胃癌是一種嚴重威脅人類健康的疾病,其在所有惡性腫瘤中的發(fā)病率和致死率分列第六位和第二位。盡管近年來,胃癌在預防、診斷和治療等方面取得了重大進展,但仍有許多問題尚未解決,尤其是胃癌發(fā)生發(fā)展的免疫學調(diào)控機制有待闡明。目前普遍認為,胃癌的發(fā)生發(fā)展及其預后受腫瘤與宿主免疫系統(tǒng)的相互調(diào)控。肥大細胞是胃癌微環(huán)境中的重要組成部分。目前的研究主要集中于肥大細胞的浸潤程度與患者生存率的相關(guān)性分析,以及肥大細胞浸潤程度與腫瘤局部血管生成的關(guān)系。然而,肥大細胞在胃癌中的分布、免疫調(diào)控機制和具體的效應尚不明確。研究目的1.明確肥大細胞在胃癌微環(huán)境中浸潤情況及相關(guān)趨化機制2.闡明胃癌微環(huán)境誘導肥大細胞脫顆粒的調(diào)控機制及其促瘤效應3.明確胃癌微環(huán)境中肥大細胞的表型特征及其調(diào)控機制4.闡明肥大細胞通過發(fā)揮免疫抑制功能介導胃癌進展的作用機制及其臨床意義研究方法1.肥大細胞在胃癌微環(huán)境中浸潤情況及相關(guān)趨化機制從胃癌組織（包括瘤內(nèi)區(qū)、浸潤區(qū)、癌旁區(qū)和非腫瘤正常胃組織區(qū)）中分離制備單細胞懸液,流式細胞術(shù)檢測肥大細胞在不同部位的浸潤情況,并用免疫組織化學方法檢測肥大細胞在胃癌組織中的分布。在胃癌組織中,檢測肥大細胞上的趨化因... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：150 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

流式細胞術(shù)檢測肥大細胞在胃癌組織中浸潤程度及其與胃癌分期的關(guān)系

陸軍軍醫(yī)大學博士學位論文，在低倍光學顯微鏡下拍照并計數(shù)肥大細胞的浸潤數(shù)目，統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)：晚內(nèi)區(qū)的肥大細胞數(shù)為 90 ±6 ，其浸潤數(shù)目顯著高于浸潤區(qū)（39 ±7）、癌旁和非腫瘤正常組織區(qū)（23 ± 3）（P<0.01，圖 1-2b）。此外，根據(jù)不同期瘤內(nèi)區(qū)肥大細胞數(shù)目分別為 32 ±5、34 ±3、76 ±7 及 114 ±10，隨著肥大細胞數(shù)目增多，尤其是在 III、IV 期中肥大細胞浸潤顯著增多（圖

流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)：胃癌組織中肥大細胞幾乎不表達 Ki-67（圖1-3a）。此外，對胃癌組織標本進行免疫熒光染色也得到了一致的結(jié)論（圖 1-3b）。圖 1-3 胃癌組織肥大細胞的原位增殖情況Figure 1-3 In situ proliferation of mast cells in GC. (a) The expression of Ki-67 in mast cells of GCpatients (Color histograms represent staining of Ki-67; black, isotype control). (b) Tumor-infiltratingtryptase+mast cells and Ki-67+cells were defined by immunofluorescence staining (Green, Tryptase;red, Ki-67; and blue, DAPI-stained nuclei. Scale bars: 50 microns)2.4.3 篩查胃癌組織中肥大細胞趨化因子受體表達情況上述實驗結(jié)果提示肥大細胞在胃癌組織并未發(fā)生原位增殖，那么其在胃癌組織中浸潤增多是否是由趨化所致呢？通過流式染色對胃癌組織中肥大細胞的趨化因子受體譜進行篩查，發(fā)現(xiàn)其并不表達 CCR2、CCR4、CCR5、CCR7、CXCR1、CXCR2 及 CXCR7，但高表達 CXCR4（圖 1-4a）。胃癌組織中 CXCR4+肥大細胞占總肥大細胞的百分比為74.88% ± 3.56%，顯著高于癌旁（59.83% ± 4.68%）及非腫瘤正常胃組織（51.94% ±4.52%）（P<0.01，圖 1-4b、c）。同時，免疫熒光共染也證實肥大細胞表達 CXCR4（圖 1-4d）。以上結(jié)果提示，肥大細胞上 CXCR4 可能在肥大細胞

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國各類癌癥的發(fā)病率和死亡率現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 陳金東.  遵義醫(yī)學院學報. 2018(06)



本文編號：3105324