miR-155調(diào)控棕櫚酸誘導(dǎo)的血管損傷的作用及其機(jī)制研究
發(fā)布時間:2021-03-21 03:18
以動脈粥樣硬化為代表的心血管疾病是一種慢性疾病,隨著人口老齡化的加劇,心血管疾病的仍是全球承認(rèn)過早死亡的主要原因,因此,闡明其發(fā)病機(jī)制及轉(zhuǎn)歸至關(guān)重要。血管重構(gòu)是大多數(shù)心血管疾病的發(fā)病和進(jìn)展的基礎(chǔ),高飽和脂肪酸亦是心血管疾病的危險因素,近年來研究證實(shí)miR-155對于血管穩(wěn)態(tài)及血管重構(gòu)具有至關(guān)重要的作用,因此,本研究以miR-155為著眼點(diǎn),探討其調(diào)控以棕櫚酸為代表的飽和脂肪酸誘導(dǎo)的血管損傷的作用,明確其調(diào)控機(jī)制。第一部分動脈粥樣硬化miR-155的差異表達(dá)目的:研究觀察miR-155在動脈粥樣硬化患者血清中的表達(dá)差異,探討miR-155與動脈粥樣硬化的相關(guān)性。方法:經(jīng)倫理審查及患者知情同意條件下,采集動脈粥樣硬化患者及健康體檢者血清各30例,通過RT-PCR檢測動脈粥樣硬化患者血清中miR-155含量進(jìn)行檢測。結(jié)果:檢測結(jié)果提示,動脈粥樣硬化患者血清標(biāo)本中的miR-155水平較健康對照組呈顯著下調(diào),差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:動脈粥樣硬化患者血清中miR-155表達(dá)下調(diào),此異常結(jié)果提示miR-155可能在動脈粥樣硬化起病及其進(jìn)展過程中發(fā)揮作用。第二部分miR-155調(diào)控棕櫚酸誘導(dǎo)的...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
RT-PCR驗(yàn)證miR-155在動脈粥樣硬化組(n=30)與健康對照組(n=30)的差異表達(dá),*P<0.05,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
miR-155在動脈粥樣硬化中的體內(nèi)作用6結(jié)論
第二部分miR-155調(diào)控棕櫚酸誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷294.2Wnt信號通路在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs中的表達(dá)為了檢測Wnt信號通路在palmitate誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用,我們通過Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測Wnt信號通路關(guān)鍵蛋白β-catenin及CyclinD等表達(dá)水平。結(jié)果如圖4A所示,palmitate處理HUVECs后,β-catenin及CyclinD的蛋白水平顯著升高。當(dāng)在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-155mimics后,細(xì)胞中β-catenin及CyclinD的蛋白水平明顯降低;轉(zhuǎn)染miR-155antagomir后,β-catenin及CyclinD的蛋白水平顯著增加。免疫熒光結(jié)果顯示(圖4B),palmitate處理HUVECs后,細(xì)胞核上的β-catenin表達(dá)水平出現(xiàn)明顯增加,當(dāng)在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-155mimics后,細(xì)胞核上的β-catenin表達(dá)水平明顯降低,轉(zhuǎn)染miR-155antagomir后,細(xì)胞核上的β-catenin表達(dá)水平明顯降增加。該結(jié)果說明miR-155可以調(diào)節(jié)palmitate誘導(dǎo)的HUVECs細(xì)胞中Wnt信號通路的表達(dá)。圖4Wnt信號通路在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs中的表達(dá)(A)Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測Wnt信號通路關(guān)鍵蛋白β-catenin及CyclinD等表達(dá)水平。(B)通過免疫熒光在細(xì)胞中定位β-catenin表達(dá)。Errorbarsrepresentmean±SDfromthreeindependentexperiments;*P<0.05versusControlgroup,#P<0.05versuspalmitategroup.
本文編號:3092215
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
RT-PCR驗(yàn)證miR-155在動脈粥樣硬化組(n=30)與健康對照組(n=30)的差異表達(dá),*P<0.05,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
miR-155在動脈粥樣硬化中的體內(nèi)作用6結(jié)論
第二部分miR-155調(diào)控棕櫚酸誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷294.2Wnt信號通路在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs中的表達(dá)為了檢測Wnt信號通路在palmitate誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用,我們通過Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測Wnt信號通路關(guān)鍵蛋白β-catenin及CyclinD等表達(dá)水平。結(jié)果如圖4A所示,palmitate處理HUVECs后,β-catenin及CyclinD的蛋白水平顯著升高。當(dāng)在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-155mimics后,細(xì)胞中β-catenin及CyclinD的蛋白水平明顯降低;轉(zhuǎn)染miR-155antagomir后,β-catenin及CyclinD的蛋白水平顯著增加。免疫熒光結(jié)果顯示(圖4B),palmitate處理HUVECs后,細(xì)胞核上的β-catenin表達(dá)水平出現(xiàn)明顯增加,當(dāng)在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-155mimics后,細(xì)胞核上的β-catenin表達(dá)水平明顯降低,轉(zhuǎn)染miR-155antagomir后,細(xì)胞核上的β-catenin表達(dá)水平明顯降增加。該結(jié)果說明miR-155可以調(diào)節(jié)palmitate誘導(dǎo)的HUVECs細(xì)胞中Wnt信號通路的表達(dá)。圖4Wnt信號通路在palmitate誘導(dǎo)的HUVECs中的表達(dá)(A)Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測Wnt信號通路關(guān)鍵蛋白β-catenin及CyclinD等表達(dá)水平。(B)通過免疫熒光在細(xì)胞中定位β-catenin表達(dá)。Errorbarsrepresentmean±SDfromthreeindependentexperiments;*P<0.05versusControlgroup,#P<0.05versuspalmitategroup.
本文編號:3092215
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