｉｏｌｏｇｙ??１．２．３代謝組學(xué)的研究方法??代謝組學(xué)的分析技術(shù)主要是核磁共振技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù)兩種。??核磁共振技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于樣品前處理簡(jiǎn)單，可以在接近生理狀態(tài)下實(shí)現(xiàn)樣品??的無損檢測(cè)。但是ＮＭＲ技術(shù)在代謝組學(xué)分析中有其局限性：所需樣本量較大（一??般＞２００隊(duì)），靈敏度相對(duì)較低（？叫ｎｏｌ／Ｌ）?［５５］，譜峰重疊嚴(yán)重，動(dòng)態(tài)范圍較窄??（３￣４個(gè)數(shù)量級(jí)）。生物樣本代謝組的特點(diǎn)在于種類較多，化學(xué)性質(zhì)各異，動(dòng)態(tài)范??圍較大，有些難獲得的樣本（比如腦、心臟等組織，或者不可重現(xiàn)歷史性的樣品??隊(duì)列）比較珍貴，可供檢測(cè)的量可能只有幾微升或幾微克，ＮＭＲ技術(shù)難以滿足??樣本檢測(cè)的需求。??和ＮＭＲ技術(shù)相比，質(zhì)譜技術(shù)可以克服ＮＭＲ技術(shù)在靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍、樣??品需求量等方面的缺點(diǎn)，但是質(zhì)譜檢測(cè)也會(huì)存在離子抑制、結(jié)構(gòu)鑒定困難等問題，??在實(shí)際分析中，代謝物首先進(jìn)行色譜分離：包括氣相色譜和液相色譜兩種。氣相??色譜技術(shù)可以分析熱穩(wěn)定性好的低沸點(diǎn)代謝物，然而大

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中年2型糖尿病患者尿液生物標(biāo)志初篩[J]. 付晗,劉小立,于微,朱李佳,鄭丹,王俊.  衛(wèi)生研究. 2013(06)
[2]代謝組學(xué):一個(gè)迅速發(fā)展的新興學(xué)科（英文）[J]. 唐惠儒,王玉蘭.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2006(05)

博士論文
[1]幾種生物納米材料對(duì)機(jī)體代謝影響的研究[D]. 柳志剛.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢物理與數(shù)學(xué)研究所) 2016



本文編號(hào)：3494048