發(fā)布時間：2021-07-12 13:17

　　鎘是一種有強毒性的金屬元素,20世紀中期在日本爆發(fā)了由鎘蓄積導致的嚴重疾病——“骨痛病”,從此鎘污染問題引起了全球關注。鎘離子在被吸收進入生物體后,由于和其它金屬離子特別是Zn2+有相似的配位性質,易與蛋白質等生物大分子尤其是鋅酶結合,進而干擾其正常生理功能并產生細胞毒性。在2001年,研究者在惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida）中發(fā)現(xiàn)了一個特殊的Cd2+特異性外排系統(tǒng),其中起調控功能的蛋白質被命名為CadR,外排泵為CadA。體內實驗表明CadR調控的cadR啟動子基本不響應其它金屬離子,而其調控的cadA啟動子對Zn2+和Pb2+等金屬離子的響應遠弱于Cd2+。這種特異的活性目前尚未有人工合成的配合物或是自然界中的其它金屬蛋白可以做到。為了探究CadR這一獨特Cd2+選擇性的分子機理,本文進行了一系列蛋白質晶體學、光譜學和分子生物學實驗,系統(tǒng)的研究了 CadR的結構和性質,并總結闡述了 CadR特異性識別鎘離子的協(xié)同結合機制。CadR單體的分子量為16648Da,含147個氨基酸殘基,同源序列比對表明CadR是一個典型的MerR家族轉錄調控蛋白質,但具有一個獨特的富... 

【文章來源】：南京大學江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２幾種轉錄調控蛋白質ＤＮＡ結合模式

圖１．３￡．?ｃｏ／／ＲＮＡ聚合酶

?南京大學博士學位論文???還必須有額外的蛋白質進行幫助才能發(fā)生轉錄［７１。??（ａ）?（ｂ）?＾??姆Ｖ．?＇?＿＿?［＾ＴＣＥｗｎｐ??圖１．３￡．?ｃｏ／／ＲＮＡ聚合酶。（ａ）全酶的晶體結構。（ｂ）ｃ？７Ｄ亞基的結構域組成與對應功能［８－９］??嗜熱桿菌ＲＮＡ聚合酶具有高穩(wěn)定性，非常有利于進行結晶，并且與大腸桿??菌等細菌ＲＮＡ聚合酶的同源性很高，可以作為模式物進行研宄。目前嗜熱桿菌??ＲＮＡ聚合酶轉錄過程的大部分關鍵中間態(tài)均己得到晶體結構（圖］．４，?１．５）。圖??１．５是細菌轉錄過程的示意圖，四個關鍵構象分別在２００２－２０１２年間被發(fā)表在最??高影響力學術刊物上［１２＿１５］。??⑷?（ｂ）?，??ｏ?ｊ－：，?＾?．??２?＾?ｉ，?＼?／?＜?▲務、．??移??圖１．４嗜熱桿菌ｏＡ結構域的ＤＮＡ復合物，ｏＡ是屬于ｏ？家族的同源蛋白質。（ａ）?〇２與－１０??序列申－鏈ＤＮＡ的復合物晶體結構Ｉ，（ｂ）?與－３５序列雙鏈ＤＮＡ的復合物晶體結構［＂１。??５??

【參考文獻】：
碩士論文
[1]鎘離子調控蛋白質CadR的表達、純化、結構和功能研究[D]. 劉茜醇.南京大學 2012



本文編號：3279982