背景:延髓頭端腹內(nèi)側(cè)區(qū)（Rostral Ventromedial Medulla,RVM）是中樞痛覺下行調(diào)節(jié)系統(tǒng)的最后一個(gè)核團(tuán),被認(rèn)為是疼痛調(diào)控的“閘門”。當(dāng)外周出現(xiàn)疼痛刺激時(shí),RVM這一“閘門”中存在放電活動(dòng)立刻顯著增加的“開”神經(jīng)元（ON細(xì)胞）和放電活動(dòng)立刻顯著減少的“關(guān)”神經(jīng)元（OFF細(xì)胞）。但這些能對(duì)疼痛刺激產(chǎn)生特異性放電變化,與疼痛關(guān)系如此密切的ON和OFF細(xì)胞,究竟對(duì)疼痛發(fā)揮怎樣的作用仍是未解之謎。解開這一謎團(tuán)有助于探索疼痛機(jī)制,尋找疼痛治療的可能靶點(diǎn)。目的:探究特異性調(diào)控ON細(xì)胞對(duì)急慢性疼痛的影響并初步探索其所接受上行投射的神經(jīng)環(huán)路。方法:本研究分為三個(gè)部分:1)使用CPRSPR-Cas9技術(shù)構(gòu)建Gper1-Cre小鼠并通過短片段PCR聯(lián)合瓊脂糖凝膠電泳鑒定基因型;采用含白喉毒素片段A（Diphtheria Toxin A-chain,DTA）病毒或光遺傳激活病毒分別特異性毀損或激活ON細(xì)胞,通過熱板、福爾馬林實(shí)驗(yàn)和結(jié)直腸充脹（Colorectal Distention,CRD）等行為學(xué)實(shí)驗(yàn)探討對(duì)生理痛閾和完全弗式佐劑（Complete Freund’s Adjuvant... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
中文部分
    1.緒論
        1.1 中樞下行易化與抑制系統(tǒng)參與疼痛調(diào)節(jié)
        1.2 RVM區(qū) ON細(xì)胞參與疼痛調(diào)節(jié)
        1.3 脊髓與脊髓上中樞神經(jīng)系統(tǒng)的投射聯(lián)系
        1.4 脊髓水平存在軀體感覺特異性相關(guān)的神經(jīng)元
    2.材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2 實(shí)驗(yàn)材料
            2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
            2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
        2.3 主要實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.1 Gper1-Cre小鼠構(gòu)建
            2.3.2 Gper1-Cre小鼠基因型鑒定
            2.3.3 腦區(qū)和脊髓立體定位注射
            2.3.4 腦組織和脊髓組織制片
            2.3.5 免疫熒光染色
            2.3.6 慢性足底炎性疼痛模型的制備
            2.3.7 炎癥性腸病慢性內(nèi)臟疼痛模型的制備
            2.3.8 機(jī)械性痛閾值的檢測
            2.3.9 熱痛閾值的檢測
            2.3.10 炎性痛閾值的檢測
            2.3.11 內(nèi)臟痛閾值的檢測
            2.3.12 光遺傳和化學(xué)遺傳調(diào)控方法
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 特異性調(diào)控RVM區(qū) ON細(xì)胞影響慢性疼痛
            3.1.1 Gper1-Cre小鼠的構(gòu)建與驗(yàn)證
            3.1.2 含白喉毒素元件的病毒毀損RVM區(qū) ON細(xì)胞可抑制慢性疼痛
            3.1.3 光遺傳激活RVM區(qū) ON細(xì)胞易化慢性疼痛
        3.2 脊髓存在一類興奮性神經(jīng)元可上行激活下行易化系統(tǒng)
            3.2.1 脊髓神經(jīng)元可直接投射至RVM區(qū)
            3.2.2 SNAPR神經(jīng)元為一類興奮性神經(jīng)元
            3.2.3 調(diào)控SNAPR神經(jīng)元可影響機(jī)械疼痛閾值
        3.3 光遺傳直接刺激脊髓SNAPR神經(jīng)元可激活RVM區(qū) ON細(xì)胞
            3.3.1 脊髓神經(jīng)元直接投射至RVM區(qū) ON細(xì)胞
            3.3.2 傷害性刺激可直接導(dǎo)致RVM區(qū) ON細(xì)胞放電活動(dòng)增加
            3.3.3 光遺傳調(diào)控SNAPR神經(jīng)元可激活RVM區(qū) ON細(xì)胞
    4.討論
        4.1 RVM區(qū) ON細(xì)胞在疼痛調(diào)節(jié)中的作用
        4.2 脊髓存在一類興奮性神經(jīng)元可易化慢性疼痛
        4.3 脊髓神經(jīng)元可上行激活RVM區(qū) ON細(xì)胞
    5.結(jié)論
英文部分
    1. Introduction
    2. Materials and Methods
    3. Results
    4. Discussion
    5. Conclusion
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果
八年制學(xué)位論文要求



本文編號(hào)：3162904