目的:希特林缺陷病（Citrin deficiency,CD）是SLC25A13雙等位基因變異引起的常染色體隱性遺傳病。希特林缺陷導致的新生兒肝內膽汁淤積癥（Neonatal Intrahepatic Cholestasis caused by Citrin Deficiency,NICCD）是目前最主要的兒科CD臨床表型。由于缺乏公認的臨床和生化診斷標準,NICCD確診依賴SLC25A13基因分析。本研究旨在識別新的SLC25A13突變類型,為NICCD患者確診和家系遺傳咨詢提供實驗依據(jù);同時總結國人,尤其是廣東人群的SLC25A13突變特點,為深化對SLC25A13基因突變譜特征的科學認識提供精準醫(yī)學支撐。方法:研究對象是2017年5月初至2018年12月底到我院兒科就診,并根據(jù)臨床和實驗室特征高度懷疑患有CD的103名嬰兒及其父母。采集研究對象外周血標本,提取基因組DNA,篩查4種高頻SLC25A13變異。在僅檢測到一個變異的情況下,通過Sanger測序分析SLC25A13基因所有18個外顯子及其側翼序列,以尋找另一個可能的致病變異。如仍未找到致病變異,就進一步通過LA-PCR行... 

【文章來源】：暨南大學廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

希特林蛋白分子結構(圖片引自文獻[2])

暨南大學博士學位論文6圖1希特林蛋白分子結構(圖片引自文獻[2])圖2希特林蛋白的主要功能示意圖A氨生成尿素的過程，B希特林在蘋果酸-天冬氨酸穿梭中的作用。(注縮寫說明：Arg，精氨酸；ASA，精氨酸琥珀酸；Asp，天冬氨酸；aKG，α-酮戊二酸；Cit，瓜氨酸；CP，氨基甲酰磷酸；cyt，細胞質；Fum，延胡索酸；Glc，葡萄糖；Glu,谷氨酸；Mal，蘋果酸；mit，線粒體；OAA，草酰乙酸；Orn，鳥氨酸；Pyr，丙酮酸。圖片引自文獻[13])1.2希特林缺陷病發(fā)病機理希特林的主要功能有：作為蘋果酸-天冬氨酸穿梭的關鍵部份，參與糖異生；將細胞質的還原性輔酶I(NADH)運輸?shù)骄�粒體中，作為蘋果酸天冬氨酸穿梭的一部分,能夠降低胞質內還原性輔酶I(NADH)與氧化型輔酶I(NAD)的比值；將天冬氨酸從線粒體轉運到胞質參與蛋白質，核苷酸和尿素合成[13]，見圖2。當希特林缺陷時，天冬氨酸無法從線粒體轉入胞質，胞質中的天冬氨酸減少，

暨南大學博士學位論文14CO2培養(yǎng)箱NU智能型美國Nuaire微波爐WD700中國Galanz紫外透射儀ZF-90中國上海顧村電光儀器廠超微量分光光度計NanoDrop2000C賽默飛世爾科技全自動凝膠成像系統(tǒng)KodakGelLogic1500美國柯達冷凍高速離心機Sorvalllegendmicro21R型賽默飛世爾科技DNA測序儀ABI3730xl賽默飛世爾科技倒置顯微鏡CK40M日本OLYMPUS3研究方法3.1分子診斷技術路線圖應用PCR、PCR-RFLP、Sanger測序、分子克隆等技術對疑診CD的患兒及其家系開展SLC25A13分子診斷研究(圖3)。圖3CD病SLC25A13分子診斷示意圖3.2SLC25A13基因高頻變異篩查

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]我國兒科希特林缺陷病患者分子診斷研究：SLC25A13基因突變譜及其地理分布[D]. 林偉霞.暨南大學 2017

碩士論文
[1]NICCD患兒SLC25A13基因型與生化表型，以及血清銅藍蛋白水平與其他生化改變的相關性研究[D]. 趙新景.暨南大學 2013



本文編號：3459554