白介素-7在正常人及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者單核細胞中作用的研究
發(fā)布時間:2021-07-14 02:57
研究背景:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種常見的自身免疫性疾病。其侵蝕性關(guān)節(jié)炎可導(dǎo)致嚴重關(guān)節(jié)畸形,影響生活質(zhì)量;嚴重關(guān)節(jié)外并發(fā)癥可危及生命。由于RA早期治療效果較佳,因此,早期診斷、早期治療對預(yù)后非常關(guān)鍵。白介素-7(Interleukin-7,IL-7)是一種重要的細胞因子,在淋巴細胞的增殖與分化中發(fā)揮重要作用。IL-7及白介素-7受體(Interleukin-7 receptor,IL-7R)對單核細胞的作用研究較少,可能促進單核細胞分泌促炎因子,增強單核細胞炎癥應(yīng)答,作用的機制仍不明確。一些研究發(fā)現(xiàn)IL-7/IL7R可能對RA患者單核細胞分泌腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNFα)也有一定調(diào)控作用,但該結(jié)論仍有爭議。研究目的:通過研究正常人外周血單核細胞中IL-7/IL7R及其他炎癥相關(guān)細胞因子的表達情況,明確IL-7/IL7R在單核細胞炎癥應(yīng)答中的作用。以此為基礎(chǔ),研究RA患者單核細胞IL-7/IL7R及其他相關(guān)細胞因子的表達量情況,協(xié)助RA診治。研究方法:本課題通過收集正常人外周血標(biāo)本,通過流式細胞學(xué)技術(shù)及...
【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2?正常人單核細胞LPS刺激前后CDl27表達情況峰圖??
1.正常人單核細胞中IL-7/IL-7R表達情況??1.1正常人單核細胞經(jīng)LPS刺激前后IL7Ra?(CD127)表達情況??圖1?圖2為流式細胞學(xué)結(jié)果。正常人PBMCs在LPS刺激前,其分布情況如??圖1A,?CD14+為單核細胞分布區(qū)域,可以看出單核細胞均低表達CD127。經(jīng)LPS??刺激6小時后細胞分布情況如圖1B,可以看到部分單核細胞出現(xiàn)CD127表達量增??高。經(jīng)LPS刺激18小時候結(jié)果如圖1C,可以看到細胞分布逐漸趨于LPS刺激??前。圖2顯示了峰圖疊加的結(jié)果,可以看到經(jīng)LPS刺激后,隨著培養(yǎng)時間的延??長,CD127表達量升高的單核細胞數(shù)逐漸增多,直到6小時之后,表達量又逐漸??降低,1天后趨于原來水平。圖3為qRT-PCR結(jié)果,以GAPDH作為內(nèi)參標(biāo)定目??標(biāo)基因,可以看出目標(biāo)基因表達情況同流式細胞學(xué)結(jié)果相同,LPS刺激6小時??后
單核細胞具有明顯異質(zhì)性,根據(jù)既往研究結(jié)果,目前認為單核細胞主要可分??為經(jīng)典型(CD144CD16-)、中間型(CD14#CD16+)和非經(jīng)典型(CDM+CDiewp個亞??群[16]。圖4A顯示了單核細胞分布情況,其中經(jīng)典型細胞所占比例最多,非經(jīng)典型??最少,與既往研究結(jié)果相符[17]。通過圖4A圈定細胞,測定CD127表達平均熒光??強度(mean?fluorescence?intensity,MFI),可以看出經(jīng)LPS刺激后,3個亞群的??細胞MFI均有上升,略有差異,未見統(tǒng)計學(xué)意義。qRT-PCR結(jié)果更好的展示了這??種差異,非經(jīng)典型單核細胞表達CD127水平最高(圖4C,以GAPDH作為內(nèi)??參)。??A???6????S?J?S?'^1._Con.ro,??]CD14-CD16++?/?\??3?J?10.9?L-嗓_I?CD14.CD16M??〇?j?CD14^CD16*??-七二?I..”廣、??10°?101?io2?lo3?104?10s?/?\???>CDU?—.厶,??^?io°?io2?io4?io5??^?CD127??■?Control?CD127??c?2001?a?lps?i500??J:;LLLi?i:LUt??,,,??/?^?^?
本文編號:3283267
【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2?正常人單核細胞LPS刺激前后CDl27表達情況峰圖??
1.正常人單核細胞中IL-7/IL-7R表達情況??1.1正常人單核細胞經(jīng)LPS刺激前后IL7Ra?(CD127)表達情況??圖1?圖2為流式細胞學(xué)結(jié)果。正常人PBMCs在LPS刺激前,其分布情況如??圖1A,?CD14+為單核細胞分布區(qū)域,可以看出單核細胞均低表達CD127。經(jīng)LPS??刺激6小時后細胞分布情況如圖1B,可以看到部分單核細胞出現(xiàn)CD127表達量增??高。經(jīng)LPS刺激18小時候結(jié)果如圖1C,可以看到細胞分布逐漸趨于LPS刺激??前。圖2顯示了峰圖疊加的結(jié)果,可以看到經(jīng)LPS刺激后,隨著培養(yǎng)時間的延??長,CD127表達量升高的單核細胞數(shù)逐漸增多,直到6小時之后,表達量又逐漸??降低,1天后趨于原來水平。圖3為qRT-PCR結(jié)果,以GAPDH作為內(nèi)參標(biāo)定目??標(biāo)基因,可以看出目標(biāo)基因表達情況同流式細胞學(xué)結(jié)果相同,LPS刺激6小時??后
單核細胞具有明顯異質(zhì)性,根據(jù)既往研究結(jié)果,目前認為單核細胞主要可分??為經(jīng)典型(CD144CD16-)、中間型(CD14#CD16+)和非經(jīng)典型(CDM+CDiewp個亞??群[16]。圖4A顯示了單核細胞分布情況,其中經(jīng)典型細胞所占比例最多,非經(jīng)典型??最少,與既往研究結(jié)果相符[17]。通過圖4A圈定細胞,測定CD127表達平均熒光??強度(mean?fluorescence?intensity,MFI),可以看出經(jīng)LPS刺激后,3個亞群的??細胞MFI均有上升,略有差異,未見統(tǒng)計學(xué)意義。qRT-PCR結(jié)果更好的展示了這??種差異,非經(jīng)典型單核細胞表達CD127水平最高(圖4C,以GAPDH作為內(nèi)??參)。??A???6????S?J?S?'^1._Con.ro,??]CD14-CD16++?/?\??3?J?10.9?L-嗓_I?CD14.CD16M??〇?j?CD14^CD16*??-七二?I..”廣、??10°?101?io2?lo3?104?10s?/?\???>CDU?—.厶,??^?io°?io2?io4?io5??^?CD127??■?Control?CD127??c?2001?a?lps?i500??J:;LLLi?i:LUt??,,,??/?^?^?
本文編號:3283267
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