目的:骨硬化蛋白（SOST）是一種主要由骨細(xì)胞分泌的SOST基因編碼的糖蛋白。它由骨細(xì)胞產(chǎn)生,是骨形成的重要調(diào)節(jié)因子,對骨形成起抑制作用,SOST基因的丟失可導(dǎo)致Van Buchem病。骨硬化蛋白通過調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號通路發(fā)揮作用,通過抑制硬化蛋白的形成可能成為治療骨質(zhì)疏松癥（OP）的一種新的治療模式。DNA甲基化有助于人骨細(xì)胞中SOST基因表達(dá)的調(diào)控,但其機(jī)制尚不清楚。方法:本文對12例絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松性髖部骨折患者和8例絕經(jīng)后非骨質(zhì)疏松性髖部骨折患者進(jìn)行比較,探討SOST甲基化的機(jī)制及其對骨質(zhì)疏松癥的影響。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在SOST基因中有兩個(gè)富含CpG的區(qū)域:兩個(gè)CpG島位于SOST轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游的2kb區(qū)域中。CpG島1位于-1560～-1287,共4個(gè)CpG位點(diǎn),CpG島2位于-441～-181,共10個(gè)CpG位點(diǎn)。用BSP對OP患者和非OP患者的骨組織進(jìn)行分析。結(jié)果:CpG島1在OP患者中甲基化為（77.5%）,明顯高于非OP的患者（62.5%）。在CpG島2中,OP患者甲基化為（88.2%）,也顯著高于非OP的患者（60.1%）。OP患者血清和骨SOST表達(dá)降低... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１檢測兩組患者血清和骨ＳＯＳＴ表達(dá)（Ａ）?ＥＬＩＳＡ檢測血清ＳＯＳＴ濃度

ＳＯＳＴ甲基化損害轉(zhuǎn)錄因子ＳＰ７、ＲＵＮＸ２和ＥＲ的轉(zhuǎn)錄激活?第一部分??Ｆｉｇｕｒｅ?２??－１５６０?－１２８７?－４４１?－１８１?ＪＳ＾?ＣｐＧ?ｓｉｔｅ?Ｉ??■?Ｍ＿—?口??Ｍｅｔｈｙｌａｔｅ?ｐｒｉｍｅｒ??ＳａＴｒｒｉＭｈｆ?Ｓｒｆｎｔａｌｈｅ??０?ｎ?ｍ?ｎ?ｔｏｏ?？?？?？?ｎ?ｗｏ??｜?１Ｕ］?，ｊ；４?１ＪＵ?ｉｎ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?｜?－４ｉｒ－？ＭＵ－ＷＵ０－２？ＩＷ＾Ｕ７－？１ｌ?Ｉ—Ｊ?１?１?１??ｉ幽＇」纖？．?＿??圖２?ＢＳＰ實(shí)驗(yàn)研宄兩組患者的甲基化水平??（Ａ）為了檢測ｓｏｓｒ甲基化水平，本實(shí)驗(yàn)選擇了位于ｓｏｓｒ啟動(dòng)子區(qū)內(nèi)的兩個(gè)ＣｐＧ??島，對１２例骨質(zhì)疏松（?ＯＰ）患者和８例非骨質(zhì)疏松（非ＯＰ）患者的基因組進(jìn)行ＤＮＡ??提取和測序來檢測甲基化水平。（Ｂ）￣Ｍ丨丨：骨質(zhì)疏松患者相比，骨質(zhì)疏松組患者ｉｓｌａｎｄｌ??甲基化的水平明顯增高。（Ｃ）與非骨質(zhì)疏松患者相比，骨質(zhì)疏松組患者ｉＳｌａｎｄ２甲基??化的水平明顯增尚。？：?Ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ：〇：Ｎｏｎ－ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ。ｔ檢驗(yàn)比較。??討論??及觀遺傳學(xué)是指／上苺因表達(dá)屮，影響基因表達(dá)和蛋ｄ質(zhì)合成的多種分子變化。這??種變化在不改變ＤＮＡ序列的情況卜在細(xì)胞分裂過程或隔代遺傳屮保持穩(wěn)定。這意??味若即使環(huán)境因素會導(dǎo)致生物的棊因農(nóng)達(dá)出不同，但是苺因本兌小會發(fā)生改變１｜９１，主??要包括ＤＮＡ甲基化、組蛋白修飾和ｍｉＲＮＡ調(diào)節(jié)等。在真核細(xì)胞中，ＤＮＡ甲基化主??耍發(fā)生Ｐ胞嘧啶的第５位碳原子�；蚪M中有富含ＣｐＧ的區(qū)域稱為ＣｐＧ島，它們多??位ｊ？基因啟動(dòng)了？（ｐｒｏｍｏｔｏｒ）和外顯子（Ｅｘｏｎ）?

Ｉ?Ｃ?１－Ｃｏｎ？，??Ｍ？ｔｈｙｌａｔ？ｄ?Ｍ？ｔｈｙｌａｔｔｄ?４?５?＇?Ｍｔｔｈｙｌａｔｔｄ?？＂??Ｉ＊?ｐ＜０００１?ｆｘＯ．００１?＾?ｐ＜０００１?ｐ＜０００１?＾?（Ｘ００５?ｐ＜０?０５??！，〇．?￣！７Ｓ?Ｈ?？?Ｈ??Ｓ?Ｉ?１?ｌ?：３０＜?Ｉ??Ｉ：Ｌ?ｔ＇?Ｉ：Ｌ＿Ｌ?（：Ｌｉ＿Ｌ??ｓｏｓｔａｍｃ?？?？?ｓｏｓ?ｎｕｃ?？?？?５〇ｓｒｉｕｃ?？?？??ＳＰ７?？?ＲＵＮＸ２?？?ＥＲｎ?？??圖３?ｓａｓｒ－Ｌｕｃ和休內(nèi)甲基化的ｓｏｓｒ－Ｌｕｃ栽休共轉(zhuǎn)染２９３Ｔ細(xì)胞株，然后進(jìn)行熒光??素酶分析。在細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中檢測潛在的轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄激活ｓｏｓｒ表達(dá)。??（ａ）?ｓａｓｒ－ｉｕｃ或甲基化ｓｏｓｒ－ｉｕｃ與轉(zhuǎn)錄因子ＳＰ７的共轉(zhuǎn)染。ＳＰ７能增加ｓａｓｒ－ｉｕｃ??的表達(dá)。然而，當(dāng)ＳＯＳＴＭｕｃ甲基化時(shí)，ＳＰ７不能激活其表達(dá)??（Ｂ）?ｓａｓｒ－ｌｕｃ或甲基化ｓｏｓｒ－ｌｕｃ與轉(zhuǎn)錄因子ＲＵＮＸ２的共轉(zhuǎn)染。ＲＵＮＸ２能增加??ｓａｓｒ－ｉｕｃ的表達(dá)。然而，當(dāng)ｓａｓｒ－ｉｕｃ甲基化時(shí)，ｒｕｎｘ２不能激活其表達(dá)??（ｃ）?ｓａｓｒ－ｉｕｃ或甲基化ｓａｓｒ－ｉｕｃ與轉(zhuǎn)錄因子ＥＲａ的共轉(zhuǎn)染。ＥＲａ能增加ｓａｓｒ－ｉｕｃ??的表達(dá)。然而，當(dāng)■ＳＣＷｒ－ｌｕｃ甲基化時(shí)，ＥＲａ不能激活其表達(dá)。ｔ檢驗(yàn)比較。??２７??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松婦女血清骨硬化蛋白與雌二醇的相關(guān)性分析[J]. 趙薇,王志軍,丁娟,呂金捍.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(23)



本文編號：3357919