原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌是中國乃至世界上最常見的高致死率的惡性腫瘤之一。目前肝癌患者主要通過手術(shù)切除、藥物化療等方法綜合治療以延長生存期,但肝癌的高轉(zhuǎn)移率和術(shù)后高復(fù)發(fā)率以及對化療藥物的不敏感性始終限制肝癌總體生存率的提高。通過特異性的基因靶點(diǎn)對肝癌的精準(zhǔn)診斷和治療是改善肝癌診治的有效手段。Holliday 交叉識別蛋白（Holliday Junction Recognition Protein,簡稱 HJURP）作為一種癌癥相關(guān)基因在許多腫瘤中被證實(shí)。HJURP被報道在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要促進(jìn)作用,包括肝癌。最近研究表明HJURP能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖,對肝癌的發(fā)生發(fā)展有重要作用。但是HJURP對肝癌細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-to-Mesenchymal Transition,簡稱EMT）及肝細(xì)胞肝癌遷移侵襲和轉(zhuǎn)移方面的作用仍不明確。本課題就針對以上問題進(jìn)行了探究。本研究第一部分中,我們主要研究HJURP對肝癌細(xì)胞遷移侵襲的作用及其機(jī)制,通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及動物實(shí)驗(yàn)等證明HJURP能通過鞘氨醇激酶1（Sphingosine Kinase 1,簡稱SPHK1）來影響EMT過程... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２??圖２?ＨＪＵＲＰ敲低對肝癌細(xì)胞遷移侵襲有抑制作用

實(shí)驗(yàn)結(jié)果??中，ＨＪＵＲＰ過表達(dá)能顯著促進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移（ｐ?＜０．００１）和侵襲（；？?＜０．０１）能??力。同樣，在Ｈｕｈ７細(xì)胞系（圖３?（Ｂ，Ｅ））和ＳＭＭＣ－７７２１?（圖３?（Ｃ，Ｆ））細(xì)胞系中??也發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)果。Ｈｕｈ７細(xì)胞系中，ＨＪＵＲＰ過表達(dá)后，肝癌細(xì)胞遷移（ｐ＜０．０１）??和侵襲Ｃｐ＜０．０１）能力顯著增強(qiáng)。ＳＭＭＣ－７７２１細(xì)胞系中，，ＨＪＵＲＰ過表達(dá)后，肝??癌細(xì)胞遷移（ｐ＜０．００１）和侵襲（戶＜０＿０１）能力顯著增強(qiáng)。以上表明ＨＪＵＲＰ過表??述對肝癌細(xì)胞遷移和侵襲能力有促進(jìn)作用。??ＡＢＣ??ＮＩＣ??０Ｅ?嚴(yán)?、抓?．．二?ｉ??ｄ＿?７?丨＿＿??ｕ?□□—畫??Ｄ?Ｅ?Ｆ??■?ＫＴＣ＿〇Ｅ?■ＮＴＣ＿０Ｅ?＿ＮＴＣ＿０６??姻．－碰??ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?Ｉｎｖａｓｉｏｎ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｌｎｖａ？ｋ＞ｎ??圖３??圖３?ＨＪＵＲＰ過表達(dá)對肝癌細(xì)胞遷移侵襲有促進(jìn)作用。（Ａ）?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ實(shí)驗(yàn)的??顯微鏡下直觀圖（放大倍數(shù)ｌ〇〇ｘ），ＨＣＣ－ＬＭ３細(xì)胞系中，ＨＪＵＲＰ過表達(dá)組??（ＨＣＣ－ＬＭ３－ＯＥ組）相對于ＨＣＣ－ＬＭ３對照組（ＨＣＣ－ＬＭ３－ＮＴＣ組）細(xì)胞遷移和??侵襲能力顯著增強(qiáng)。（Ｂ）?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ實(shí)驗(yàn)的顯微鏡下直觀圖（放大倍數(shù)１０〇ｘ），?Ｈｕｈ７??細(xì)胞系中，ＨＪＵＲＰ過表達(dá)組（Ｈｕｈ７－ＯＥ組）相對于Ｈｕｈ７對照組（Ｈｕｈ７－ＮＴＣ組）??細(xì)胞遷移和侵襲能力顯著增強(qiáng)。（Ｃ）?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ實(shí)驗(yàn)的顯微鏡下直觀圖（放大倍數(shù)??１０〇ｘ）

程來調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞的遷移侵襲。為驗(yàn)證這一猜想，我們通過ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ實(shí)驗(yàn)檢測??ＥＭＴ相關(guān)分子標(biāo)志物（包括Ｅ－鈣粘蛋白，Ｎ－鈣粘蛋白，波形蛋白）的表達(dá)，結(jié)果??如圖５。??相對于ＨＣＣ－ＬＭ３－ＮＴＣ細(xì)胞，在ＨＪＵＲＰ敲低的ＨＣＣ－ＬＭ３－ＫＤ細(xì)胞中，Ｅ－??鈣粘蛋白的表達(dá)顯著上調(diào)，同時Ｎ－鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)顯著下調(diào)。同樣，??Ｅ－鈣粘蛋白，Ｎ－鈣粘蛋白，波形蛋白在ＨＪＵＲＰ敲低的Ｈｕｈ７細(xì)胞系中也有類似的??改變，結(jié)果如圖５?（Ａ）。這些分子標(biāo)志物的改變反映了肝癌細(xì)胞ＥＭＴ過程受到抑??制。說明ＨＪＵＲＰ的敲低能抑制肝癌細(xì)胞的ＥＭＴ過程。相對于ＨＣＣ－ＬＭ３－ＮＴＣ細(xì)??胞，在ＨＪＵＲＰ過表達(dá)的ＨＣＣ－ＬＭ３－０Ｅ細(xì)胞中，Ｅ－鈣粘蛋白的表達(dá)顯著下調(diào)，同??時Ｎ－鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)顯著上調(diào)。同樣，Ｅ－鈣粘蛋白，Ｎ－鈣粘蛋白，波??形蛋白在Ｈｕｈ７，ＳＭＭＣ－７７２１細(xì)胞系中也有類似的改變，結(jié)果如圖５?（Ｂ）。這些??分子標(biāo)志物的改變反映了肝癌細(xì)胞ＥＭＴ過程受到活化促進(jìn)。說明ＨＪＵＲＰ的過表??達(dá)能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的ＥＭＴ過程。根據(jù)以上結(jié)果我們可以推斷：ＨＪＵＲＰ能改變Ｅ－??鈣粘蛋白

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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