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植物精油對白紋伊蚊和埃及伊蚊的驅(qū)避效果研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-03 03:12

  本文關(guān)鍵詞:植物精油對白紋伊蚊和埃及伊蚊的驅(qū)避效果研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:白紋伊蚊(Aedes albopictus Skuse)和埃及伊蚊(Aedes aegypti Linnaeus)是熱帶傳染性疾病登革熱(Dengue Fever, DF)是傳播媒介。由于該病的發(fā)病率在最近幾十年里大幅度上升,現(xiàn)今無安全有效的藥物用于登革熱的特異性預(yù)防和治療。因此,當(dāng)今大多數(shù)國家多采用控制和監(jiān)測其傳播媒介伊蚊的方法來防治登革熱。其中,驅(qū)避劑的使用一直是阻止該病傳播的一個(gè)重要手段。國內(nèi)外關(guān)于驅(qū)避劑研究報(bào)道較多,但隨著合成驅(qū)避劑DEET的抗性和副作用問題越來越引起大眾的擔(dān)憂,研究者們開始更多的從植物中尋找更加高效安全低毒的天然驅(qū)避劑來替代DEET。本研究以白紋伊蚊(主)和埃及伊蚊(次)為實(shí)驗(yàn)對象,綜合運(yùn)用多種生物測定方法來評估24種精油的驅(qū)避活性,具體研究內(nèi)容如下:1.伊蚊類蚊蟲標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)方法改進(jìn)研究。在比較國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)蚊蟲的差異基礎(chǔ)上優(yōu)化實(shí)驗(yàn)室內(nèi)蚊蟲飼養(yǎng)步驟,如更快更好分離蚊蟲蛹與幼蟲,成功組裝一套人工血膜裝置,可代替動(dòng)物用于蚊蟲飼養(yǎng)與繁殖,也可改裝成離體模型生物測定方法來評價(jià)待測物的驅(qū)避活性;2.植物精油驅(qū)避蚊蟲效果生物測試方法的改進(jìn)研究。本章綜合探討四種離體生物測試模型的組裝和應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)摸索后確定KD模型的最佳叮咬膜界面為Parafilm封口膜,其引誘率達(dá)到66.7%,確定Y型嗅覺行為測試儀的最佳測試條件為:流速0.3 L/min,135s,195s和255s時(shí)其引誘率達(dá)到穩(wěn)定值83%;3.24種植物精油對伊蚊的驅(qū)避效果研究。采用Y型嗅覺儀初篩24種植物精油后證實(shí)以H油,生姜油,丁香花蕾油,廣藿香油等13種精油在內(nèi)表現(xiàn)出95%以上的驅(qū)避率,再用人手涂膚蚊籠實(shí)驗(yàn)評價(jià)9種精油,對白紋伊蚊的驅(qū)避效果最好的是30%的丁香花蕾油,其完全保護(hù)時(shí)間(CPT)達(dá)到130min,其次是廣藿香油90min,同時(shí)丁香花蕾油的ED50值為0.002μg/cm2 [95%,0.000-0.005],該濃度顯著低于廣藿香油的2.496μg/cm2 [95%,0.504-5.068],丁香花蕾油CPT中值為60min與廣藿香的36min差異不顯著,丁香花蕾油比廣藿香油在更低濃度能展示更好的驅(qū)避活性,但持效性差異不大。對三種不同產(chǎn)地的H精油用Hemotek人工血膜系統(tǒng)離體方法評價(jià)其驅(qū)避率,以DEET為陽性對照,確定3個(gè)H系列精油的驅(qū)避率極佳。4.陳年精油與新鮮精油驅(qū)避持效性比較研究。通過對比9種新鮮的和陳年的精油驅(qū)避活性,發(fā)現(xiàn)同濃度下,陳年精油的持效性得到大力延長,如生姜最高可以比新鮮精油的CPT高8倍之多,由最初的15min改善到120min。5.白紋伊蚊對三種植物精油的嗅覺電位反應(yīng)測定。通過結(jié)合GC-MS和GC-EAD兩種蚊蟲化學(xué)生態(tài)學(xué)方法鑒定三個(gè)H精油,廣藿香油及丁香花蕾油的驅(qū)避活性成分。證實(shí)蚊蟲對多種化合物呈現(xiàn)強(qiáng)烈的嗅覺活性電生理反應(yīng),常見的已報(bào)道具有驅(qū)避活性的如芳樟醇,石竹烯等化合物,同時(shí)茉莉酮,二氫茉莉酮酸甲酯也具有很明顯的觸角電生理反應(yīng),可能是很好的潛在驅(qū)避活性單體。綜上所述,本論文以白紋伊蚊和埃及伊蚊為研究對象,組裝了一套膜系統(tǒng)喂血裝置用于蚊蟲飼養(yǎng),改進(jìn)了包括KD離體模型和Y-tube嗅覺行為測試儀等在內(nèi)的多種離體生物測定方法,用Y型嗅覺儀初篩24種植物精油,有10種包括A油在內(nèi)的精油達(dá)到95%以上的驅(qū)避率,用Hemotek離體方法進(jìn)一步證實(shí)A油的良好驅(qū)蚊活性,對丁香花蕾油和廣藿香油等多種精油采用人手涂膚方法評價(jià)其驅(qū)避率和完全保護(hù)時(shí)間,結(jié)論是丁香花蕾油能在更低濃度下保護(hù)人類不被蚊蟲叮咬。用GC-MS和GC-EAD等生化生理方法確定了白紋伊蚊對多種植物精油具有強(qiáng)烈的觸角電生理活性,常見的如芳樟醇等,還有多種化合物不曾有報(bào)道證實(shí)其驅(qū)蚊活性。這些研究結(jié)果為新型蚊蟲驅(qū)避劑的研究與開發(fā)提供了依據(jù),最終對登革熱的預(yù)防和防治具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。
【關(guān)鍵詞】:植物精油 驅(qū)避劑 伊蚊 GC-MS GC-EAD
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R184.31
【目錄】:
  • 致謝5-7
  • 摘要7-9
  • ABSTRACT9-13
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述13-42
  • 1.1 伊蚊和登革熱13-15
  • 1.2 伊蚊的防治方法15-23
  • 1.2.1 殺蟲劑的使用16
  • 1.2.2 驅(qū)避劑的使用16-23
  • 1.3 植物精油作為驅(qū)避劑的研究概況23-32
  • 1.3.1 植物精油的定義23
  • 1.3.2 植物精油的化學(xué)成分23-24
  • 1.3.3 植物精油的收集與分析鑒定24-26
  • 1.3.4 精油在植物體內(nèi)的分布26-27
  • 1.3.5 植物精油的生物學(xué)意義27
  • 1.3.6 植物精油的驅(qū)避活性27-30
  • 1.3.7 植物精油室內(nèi)驅(qū)避活性評估的生物測定方法30-32
  • 1.4 蚊蟲嗅覺系統(tǒng)角度出發(fā)探討驅(qū)避劑的作用機(jī)理32-40
  • 1.4.1 蚊子的嗅覺系統(tǒng)和嗅覺行為的產(chǎn)生過程32-33
  • 1.4.2 蚊子的寄主搜尋行為33-35
  • 1.4.3 蚊蟲的觸角電生理反應(yīng)記錄方法——GC-EAD35-37
  • 1.4.4 蚊蟲驅(qū)避劑的作用機(jī)理概述37-40
  • 1.5 論文研究目的與技術(shù)路線40-42
  • 1.5.1 目的40
  • 1.5.2 路線40-42
  • 第二章 試驗(yàn)用白蚊伊蚊和埃及伊蚊室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)養(yǎng)殖技術(shù)研究42-52
  • 2.1 倫敦大學(xué)衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)院埃及伊蚊飼養(yǎng)方法43-47
  • 2.1.1 試蟲飼養(yǎng)條件43
  • 2.1.2 試驗(yàn)材料43
  • 2.1.3 養(yǎng)殖技術(shù)43-47
  • 2.2 浙江大學(xué)城市昆蟲學(xué)實(shí)驗(yàn)室蚊蟲飼養(yǎng)方法47-49
  • 2.2.1 試蟲飼養(yǎng)條件47
  • 2.2.2 試驗(yàn)材料47
  • 2.2.3 養(yǎng)殖技術(shù)47-49
  • 2.3 兩地蚊蟲標(biāo)準(zhǔn)養(yǎng)殖方法比較和優(yōu)缺點(diǎn)評價(jià)49-50
  • 2.3.1 蛹與幼蟲的分離方法49
  • 2.3.2 糖水裝置49-50
  • 2.3.3 喂血裝置50
  • 2.4 討論50-52
  • 第三章 植物精油驅(qū)避蚊蟲效果離體生物測試方法的研究52-67
  • 3.1 離體模型生物測定方法的研究53-63
  • 3.1.1 K&D模型53-57
  • 3.1.2 風(fēng)洞模型57-59
  • 3.1.3 Y型嗅覺儀59-62
  • 3.1.4 Hemotek人工血膜系統(tǒng)62-63
  • 3.2 多種驅(qū)避劑生物測定方法評價(jià)63-65
  • 3.3 討論65-67
  • 第四章 植物精油對伊蚊的驅(qū)避效果研究67-92
  • 4.1 植物精油作為驅(qū)蚊劑使用的研究進(jìn)展綜述67-69
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容69-89
  • 4.2.1 2 種植物精油的驅(qū)蚊活性效果初步測定(Y-tube嗅覺儀測定法)69-74
  • 4.2.2 H油的驅(qū)蚊活性評價(jià)(Hemotek人工血膜系統(tǒng)離體試驗(yàn)方法)74-77
  • 4.2.3 9種精油的驅(qū)蚊活性復(fù)篩(GB2009人手涂膚蚊籠實(shí)驗(yàn))77-82
  • 4.2.4 丁香花蕾油和廣藿香油的驅(qū)避最低有效劑量評價(jià)(WH02009人手涂膚蚊籠實(shí)驗(yàn))82-89
  • 4.3 小結(jié)與討論89-92
  • 4.3.1. 植物精油的多種離體和活體生物測定方法89-90
  • 4.3.2 植物精油作為驅(qū)蚊劑使用的劑量反應(yīng)曲線和最低有效劑量90
  • 4.3.3 植物精油安全倫理審查90-92
  • 第五章 白紋伊蚊對三種植物精油的嗅覺電位反應(yīng)92-104
  • 5.1 材料與方法93-96
  • 5.1.1 供試蚊蟲93
  • 5.1.2 供試樣品和溶液配置93-94
  • 5.1.3 GC-MS和GC-EAD儀器條件94
  • 5.1.4 GC-EAD測定方法94-96
  • 5.2 結(jié)果與分析96-102
  • 5.2.1 埃及伊蚊對IN H2 EO精油的GC-EAD反應(yīng)圖譜96-97
  • 5.2.2 白蚊伊蚊對IN H2 EO精油的GC-EAD反應(yīng)圖譜97-98
  • 5.2.3 白蚊伊蚊對IN H1 EO的GC-EAD反應(yīng)98-99
  • 5.2.4 白蚊伊蚊對UK H EO的GC-EAD反應(yīng)99
  • 5.2.5 白蚊伊蚊對廣藿香油的GC-EAD反應(yīng)99-100
  • 5.2.6 白蚊伊蚊對丁香花蕾油的GC-EAD反應(yīng)100-102
  • 5.3 討論102-104
  • 第六章 研究總結(jié)與展望104-108
  • 6.1 研究總結(jié)104-105
  • 6.2 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)105
  • 6.3 有待進(jìn)一步研究的問題105-108
  • 參考文獻(xiàn)108-120
  • 附錄一 平行比較不同離體驅(qū)避模型的優(yōu)缺點(diǎn)120-121
  • 附錄二 上海醫(yī)藥臨床研究中心倫理審查委員會(huì)同意批件121-122
  • 附錄三 英國倫敦大學(xué)衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)院倫理委員會(huì)同意批件122

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本文編號:342218

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