實驗目的:經(jīng)導管行血管化療栓塞或者經(jīng)導管行血管栓塞已經(jīng)成為不可切除性肝細胞癌關鍵的治療方法。盡管栓塞造成的缺氧可以導致絕大多數(shù)腫瘤細胞的壞死和凋亡,但是仍有少數(shù)腫瘤細胞會產(chǎn)生化療抵抗或者缺氧抵抗。缺氧產(chǎn)生的缺氧誘導因子（HIF-1α）可以賦予殘存的腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移的能力。因此,我們合成了一種缺氧復制型溶瘤腺病毒（HYAD）以期進一步殺滅表達缺氧誘導因子的殘存腫瘤細胞。材料和方法:在本研究中我們在體外條件下探尋肝腫瘤細胞受缺氧復制型溶瘤腺病毒轉(zhuǎn)染后在缺氧和常氧條件下的蛋白質(zhì)表達、增殖、凋亡和壞死。也通過建立VX2瘤兔肝癌模型,在DSA引導下經(jīng)導管行肝動脈栓塞配合缺氧復制型溶瘤腺病毒灌注以檢測其抑制腫瘤的效果。通過組織病理學檢查和增強CT掃描對這種治療方式抑制腫瘤的生長和侵襲進行評估。實驗結(jié)果:體外實驗證實,缺氧復制型溶瘤腺病毒的表達和復制完全遵從缺氧誘導因子（HIF-1α）或者缺氧環(huán)境。同野生型腺病毒5型相比,在缺氧條件下缺氧復制型溶瘤腺病毒（HYAD）的表達復制更多,這也是HYAD殺傷經(jīng)導管肝動脈栓塞后殘存的腫瘤細胞的主要原理。在VX2瘤兔肝癌模型的體外實驗中,與對照組HYAD經(jīng)肝動... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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018年版原發(fā)性肝癌診療指南（TACE部分）

華中科技大學博士學位論文3圖1.12018年版原發(fā)性肝癌診療指南（TACE部分）圖1.22018年版原發(fā)性肝癌診療指南（TACE部分）3.TACE治療的優(yōu)勢與局限性TACE治療是基于選擇性插管進入腫瘤供血動脈并注射栓塞材料和化療藥物的治療方法，這個治療過程的主要治療原理是因為栓塞材料的堵塞造成繼發(fā)的局部缺血缺氧進而導致腫瘤細胞的凋亡、壞死。它對于肝癌患者有兩大優(yōu)勢：一，引起強烈的治療反應，延緩甚至消除腫瘤進展；二，局部治療下只要插管的技術(shù)成功，可以最大限

華中科技大學博士學位論文17第三部分實驗研究1.缺氧復制性溶瘤腺病毒的制備1.1缺氧復制性溶瘤腺病毒的構(gòu)建思路從美國ATCC購得人野生腺病毒5型，以此為基礎進行缺氧復制型溶瘤腺病毒的包裝與合成。從人源血管生長因子（VEGF）中獲取缺氧反應元件（HRE）的片段，35bphumanVEGFHRE序列如下:CCACAGTGCATACGTGGGCTCCAACAGGTCCTCTT長度兩端添加同尾酶XhoI/SalI，長度共41bp。利用T4連接酶串聯(lián)多個HRE序列，用XhoII/SalI雙酶切篩選正向串聯(lián)的多個重復HRE序列。得到9個片段的串聯(lián)9×HRE序列。以野生型AD-5腺病毒基因組為模板由PCR擴增獲得E1基因，將之連接入pBI-9×HRE的多克隆位點MCSI區(qū)的EcoRV位點，得到pBI-9×HRE-E1質(zhì)粒。如下圖：圖2pBI-9×HRE-E1質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖以pBI-9×HRE-E1為模板由PCR擴增獲得從SV40polyA到E1結(jié)尾的序列，連接

【參考文獻】：
期刊論文
[1]攜帶人mda-7/IL-24基因溶瘤腺病毒SG600-IL24構(gòu)建及其選擇性殺傷肝癌細胞的機制研究[J]. 肖朝文,鄭小林,蔡常春,鄭建偉,申銘.  中國普通外科雜志. 2019(01)
[2]雙基因溶瘤腺病毒OAd-mK5-shPKM2抗肝癌活性的初步探究[J]. 杜春明,劉新垣.  浙江理工大學學報(自然科學版). 2019(01)
[3]Lactic acid in tumor microenvironments causes dysfunction of NKT cells by interfering with mTOR signaling[J]. Di Xie,Shasha Zhu,Li Bai.  Science China（Life Sciences）. 2016(12)
[4]The IAP family: endogenous caspase inhibitors with multiple biological activities[J]. YANG YI LI, XIAO MING LI(Laboratory of Immune Cell Biology, Division of Basic Sciences, National Cancer Institute, National Institutes of Health, Bethesda, MD 20892, USA).  Cell Research. 2000(03)



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