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基于心肌缺血預(yù)適應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的淡竹葉藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-09-15 11:39
  中藥淡竹葉Lophatheri Herba為禾本科植物淡竹葉Lophatherum gracile Brongn的干燥莖葉。本論文主要圍繞淡竹葉中保護(hù)心肌缺血的物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制的揭示,開展了如下的研究工作:1.淡竹葉中黃酮化合物的組成分別為碳苷黃酮和氧苷黃酮,主要包括葒草苷、異葒草苷、日當(dāng)藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、阿福豆苷、木犀草苷7個(gè)黃酮化合物。本實(shí)驗(yàn)建立了HPLC-MS/MS-MRM方法,測(cè)定了淡竹葉中7種黃酮化合物含量,得到2組黃酮化合物組分,分別為:異葒草苷:葒草苷:日當(dāng)藥黃素:牡荊苷:異牡荊苷:阿福豆苷:木犀草苷=20:15:55:5:5:2:5,異葒草苷:葒草苷:日當(dāng)藥黃素:牡荊苷:異牡荊苷:阿福豆苷:木犀草苷=30:25:30:10:5:2:5。2.通過整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn),建立大鼠缺血再灌注損傷模型,實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),淡竹葉總黃酮通過減少心肌組織中NF-κB和TNF-α的表達(dá),下調(diào)caspase-3蛋白表達(dá),使心肌缺血造成的損傷減輕。因此,淡竹葉總黃酮保護(hù)缺血心肌的作用機(jī)制可能與清除氧自由基、抑制氧自由基產(chǎn)生、抑制脂質(zhì)過氧化的作用、增加NO水平,抑制]NF-κB和TNF-a的活... 

【文章來源】:南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:130 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. 中藥淡竹葉藥材的質(zhì)量研究
        1.1 中藥淡竹葉的本草考證
        1.2 中藥淡竹葉與常見混偽品的鑒別
        1.3 中藥淡竹葉化學(xué)成分的現(xiàn)代研究
        1.4 中藥淡竹葉藥材品質(zhì)形成的環(huán)境影響因素
    2. 心血管疾病、心肌缺血損傷與心肌缺血預(yù)適應(yīng)
        2.1 心血管疾病的概述
        2.2 中醫(yī)藥對(duì)心肌缺血損傷的研究現(xiàn)狀
        2.3 碳苷黃酮保護(hù)心肌缺血損傷作用機(jī)制的研究
        2.4 心肌缺血預(yù)適應(yīng)的研究進(jìn)展
    3. 中藥淡竹葉治療心肌缺血再灌注損傷的作用研究
        3.1 中藥淡竹葉治療心肌缺血損傷的中醫(yī)理論依據(jù)
        3.2 中藥淡竹葉治療心肌缺血損傷的藥理作用
    4. 結(jié)語
    參考文獻(xiàn)
第二章 淡竹葉中黃酮化合物組分比例研究
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 對(duì)照品溶液的制備
        2.2 供試品溶液的制備
        2.3 色譜及質(zhì)譜條件
        2.4 方法學(xué)考察
        2.5 供試品溶液中黃酮化合物的定性與定量分析
    3. 結(jié)果與討論
        3.1 方法學(xué)考察
        3.2 淡竹葉樣品中7種黃酮化合物的含量測(cè)定
        3.3 淡竹葉樣品中黃酮化合物的組成及含量配比研究
    4. 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三章 淡竹葉黃酮對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 動(dòng)物
        1.2 藥物與試劑
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 淡竹葉總黃酮提取物的制備及含量測(cè)定
        2.2 分組及給藥
        2.3 大鼠心肌缺血再灌注損傷模型的制備
        2.4 大鼠組織標(biāo)本采集
        2.5 免疫組織化學(xué)檢測(cè)
    3. 結(jié)果與討論
        3.1 淡竹葉總黃酮提取物的含量測(cè)定
        3.2 缺血再灌注對(duì)大鼠心肌組織的影響
        3.3 淡竹葉總黃酮對(duì)心肌缺血再灌注大鼠心肌組織中蛋白表達(dá)的影響
    4. 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第四章 淡竹葉中黃酮化合物保護(hù)缺血心肌的作用機(jī)制研究
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 原代大鼠心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 分組與給藥
        2.3 心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型的制備
        2.4 心肌細(xì)胞存活率的測(cè)定
        2.5 心肌細(xì)胞凋亡的測(cè)定
        2.6 心肌細(xì)胞游離鈣離子濃度檢測(cè)
        2.7 Western Blotting檢測(cè)蛋白表達(dá)
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 MTT心肌細(xì)胞存活率
        3.2 Annexin V FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        3.3 心肌細(xì)胞游離鈣離子濃度檢測(cè)
        3.4 Western blotting檢測(cè)蛋白表達(dá)
    4. 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第五章 淡竹葉抗氧化作用的物質(zhì)基礎(chǔ)研究
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 淡竹葉總黃酮提取工藝的優(yōu)化
        2.2 總黃酮含量測(cè)定
        2.3 抗氧化活性測(cè)定
        2.4 BBD響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        2.6 柱前DPPH反應(yīng)與HPLC-PAD聯(lián)用
    3. 結(jié)果與討論
        3.1 自變量的最優(yōu)化試驗(yàn)
        3.2 響應(yīng)面模型的建立及分析
        3.3 預(yù)測(cè)模型的驗(yàn)證試驗(yàn)
        3.4 柱前DPPH反應(yīng)抗氧化活性的HPLC-PAD聯(lián)用技術(shù)
    4. 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第六章 淡竹葉中黃酮化合物體內(nèi)傳輸過程研究
    1. 儀器與試劑
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 熒光分光光度法測(cè)定黃酮化合物對(duì)BSA熒光光譜的影響
        2.2 紫外-可見光譜法測(cè)定黃酮化合物對(duì)BSA紫外光譜的影響
        2.3 淡竹葉中黃酮化合物的物理常數(shù)計(jì)算
        2.4 淡竹葉中黃酮化合物的優(yōu)勢(shì)構(gòu)象計(jì)算
        2.5 分子模擬對(duì)接試驗(yàn)
    3. 結(jié)果與討論
        3.1 淡竹葉中黃酮類化合物對(duì)BSA熒光光譜的影響
        3.2 淡竹葉中黃酮類化合物導(dǎo)致的BSA熒光猝滅類型
        3.3 淡竹葉中黃酮化合物與BSA的結(jié)合模式 (作用力類型)
        3.4 淡竹葉中黃酮類化合物對(duì)BSA構(gòu)象的影響
        3.5 淡竹葉中黃酮化合物的優(yōu)勢(shì)構(gòu)象計(jì)算
        3.6 分子模擬對(duì)接
    4. 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第七章 淡竹葉中黃酮化合物的大鼠體內(nèi)分布研究
    1. 淡竹葉中黃酮化合物的大鼠體內(nèi)分布研究
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 結(jié)果與討論
    2. ~(131)I標(biāo)記異葒草苷的標(biāo)記合成及其體內(nèi)外攝取試驗(yàn)
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3 結(jié)果與討論
    3. 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
結(jié)語
攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
作者簡(jiǎn)介
附表
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]碳苷黃酮保護(hù)心肌缺血損傷作用的研究進(jìn)展[J]. 邵瑩,吳啟南,樂巍,王紅,蔣征.  中草藥. 2015(01)
[2]COX-2在心肌缺血預(yù)適應(yīng)中的作用及其機(jī)制探討[J]. 周秀傳,陳海龍,陳茜,馮偉鏡,曹孟,朱曉琴.  臨床醫(yī)學(xué)工程. 2014(11)
[3]重慶市永川區(qū)淡竹葉資源群落特征研究[J]. 銀福軍,舒抒,周華蓉,瞿顯友,潘瑞,周益權(quán),孫偉.  中國(guó)中藥雜志. 2014(22)
[4]清熱瀉火的淡竹葉[J]. 崔國(guó)靜,吳政慧.  首都醫(yī)藥. 2014(17)
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[7]枳殼總黃酮提取物中柚皮苷和新橙皮苷在大鼠體內(nèi)的組織分布[J]. 陳海芳,張武崗,袁金斌,魏瑩,駱利平,楊武亮.  中國(guó)新藥雜志. 2014(01)
[8]超高效液相色譜-四極桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜分析黃酮類化合物及小毛茛莖葉的成分[J]. 池玉梅,李瑤,張瑜,王琴霞,崔小兵.  色譜. 2013(09)
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[10]超聲萃取-響應(yīng)面法優(yōu)化淡竹葉多糖提取方法研究[J]. 張海容,白娟,魏增云,劉勇麟,陳金娥,王迎進(jìn).  化學(xué)研究與應(yīng)用. 2013(03)

博士論文
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[2]牡荊素對(duì)心肌缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制[D]. 董六一.安徽醫(yī)科大學(xué) 2007
[3]竹葉提取物及葒草苷抗心肌缺血作用及其機(jī)制探討[D]. 付曉春.沈陽藥科大學(xué) 2005
[4]玉米須化學(xué)成分及其抗氧化作用研究[D]. 王英平.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004

碩士論文
[1]葒草素-2"-O-β-D-半乳糖苷抑制小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)及其機(jī)制研究[D]. 周翔.蘇州大學(xué) 2013
[2]石南藤的化學(xué)成分研究[D]. 趙國(guó)偉.山東大學(xué) 2012
[3]霞草花化學(xué)成分的研究[D]. 武海艷.濟(jì)南大學(xué) 2012
[4]淡竹葉品質(zhì)評(píng)價(jià)及心血管藥理作用研究[D]. 邵瑩.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2012
[5]淡竹葉和水竹葉化學(xué)成分研究[D]. 張慧艷.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2010
[6]酸棗仁化學(xué)成分及其配伍制劑天王補(bǔ)心丹質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[D]. 王慧.沈陽藥科大學(xué) 2009



本文編號(hào):3396012

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