目的:（1）本研究制備了利福噴丁聚乳酸緩釋微球,通過實驗評估了微球的體外藥物釋放特性、抗菌活性及組織相容性為后續(xù)實驗提供依據(jù)。（2）本研究以羥基磷灰石/β-磷酸三鈣（HA/β-TCP）復(fù)合材料為支架,負(fù)載利福噴丁聚乳酸緩釋微球構(gòu)建復(fù)合體。通過體外實驗評價該復(fù)合體對細(xì)胞增殖和成骨分化的影響及藥物釋放特性。（3）構(gòu)建兔脊柱結(jié)核實驗動物模型,在此基礎(chǔ)上,利用利福噴丁聚乳酸緩釋微球復(fù)合體對脊柱結(jié)核進(jìn)行治療,分別從脊柱結(jié)核病灶骨缺損處的組織修復(fù)效果及藥物療效兩方面綜合評估利福噴丁聚乳酸緩釋微球復(fù)合體。為臨床治療脊柱結(jié)核提供一種新的治療途徑。方法:（1）以利福噴丁為目標(biāo)藥物,聚乳酸為藥物載體,通過優(yōu)化復(fù)乳-溶媒揮發(fā)法制備利福噴丁聚乳酸緩釋微球,檢測微球粒徑、包封率及載藥率,檢測微球體外釋放能力及抑菌能力;通過倒置顯微鏡、CCK-8法、堿性磷酸酶染色及測定、茜紅素染色方法檢測利福噴丁聚乳酸緩釋微球?qū)撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)、粘附、增殖、成骨及理化特性的影響。通過細(xì)胞毒性試驗及溶血實驗評價其生物相容性。（2）利用流式細(xì)胞儀鑒定分離培養(yǎng)的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并進(jìn)行了多向分化能力的考察。本研究以羥基磷灰石/β... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

利福噴丁聚乳酸緩釋微球大體側(cè)面觀Figure1-1MorphologyofR

第一部分·結(jié)果19向上述試管中滴加已經(jīng)好的兔抗凝血0.05mL使其混勻，水浴60分鐘，溫度保持為37℃。所有試管均在2500轉(zhuǎn)/分，離心半徑10cm，離心5min，分別留取上清液。使用紫外可見分光光度計，波長545nm處測量吸光度，每組實驗均重復(fù)3次，計算平均值，考察溶血程度。溶血程度（%）=（樣品吸光度-陰性吸光度）/（陽性吸光度-陰性吸光度）×100%。按照國際標(biāo)準(zhǔn)化組織規(guī)定，醫(yī)用藥物及材料的溶血安全性評價標(biāo)準(zhǔn)溶血率小于5%時，符合醫(yī)用藥物及材料的標(biāo)準(zhǔn)要求；若溶血率大于５%時，則達(dá)不到醫(yī)用藥物及材料的安全性的標(biāo)準(zhǔn)要求。1.3統(tǒng)計學(xué)處理（1）數(shù)據(jù)整理：采用SPSS22.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、統(tǒng)計描述和統(tǒng)計分析。（2）統(tǒng)計描述：定量數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布則采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（sx），不符合正態(tài)分布則采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距（InterquartileRange，IQR）表示，定性數(shù)據(jù)以率的形式表示。（3）統(tǒng)計分析：定量資料滿足正態(tài)性則采用t檢驗或者方差分析；不滿足則采用基于秩次的非參數(shù)檢驗進(jìn)行比較。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。采用GraphPadPrism5統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)繪制分析圖。2結(jié)果2.1利福噴丁聚乳酸緩釋微球理化性質(zhì)及體外釋放的研究2.1.1利福噴丁聚乳酸緩釋微球的理化性質(zhì)利福噴丁聚乳酸緩釋微球外觀呈磚紅色，粉末狀，無粘連；聚乳酸微球外觀呈白色，粉末狀，無粘連（圖1-1）。圖1-1利福噴丁聚乳酸緩釋微球大體側(cè)面觀及正面觀聚乳酸微球大體側(cè)面觀及正面觀Figure1-1MorphologyofRPSMsandPLAmicrospheres在光學(xué)顯微鏡下，利福噴丁聚乳酸緩釋微球及聚乳酸微球絕大多數(shù)呈圓球形，外周圓整光滑，均勻分散，無聚集成團(tuán)（圖1-2）。

利福噴丁聚乳酸緩釋微球光鏡觀察（放大倍數(shù)：40×，

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本文編號：3406157