目的:利用腎周脂肪和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）分別建立大鼠急性呼吸綜合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）/急性肺損傷（acute lung injury,ALI）的模型,檢測不同處理組的標(biāo)志性蛋白及炎性指標(biāo)的變化;探討熊脫氧膽酸（ursodeoxycholic acid,UDCA）對兩種ARDS大鼠模型的影響及其發(fā)揮作用的主要機(jī)制。方法:取SPF清潔級健康成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠,體重約220³00g,隨機(jī)進(jìn)行編號分組。（1）從同種異體SD大鼠提取腎周脂肪,通過尾靜脈注射脂肪溶液建立大鼠脂肪栓塞綜合征（fat embolism syndrome,FES）模型,探討脂肪栓塞所致ARDS的各項(xiàng)相關(guān)指標(biāo)的變化,如肺病理組織檢查、髓過氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、肺濕干（wet/dry,W/D）比、肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）炎性因子水平、動脈血氧分壓等;（2）通過尾靜脈給予UDCA處理,檢測不同... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

大鼠肺組織油紅O染色（×100）

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文21肺組織HE染色表明，Control組肺泡結(jié)構(gòu)正常，光鏡下未觀察到肺泡腔內(nèi)紅細(xì)胞及多形核白細(xì)胞浸潤、肺泡間隔增厚。FES組可見不同程度的間質(zhì)水腫、中性粒細(xì)胞浸潤、出血、肺泡紊亂、肺泡間隔增厚。UDCA預(yù)處理后，肺損傷程度明顯改善。20mg/kgUDCA比10mg/kgUDCA更能明顯緩解FES引起的肺損傷，而20mg/kgUDCA與40mg/kgUDCA無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。UDCA單獨(dú)處理與Control組無明顯差異（圖2A）。肺損傷評分與病理組織學(xué)改變結(jié)果相一致（圖2B）。BALF細(xì)胞學(xué)結(jié)果表明，與Control組相比，F(xiàn)ES組BALF中性粒細(xì)胞數(shù)量明顯增加，UDCA預(yù)處理能明顯降低FES引起的中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)增加（圖2C）。MPOmRNA結(jié)果提示，與Control組相比，F(xiàn)ES組MPO活性明顯增高，UDCA預(yù)處理降低了FES引起的MPO活性增高（圖2D）。此外，ELISA分析BALF內(nèi)炎性因子水平發(fā)現(xiàn)，與Control組相比，F(xiàn)ES組炎性因子TNF-α和IL-1β明顯升高，而UDCA預(yù)處理能夠明顯降低FES引起的炎性因子水平升高（圖2E-F）。UDCA組與Control組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。圖2UDCA在FES引起的肺損傷中的作用。UDCA注射1小時(shí)后進(jìn)行腎周脂肪處理，UDCA及腎周脂肪溶液均通過尾靜脈注射，Control組給予等量的生理鹽水處理。(A)大鼠肺組織的HE染色結(jié)果；(B)各組急性肺損傷評分；(C)BALF中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)；(D)MPOmRNA水平；(E)BALF中TNF-α濃度；(F)BALF中IL-1β濃度。

S相關(guān)的生理功能障礙和肺泡毛細(xì)血管屏障破壞的影響與此同時(shí)，我們還檢測了常見的炎癥指標(biāo)。與Control組相比，F(xiàn)ES組PaO2及PaO2/FiO2明顯降低，UDCA預(yù)處理明顯改善了FES引起的PaO2及PaO2/FiO2的降低（圖3A-B）；另外，BALF總蛋白濃度結(jié)果表明，與Control組相比，F(xiàn)ES組BALF蛋白濃度明顯升高，UDCA預(yù)處理明顯降低了FES導(dǎo)致的BALF蛋白濃度升高（圖3C）；肺組織濕干比結(jié)果顯示，與Control組相比，F(xiàn)ES組濕干比明顯增加，UDCA處理后抑制了FES引起的濕干比增加（圖3D）。相比之下，UDCA單獨(dú)處理對健康大鼠上述炎癥變化影響不大。圖3UDCA明顯改善了ALI/ARDS相關(guān)的生理功能障礙和肺泡毛細(xì)血管屏障破壞。（A）動脈血氧分析結(jié)果；（B）PaO2/FiO2比率；（C）BALF蛋白濃度；（D）肺組織濕干比。Figure3UDCAsignificantlyimprovedALI/ARDSassociatedphysiologicaldysfunctionandthedestructionofalveolarcapillarybarrier.(A)Resultsforarterialpressureofoxygenanalysis;(B)PaO2/FiO2ratios;(C)ProteinconcentrationofBALF;(D)LungW/Dratios.Dataaremean±SEM,n=8.*p<0.05.


本文編號：3265810