[背景和目的]腦缺血再灌注損傷（Ischemia-reperfusion injury,I/R）是腦組織經(jīng)缺血后,血供恢復(fù),過量的自由基導(dǎo)致的組織內(nèi)的細(xì)胞損傷。減輕腦I/R損傷,對(duì)改善腦缺血性疾病患者預(yù)后非常重要。腦I/R損傷的確切機(jī)制有待進(jìn)一步深入研究。星形膠質(zhì)細(xì)胞是腦和脊髓中特有的星形神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。星形膠質(zhì)細(xì)胞的功能包括:對(duì)形成血腦屏障的內(nèi)皮細(xì)胞的生物支持,向神經(jīng)組織提供營養(yǎng),維持細(xì)胞外離子平衡,以及對(duì)腦損傷后腦和脊髓的修復(fù)和瘢痕形成的作用。星形膠質(zhì)細(xì)胞通過縫隙連接相連,形成電耦合胞體與其鄰近細(xì)胞通過間隙連接對(duì)遠(yuǎn)離原始星形膠質(zhì)細(xì)胞的其他星形膠質(zhì)細(xì)胞的活動(dòng)產(chǎn)生影響。構(gòu)成腦縫隙連接的連接蛋白（Connexins,Cxs）能夠調(diào)控腦內(nèi)離子和小分子的細(xì)胞間擴(kuò)散。Cx43、Cx30在腦星形膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)量最高,在調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度中起到重要作用。大腦主要的興奮性遞質(zhì)谷氨酸可通過縫隙連接擴(kuò)散,而高濃度的谷氨酸能夠誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷和死亡。缺血/再灌注損傷及其誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)能夠激活星形膠質(zhì)細(xì)胞半通道,促進(jìn)細(xì)胞釋放鈣離子、谷氨酸、炎癥因子到細(xì)胞外。谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白與谷氨酸相關(guān)受體調(diào)控谷氨酸的細(xì)胞外濃度... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖３大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)過不同時(shí)間的氧糖剝奪再灌注后ＣＣＫ８的細(xì)胞活力測(cè)定

第一部分?星形膠質(zhì)細(xì)胞縫隙連接蛋白Ｃｘ３０／Ｃｘ４３與谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ＥＡＡＴ１在腦缺血再灌注損傷中的作用及機(jī)制研宄??ＯＧＤ／Ｒ培養(yǎng)液上清處理的神經(jīng)元結(jié)果類似，氧糖剝奪８ｈ再灌注１２ｈ的細(xì)胞狀態(tài)較??僅氧糖剝奪８ｈ的變化更為顯著??Ａ?ＤＡＰＩ?Ｍａｐ２?Ｍｅｒｇｅ??ＯＧＤ??Ｂ?ＤＡＰＩ?ＧＦＡＰ?Ｍａｐ２?Ｍｅｒｇｅ??丨ｕｂＳＳＨＭ＾Ｓ??，■■■國??■■＿＿??圖４大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)氧糖剝奪再灌注對(duì)神經(jīng)元的影響。Ａ）星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液上??清加至神經(jīng)元，熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記的神經(jīng)元Ｍａｐ２蛋白表達(dá)定位；Ｂ）大鼠星形膠質(zhì)細(xì)??胞與神經(jīng)元共培養(yǎng)經(jīng)氧糖剝奪再灌注（ＯＧＤ／Ｒ），熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記的神經(jīng)元ＭａＰ２及??ＧＦＡＰ蛋白表達(dá)定位。??１８??

第一部分?星形膠質(zhì)細(xì)胞縫隙連接蛋白Ｃｘ３０／Ｃｘ４３與谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ＥＡＡＴ１在腦缺血再灌注損傷中的作用及機(jī)制研究??６．＼￥６５（６１＊１１１）丨〇１檢測(cè)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞０００／只后￡＼３０，￡＼４３，￡入入�。钡鞍妆�??達(dá)結(jié)果??新生大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞（？３），〇〇〇８１１／１１１２１１后以￡５１６１１＾１〇１檢測(cè)〇＼３０，＆４３，￡八八�。�??蛋白表達(dá)水平，結(jié)果見圖６。與正常條件下培養(yǎng)的細(xì)胞相比，氧糖剝奪（ＯＧＤ）?８ｈ的??細(xì)胞以及再灌注１２ｈ的細(xì)胞內(nèi)Ｃｘ４３和ＥＡＡＴ１蛋白表達(dá)水平顯著升高（ＰＵＪ），??Ｃｘ３０表達(dá)顯著降低；氧糖剝奪再灌注（〇ＧＤ８ｈ／Ｒｉ２ｈ）組細(xì)胞Ｃｘ４３和ＥＡＡＴ１蛋白表??達(dá)水平與氧糖剝奪組（〇ＧＤ８ｈ）相比差異顯著升高（戶＜０．０５）。結(jié)果提示，氧糖剝奪??再灌注對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞Ｃｘ４３和ＥＡＡＴ１基因蛋白表達(dá)的影響作用高于僅氧糖剝奪處??理的細(xì)胞。??Ａ?Ｂ??ＥＡＡＴｌＩ?＞?＊＊ｍｍ＿＞?嫺＿—？?６０ＫＤ?Ｉ?１＇５＇??議—４３ｋｄ?�。欤保埃�?＿?丨；丨?二??－—＾?二細(xì)?ｉｆｉ?ｉ?§??ＧＡＰＤＨ｜?—?—?——?３６ＫＤ?｜?ｊ?攀攀圍??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ８ｈ?ＯＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ８ｈ?ＯＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ??Ｃ?Ｄ??＃??§?２５１?二?ｇ?２．０－１?＊＊??Ｐｊｌ?ａｌｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤｇｈ?ＯＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ８ｈ?〇ＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ??圖６?Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)ＯＧＤ／Ｒ處理后細(xì)胞內(nèi)Ｃｘ３０，?Ｃｘ４３和ＥＴＴＡｌ的蛋??白表達(dá)。Ｂ）?Ｃｘ３０蛋白表達(dá)


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