腫瘤免疫治療是治療惡性腫瘤的有效手段,在腫瘤治療中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。其中,腫瘤納米疫苗利用腫瘤特異性抗原激活抗原提呈細(xì)胞（Antigen presenting cells,APCs）,啟動(dòng)抗原特異性免疫反應(yīng),抑制和殺傷腫瘤細(xì)胞,是腫瘤免疫治療中最具應(yīng)用前景的治療手段之一。受主要組織相容性復(fù)合物I（Major histocompatibility complex I,MHC I）分子抗原呈遞不強(qiáng)的影響,納米疫苗的腫瘤免疫治療療效差。本文致力于設(shè)計(jì)新型糖脂納米疫苗,通過靶向樹突狀細(xì)胞（Dendritic cells,DCs）,以及促進(jìn)抗原的溶酶體逃逸,增強(qiáng)MHC I分子抗原呈遞,提高腫瘤免疫治療療效。通過酰胺反應(yīng)將殼聚糖（Chitosan,Ct）嫁接至硬脂酸（Stearic acid,SA）,得到糖脂嫁接物殼聚糖-硬脂酸（Stearic acid-grafted chitosan,CtSA）。DCs是抗原提呈能力最強(qiáng)的APCs,且高表達(dá)甘露糖受體。將甘露糖（Mannose）嫁接至CtSA,得到甘露糖修飾殼聚糖-硬脂酸（Mannose modified stearic acid-grafted ... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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MCtSA糖脂嫁接物的合成及結(jié)構(gòu)確證

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文第一章甘露糖修飾糖脂嫁接物的合成及理化性質(zhì)評(píng)價(jià)10344nm處有最大紫外吸收的三硝基苯衍生物。選用三硝基苯磺酸，紫外-可見分光光度儀測(cè)定糖脂嫁接物游離氨基比例，計(jì)算糖脂嫁接物的氨基取代度。經(jīng)測(cè)定，CtSA、MCtSA糖脂嫁接物的氨基取代度，分別為7.03±0.84%、14.4±0.49%。1.3.4甘露糖修飾糖脂嫁接物膠束臨界膠束濃度CtSA、MCtSA糖脂嫁接物在水中可自組裝形成膠束。芘是一種常用的疏水性熒光探針，一旦被膠束包封，其熒光光譜會(huì)發(fā)生改變。利用芘的這一特性，以芘為熒光探針測(cè)定CtSA、MCtSA糖脂嫁接物膠束的臨界膠束濃度。測(cè)定結(jié)果如圖1.3所示，趨勢(shì)線交叉點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的濃度即糖脂嫁接物膠束的臨界膠束濃度。經(jīng)計(jì)算，CtSA、MCtSA糖脂嫁接物膠束的臨界膠束濃度，分別為52.0±5.67μg/mL、74.4±3.15μg/mL，表明CtSA、MCtSA糖脂嫁接物膠束具有良好的自組裝能力和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。圖1.3CtSA、MCtSA嫁接物膠束溶液濃度對(duì)數(shù)值（LogC）與I1/I3值關(guān)系圖Figure1.3Thecriticalmicelleconcentration(CMC)measurementofmicelles.1.3.5甘露糖修飾糖脂嫁接物膠束的粒徑、表面電位及表面形態(tài)微粒粒度與表面電位儀分別測(cè)定CtSA、MCtSA糖脂嫁接物膠束的粒徑及表面電位，測(cè)定結(jié)果如表1.1所示。CtSA糖脂嫁接物膠束的粒徑為85.9±0.68nm，表面電位為23.2±0.90mV，甘露糖修飾后，粒徑增加至94.2±1.95nm，可能與Ct

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文第一章甘露糖修飾糖脂嫁接物的合成及理化性質(zhì)評(píng)價(jià)11糖鏈接枝甘露糖支鏈所致。表1.1CtSA、MCtSA的粒徑及表面電位（n=3）Table1.1SizeandzetapotentialofCtSAandMCtSA.(n=3)MicellesDiameter(nm)PDIZetapotential(mV)CtSA85.9±0.680.13±0.0423.2±0.90MCtSA94.2±1.950.22±0.0324.2±1.35PDI:polydispersityindexTEM觀察CtSA、MCtSA糖脂嫁接物膠束的大小及表面形態(tài)。如圖1.4所示，CtSA、MCtSA糖脂嫁接物膠束粒徑分布較為均一，均呈類球形。透射電鏡觀察到的糖脂嫁接物膠束大小比微粒粒度儀測(cè)得的粒徑小，可能是因?yàn)樵谟猛干潆婄R觀察糖脂嫁接物膠束過程中，糖脂嫁接物膠束在真空條件下發(fā)生了皺縮。圖1.4糖脂嫁接物膠束的粒徑分布及表面形態(tài)。（A）CtSA糖脂嫁接物膠束的粒徑分布圖及透射電鏡圖，（B）MCtSA糖脂嫁接物膠束的粒徑分布圖及透射電鏡圖，標(biāo)尺：50nmFigure1.4ThesizedistributionandTEMimagesofmicelles.(A)Thesizedistributionandtransmissionelectronmicroscopy(TEM)imageofCtSA.(B)ThesizedistributionandTEMimageofMCtSA.Scalebar:50nm.1.4本章小結(jié)以碳二亞胺為催化劑，殼聚糖分子氨基經(jīng)酰胺化反應(yīng)連接硬脂酸分子羧基，合成糖脂嫁接物CtSA。甘露糖酸性環(huán)境下開環(huán)生成的醛基，經(jīng)席夫堿反應(yīng)連接CtSA


本文編號(hào)：3271399