糖尿病生精功能障礙是男性糖尿病人的常見并發(fā)癥,也是引起男性不育的重要原因。研究表明男性糖尿病患者不育的發(fā)病率約為35.1%,隨著近年糖尿病發(fā)病率升高以及發(fā)病年齡年輕化,糖尿病不育已成為影響男性生育的重要原因,氧化應(yīng)激損傷與其密切相關(guān),但具體機(jī)制不甚明確,并缺乏有效防治方法。“消渴”是中醫(yī)對糖尿病的稱謂,陰虛燥熱是其辨證基礎(chǔ),糖尿病人久病耗氣傷陰,氣虛精虧,氣虛運(yùn)化無力,表現(xiàn)為氣陰兩虛,陰損及陽,所謂“陽化氣、陰成形”,陰虛內(nèi)熱熾盛,陰液不足以濡養(yǎng)精室,發(fā)展為陽萎疲乏,精冷不育。三才連梅顆粒由人參、天冬、生地黃、烏梅、肉桂、黃連六味藥組方而成,其方義遵循養(yǎng)陰清熱為本,調(diào)和陰陽,并能益氣健脾,培土生精。前期實(shí)驗(yàn)證實(shí)三才連梅顆粒具有較好的降血糖及抗氧化作用,臨床觀察發(fā)現(xiàn)三才連梅顆粒能有效提高糖尿病患者性功能及精液質(zhì)量,改善中醫(yī)癥候。本課題擬用三才連梅顆粒治療糖尿病生精功能障礙小鼠,觀察其對糖尿病小鼠生精功能的影響,并通過Nrf2/HO-1氧化應(yīng)激信號通路探討其對生精細(xì)胞線粒體自噬及凋亡的影響。本實(shí)驗(yàn)通過高脂飲食及腹腔注射鏈脲霉素（STZ）建立2型糖尿�。═2DM）小鼠模型。將小鼠分為4組,分... 

【文章來源】：成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
引言
    附 研究技術(shù)路線圖
第一部分 三才連梅顆粒對糖尿病小鼠生精功能的影響
    1.前言
    2.實(shí)驗(yàn)藥品及器材
        2.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        2.2 試驗(yàn)器材
        2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及喂養(yǎng)
        3.2 2型糖尿病小鼠模型的建立
        3.3 實(shí)驗(yàn)分組
        3.4 標(biāo)本的收集
        3.5 睪丸指數(shù)的測定
        3.6 精子參數(shù)的測定
        3.7 ELISA檢測小鼠血清中FSH、LH及 T的含量
        3.8 睪丸組織切片及HE染色
        3.9 糖尿病相關(guān)指標(biāo)的檢測
        3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.結(jié)果
        4.1 三才連梅顆粒對糖尿病小鼠生精功能的影響
        4.2 三才連梅顆粒對2型糖尿病小鼠代謝相關(guān)指標(biāo)的影響
    5.討論
第二部分 三才連梅顆粒通過Nrf2/HO-1 信號通路對DM小鼠睪丸氧化應(yīng)激損傷的影響
    1.前言
    2.實(shí)驗(yàn)器材及試劑
        2.1 實(shí)驗(yàn)器材
        2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本
        3.2 qPCR檢測Nrf2及HO-1 mRNA的表達(dá)
        3.3 western blot檢測睪丸組織中Nrf2及HO-1 蛋白的表達(dá)
        3.4 Elisa檢測睪丸組織中MDA,SOD以及8-OHdG的含量
        3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.結(jié)果
        4.1 三才連梅顆粒對Nrf2/HO-1 信號通路的影響
        4.2 三才連梅顆粒對糖尿病小鼠氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響
    5.討論
第三部分 三才連梅顆粒對糖尿病小鼠生精細(xì)胞線粒體自噬及凋亡的影響
    1.前言
    2.實(shí)驗(yàn)器材及試劑
        2.1 實(shí)驗(yàn)器材
        2.2 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑
    3.實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)
        3.2 蛋白免疫印跡(Western Blot)
        3.3 電鏡檢測
        3.4 TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)
        3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    4.結(jié)果
        4.1 三才連梅顆粒對自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC-3Ⅱ/Ⅰ、P62 表達(dá)水平的影響
        4.2 三才連梅顆粒對生殖細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及自噬小體的影響
        4.3 三才連梅顆粒對凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax表達(dá)水平的影響
        4.4 三才連梅顆粒對睪丸生精細(xì)胞凋亡的影響
    5.討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
附件1:文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
附件2:在讀期間公開發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果
附件3:在讀期間立項(xiàng)課題


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]中醫(yī)治療糖尿病用藥規(guī)律及效果的分析研究[J]. 劉榜勞.  中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志. 2019(01)
[3]肥胖型少弱精子癥的發(fā)病機(jī)制及中醫(yī)調(diào)體防治[J]. 董陽,孟翔鶴,王鑫,鄭燕飛,王濟(jì),趙蔚波,王琦.  中醫(yī)學(xué)報(bào). 2018(12)
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[6]多種細(xì)胞自噬調(diào)節(jié)劑對自噬標(biāo)記物L(fēng)C3Ⅱ及p62表達(dá)的影響[J]. 魏硯明,任晉宏,欒智華,王永輝.  中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(03)
[7]氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA與生育力和精子參數(shù)相關(guān)性的Meta分析[J]. 夏雨果,陳秋,湯志梅,陳慧臻,高坪,曾文彤,趙娟,陳嵐.  海南醫(yī)學(xué). 2018(09)
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[9]PINK1/Parkin通路在線粒體自噬氧化損傷中的作用[J]. 梁丹陽,戴漢川.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2018(01)
[10]基于陰陽五行學(xué)說探討自噬對于脂質(zhì)代謝內(nèi)穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)[J]. 王志丹,賈連群,楊關(guān)林.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2017(05)

博士論文
[1]三才連梅顆粒毒性研究與臨床療效評價(jià)[D]. 郭強(qiáng).成都中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[2]蘿卜硫素通過上調(diào)Nrf2的表達(dá)和功能減少糖尿病小鼠睪丸細(xì)胞凋亡的研究[D]. 王永剛.吉林大學(xué) 2015
[3]氧化應(yīng)激和慢性炎癥影響睪丸間質(zhì)細(xì)胞衰老的作用機(jī)制研究[D]. 趙秀軍.河北醫(yī)科大學(xué) 2013
[4]HO-1基因啟動(dòng)子微衛(wèi)星多態(tài)與廣東漢族濕熱證易感性的相關(guān)性研究[D]. 路永坤.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2010

碩士論文
[1]三才粉劑治療初次診斷2型糖尿病機(jī)制探討[D]. 羅宇磊.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2015



本文編號：3283807