目的:1)通過分析晚期非小細(xì)胞肺癌患者的EGFR突變類型,探討EGFR外顯子19和21基因突變與患者臨床病理特征的關(guān)系,探索非小細(xì)胞肺癌晚期患者口服EGFR-TKIs的療效是否與EGFR突變類型有關(guān),從而指導(dǎo)臨床非小細(xì)胞肺癌患者個(gè)體化治療;2)通過高通量測序方法對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者的13種與靶向治療相關(guān)的驅(qū)動(dòng)基因的突變情況進(jìn)行測序分析,從而分析不同的變異類型與臨床病理特征以及預(yù)后的關(guān)系,為臨床精準(zhǔn)治療提供理論依據(jù);3)通過研究小分子蛋白酶抑制劑Oprozomib（OPZ）對(duì)肺癌細(xì)胞發(fā)生發(fā)展的作用,探討第二代蛋白酶體抑制劑Oprozomib對(duì)肺癌的抗腫瘤效果以及抗腫瘤作用的初步分子機(jī)制。方法:1)收集新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院組織病理學(xué)確證為非小細(xì)胞肺癌患者140例,分析患者的臨床資料和EGFR突變類型。利用卡方檢驗(yàn)和Fisher檢驗(yàn)分析患者的臨床資料與EGFR突變類型的相關(guān)性,除此之外,采用Kaplan-Meier生存分析比較EGFR19號(hào)外顯子缺失突變和EGFR21號(hào)外顯子突變的兩類非小細(xì)胞肺癌患者的中位無進(jìn)展生存期（mPFS）和中位總生存期（mOS）;2)收集新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

外顯子19缺失突變與外顯子21點(diǎn)突變患者EGFR-TKI治療的PFS生存曲線

第一部分·討論23圖1-2IHC方法檢測非小細(xì)胞肺癌中ALK蛋白表達(dá)A：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）。Figure1-2DetectionofALKproteinexpressioninnon-smallcelllungcancerbyIHCA：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）.3討論肺癌是世界上發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤之一[89]，雖然EGFR酪氨酸激酶抑制劑（TKIs）現(xiàn)在是專屬的用于患有致敏EGFR突變的NSCLC患者，這些藥物最初是針對(duì)未經(jīng)選擇的患者群體開發(fā)的。根據(jù)觀察發(fā)現(xiàn)，NSCLCs占很大比例表達(dá)EGFR。2004年，厄洛替尼成為FDA批準(zhǔn)的第一個(gè)分子靶向治療用于治療晚期NSCLC在癌癥先前化療進(jìn)展的患者中。值得注意的是，此批準(zhǔn)是基于2個(gè)月的PFS與安慰劑相比的優(yōu)勢，它的使用并沒有特定的必需的生物標(biāo)志物。在早期研究中探討了EGFRTKI未選擇的NSCLC患者的整體活動(dòng)，這些藥物在很大程度上令人失望。亞組分析通常有一小部分患者年輕，東亞女性，吸煙史很少或沒有吸煙史的患者對(duì)TKI存在“戲劇性的反應(yīng)”（Fujiwara等，2003）。腫瘤分析來自應(yīng)答者的標(biāo)本導(dǎo)致發(fā)現(xiàn)了一種關(guān)聯(lián)，存在激活EGFR激酶結(jié)構(gòu)域的突變和反應(yīng)。在過去的十幾年里，我們認(rèn)識(shí)到了解疾病的必要性分子水平以識(shí)別特定的分子靶標(biāo)可以鑒定或設(shè)計(jì)藥物以抑制藥物。隨著分子生物學(xué)在腫瘤的發(fā)生發(fā)展的機(jī)制研究中的應(yīng)用，尤其是分子靶向藥物概念的提出

第二部分·研究內(nèi)容與方法35通過末端修復(fù)將DNA片段兩端變?yōu)槠侥┒耍贒NA片段的5’端加磷酸基團(tuán)，在DNA的3’端加堿基A；3）通過TA連接將接頭序列加到DNA片段的兩端并純化回收連接產(chǎn)物；4）隨后通過一輪擴(kuò)增并純化獲得可測序基因文庫。具體建庫流程如下圖所示：圖2-1建庫流程圖Figure2-1Constructionflowchart1.2.4.3簇生成當(dāng)DNA文庫上樣到流動(dòng)槽上，F(xiàn)lowcell上隨機(jī)分布了兩種不同的寡核苷酸序列，待測DNA片段通過接頭和槽內(nèi)寡核苷酸配對(duì)連接。隨后每個(gè)片段通過橋式法擴(kuò)增成簇克攏接下來合成的雙鏈被解鏈，再分別與Flowcell上的接頭雜交互補(bǔ)，通過延伸解鏈等步驟重復(fù)35個(gè)橋式PCR，利用變性劑NAOH將雙鏈解鏈，并利用甲酰胺基嘧啶糖苷酶和對(duì)8-氧鳥嘌呤糖苷的選擇性切斷作用，將測序引物雜交至目標(biāo)部位一端的通

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2014年中國分地區(qū)惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,孫可欣,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),赫捷.  中國腫瘤. 2018(01)



本文編號(hào)：3346321