研究目的:通過(guò)混合游離脂肪酸（Free Fatty Acid,FFA）作用于大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞以建立大鼠脂肪栓塞綜合征（Fat embolism syndrome,FES）的細(xì)胞模型,通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞模型中炎癥因子的變化,檢測(cè)內(nèi)源性脂氧素A4（LXA4）及脂氧素A4受體（ALX）表達(dá)水平的變化,來(lái)探討脂氧素A4及脂氧素A4受體在脂肪栓塞綜合征發(fā)病過(guò)程中的細(xì)胞調(diào)控及其機(jī)制。研究方法:選取平均體重為80～120g的健康成年清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠進(jìn)行手術(shù),取材大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)并對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)和FITC-BSI結(jié)合試驗(yàn)的鑒定[1]。通過(guò)棕櫚酸、硬脂酸、油酸和花生四烯酸四種脂肪酸以1:1:1:1比例混合溶解于0.01mol/L的NaOH溶液中制作混合游離脂肪酸,作用于大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,從而建立大鼠脂肪栓塞綜合征細(xì)胞模型[2]。將混合游離脂肪酸制備成O.lmM,0.5mM和1mM三種不同的濃度,根據(jù)混合游離脂肪酸不同的濃度不同的作用時(shí)間來(lái)作用于大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行分組[2]。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme Linked ImmunoSo... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２?ＦＩＴＣ－ＢＳＩ結(jié)合試驗(yàn)人鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞熒光以微鏡卜＇及現(xiàn)??

第一部分?脂氧素Ａ４及其受體在大鼠脂肪栓塞綜合征中的細(xì)胞調(diào)控及機(jī)制??時(shí)間的增加，炎癥因子ＩＬ－６也不斷升高，且各組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Ｐ＜０．０５）。??＃??＇?＾??＃?１?１??漏］?＇??★??Ｉ６＂－?．?ｉ?＊??＂：ＬａｌＭ??對(duì)照組?６ｈ組?１２ｈ組?２４ｈ組??圖３?ＥＬＩＳＡ檢測(cè)不同作用時(shí)間ＦＦＡ作用于ＰＭＥＣｓ后ＩＬ－６的變化??（＊是與空白對(duì)照組比較Ｐ＜０．０５，＃是相互各組間的比較Ｐ＜０．０５）??炎癥因子ＩＬ－１０的ＥＬＩＳＡ結(jié)果（圖４）表明，在混合游離脂肪酸０．５ｍＭ處理大??鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞６?ｈ組、１２?ｈ組、２４?ｈ組較空白對(duì)照組（Ｏｈ組）均有顯著升高，??且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５）；隨著作用時(shí)間的增加，炎癥因子ＩＬ－１０也不斷升高，??且各組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Ｐ＜０．０５）。??＃??＇???＃?Ｉ?１??４００－ｊ?Ｉ?１?＊??■ｋ??ｆ３〇〇＿?＊?ｍｍ??０?ｌｉｉｉｌａ?Ｈｉｌｌ?ｌｌｌｌ??對(duì)照組?６ｈ組?１２ｈ組?２４ｈ組??圖４?ＥＬＩＳＡ檢測(cè)不同作用時(shí)間ＦＦＡ作用于ＰＭＥＣｓ后ＩＬ－１０的變化??（＊是與空白對(duì)照組比較Ｐ＜〇．〇５，?＃是相互各組間的比較Ｐ＜０．０５）??２０??

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]游離脂肪酸對(duì)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1的表達(dá)調(diào)節(jié)及其作用機(jī)制[J]. 章怡葦,田鯤,汪燕,張蓉,王愛(ài)忠.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(03)
[2]混合游離脂肪酸對(duì)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Toll樣受體4表達(dá)的影響及其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)機(jī)制[J]. 李靜,尚嘉偉,劉溪,王愛(ài)忠.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(05)
[3]小鼠急性脂肪栓塞綜合征模型中炎癥因子及炎癥信號(hào)通路的激活[J]. 尚嘉偉,劉溪,魏海玲,崔德榮,王愛(ài)忠.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(02)
[4]大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的改進(jìn)及細(xì)胞鑒定[J]. 李穎川,江偉,周明,薛瑛,李亞春.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(11)



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