乳腺癌已成為威脅全球女性身心健康最主要的腫瘤之一,乳腺癌的發(fā)病機(jī)制的研究及其早期診斷、預(yù)防以及治療乳腺癌是目前迫切需要解決的問題。越來(lái)越多的證據(jù)表明microRNA表達(dá)的失調(diào)和乳腺癌的發(fā)生發(fā)展以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān),microRNA可促進(jìn)或者抑制腫瘤的發(fā)生。已有研究表明,miR-154參與包括小細(xì)胞肺癌、直腸癌、甲狀腺癌等在內(nèi)的多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展,但是miR-154在乳腺癌中的表達(dá)變化以及功能還沒有相關(guān)報(bào)道,本研究運(yùn)用分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等技術(shù)手段,旨在探討miR-154在乳腺癌的表達(dá)模式及其作用機(jī)制,為臨床揭示乳腺癌的發(fā)病機(jī)制以及治療和預(yù)防乳腺癌提供理論依據(jù)。研究目的:研究探討miR-154在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制,為臨床乳腺癌的預(yù)防與治療提供理論依據(jù)。研究方法:本文收集36例臨床確診的乳腺癌患者的癌組織、癌旁組織和一系列乳腺癌細(xì)胞系,通過定量RT-PCR技術(shù)研究乳腺癌細(xì)胞中miR-154的表達(dá)水平。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn):我們通過CCK8實(shí)驗(yàn)法、流式細(xì)胞法、細(xì)胞損傷實(shí)驗(yàn)法和轉(zhuǎn)移侵襲法研究乳腺癌細(xì)胞的增殖、克隆、轉(zhuǎn)移和侵襲情況。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):采用裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-154抑制小鼠體內(nèi)乳腺癌生長(zhǎng)... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

乳腺癌組織和乳腺癌細(xì)胞系中miR-154的表達(dá)變化

43圖3.2在MCF-7細(xì)胞中過表達(dá)miR-154，可以明顯逆轉(zhuǎn)miR-154低表達(dá)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，**P<0.01。3.2.2miR-154對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響接下來(lái)我們觀察，過表達(dá)miR-154后對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7的影響，我們首先觀察對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響，通過CCK-8實(shí)驗(yàn)，測(cè)量各孔吸光度值（OD450），測(cè)量24、48、72小時(shí)三個(gè)點(diǎn)，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，我們實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，與轉(zhuǎn)入對(duì)照microRNA序列相比，過表達(dá)miR-154后48小時(shí)開始抑制細(xì)胞的增殖能力，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，轉(zhuǎn)染72小時(shí)后抑制增殖能力更加明顯，P<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見圖3.3。

44圖3.3與轉(zhuǎn)入對(duì)照microRNA序列相比，過表達(dá)miR-154可以明顯抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖能力，**P<0.01，*P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.2.3miR-154對(duì)乳腺癌細(xì)胞克隆能力的影響接下來(lái)，我們細(xì)胞克隆能力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)過表達(dá)miR-154后對(duì)乳腺癌細(xì)胞克隆能力的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，與轉(zhuǎn)入對(duì)照microRNA序列相比，過表達(dá)miR-154后可以明顯抑制細(xì)胞的克隆能力，P<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，抑制癌細(xì)胞的克隆能力即提示抑制脫落癌細(xì)胞的生存能力，見圖3.4。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Current medical treatment of estrogen receptor-positive breast cancer[J]. Franco Lumachi,Davide A Santeufemia,Stefano MM Basso.  World Journal of Biological Chemistry. 2015(03)
[2]Roles of micro RNA-140 in stem cell-associated early stage breast cancer[J]. Benjamin Wolfson,Gabriel Eades,Qun Zhou.  World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[3]Clinical significance of serum miR-21 in breast cancer compared with CA153 and CEA[J]. Jianjian Gao,Qingyun Zhang,Jianjun Xu,Lijuan Guo,Xuefeng Li.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(06)



本文編號(hào)：3380215