研究背景PTK7是一種缺乏催化活性的受體蛋白酪氨酸激酶,能與相應(yīng)配體結(jié)合（即二聚化）、并自身磷酸化激活下游一系列級聯(lián)傳遞并調(diào)控細(xì)胞增殖、分化及凋亡。目前研究發(fā)現(xiàn),PTK7在急性髓細(xì)胞性白血病、結(jié)腸癌、非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌以及卵巢癌中高表達(dá),靶向PTK7的抗體治療可以明顯降低腫瘤起始細(xì)胞并持續(xù)促進(jìn)腫瘤改善,因此推斷腫瘤的發(fā)生發(fā)展可能和PTK7過表達(dá)有關(guān)。研究顯示,PTK7過表達(dá)能促進(jìn)食管鱗癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移,同時(shí)PTK7的高表達(dá)抑制了腫瘤的放療敏感性。前期研究中,我們通過免疫化學(xué)染色的方法驗(yàn)證了食管鱗癌組織和癌旁組織中PTK7的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)PTK7在癌組織中高表達(dá)于細(xì)胞膜,而癌旁組織中基本不表達(dá)或者低表達(dá)。但是PTK7在食管鱗癌中的作用機(jī)理尚不十分清楚,因此有必要對PTK7在食管鱗癌中的生物學(xué)作用及其分子機(jī)制進(jìn)行深入探討。本課題擬首先通過免疫組織化學(xué)方法檢測食管鱗癌組織及癌旁正常組織中PTK7的表達(dá),明確PTK7的表達(dá)與食管鱗癌相關(guān)性,隨后通過在食管鱗癌細(xì)胞中過表達(dá)/沉默表達(dá)PTK7基因,深入探討PTK7對食管鱗癌細(xì)胞增殖凋亡和侵襲遷移等的生物學(xué)影響,并通過一系列的實(shí)驗(yàn)研究其調(diào)控細(xì)胞增殖... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

pcDNA3.1質(zhì)粒圖譜

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文35圖1-2免疫組化檢測PTK7在食管鱗癌中的表達(dá)情況。左：癌旁組織；右：食管癌組織Figure1-2ExpressionofPTK7inesophagealsquamouscarcinomadetectedbyimmunohistochemistry.Left:Pericanceroustissue;Right:esophagealcancertissue3.2雙酶切鑒定陽性克隆質(zhì)粒用XhoI酶和XbaI酶切，可見相應(yīng)的基因編碼區(qū)全長序列片段（2408bp）和線性化的pcDNA3.1空載體片段（約5400bp），與預(yù)期結(jié)果一致。圖1-3pcDNA3.1-PTK7雙酶切鑒定圖Figure1-3IdentificationMapofpcDNA3.1-PTK7DoubleEnzymeDigestionM：DNAmarker；1：pcDNA3.1-PTK7byXhoIandXbaI；2：pcDNA3.1-PTK73.3測序鑒定將測序結(jié)果通過BLAST比對與GeneBank中公布的序列一致，證明載體構(gòu)建成功。部分測序圖譜如下:7000bp5000bp3000bpM12

pcDNA3.1-PTK7雙酶切鑒定圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PAR4在食管癌細(xì)胞中的表達(dá)及其機(jī)制[J]. 江萍,李樹德,朱月春,李思熳.  昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(04)



本文編號：3267814