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“脊髓康”治療脊髓損傷的臨床觀察及其促進(jìn)脊髓損傷后神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-08 10:50
  背景脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后神經(jīng)再生困難是世界性難題。脊髓損傷后如何改善病損局部微環(huán)境、延緩繼發(fā)性損傷進(jìn)展、促進(jìn)神經(jīng)元再生修復(fù)是治療關(guān)鍵點(diǎn)。膠質(zhì)疤痕的過(guò)度增生被認(rèn)為是損傷后神經(jīng)軸突不能再生并穿越損傷處的主要原因之一。中藥“脊髓康”為無(wú)錫市中醫(yī)醫(yī)院臨床經(jīng)驗(yàn)方,前期研究發(fā)現(xiàn)具有鎮(zhèn)痛、抗炎、促進(jìn)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)等作用。然而,“脊髓康”促進(jìn)脊髓損傷修復(fù)的作用機(jī)制尚不完全清楚;诖,我們?cè)O(shè)計(jì)臨床研究、基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),評(píng)價(jià)“脊髓康”治療脊髓損傷的療效,探討其抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞活化促進(jìn)脊髓損傷修復(fù)的機(jī)制,為其治療脊髓損傷提供科學(xué)依據(jù)。目的(1)分析“脊髓康”促進(jìn)脊髓損傷患者神經(jīng)功能康復(fù)的療效,探討影響脊髓損傷患者神經(jīng)功能恢復(fù)的相關(guān)因素;(2)觀察大鼠脊髓損傷后脊髓組織中星形膠質(zhì)細(xì)胞的動(dòng)態(tài)表達(dá)情況,探討星形膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)再生過(guò)程中的作用和意義;(3)觀察“脊髓康”對(duì)大鼠脊髓損傷后病損區(qū)域組織結(jié)構(gòu)、大鼠肌力的影響,評(píng)價(jià)“脊髓康”促進(jìn)大鼠神經(jīng)功能再生的療效;(4)觀察“脊髓康”對(duì)大鼠脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)、GFAP、CSPG蛋白表達(dá)的影響,探討其促進(jìn)脊髓損傷后神經(jīng)再生的作用... 

【文章來(lái)源】:南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:108 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

“脊髓康”治療脊髓損傷的臨床觀察及其促進(jìn)脊髓損傷后神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究


圖2?C假手術(shù)組D模型組大鼠(GFAP染色xl〇〇倍)??2.2組GFAP蛋Western?blot

脊髓損傷,脊髓,統(tǒng)計(jì)學(xué),時(shí)間點(diǎn)


?第三部分脊髓康促進(jìn)脊髓損傷后神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究???14d??賺.,??GFAP??一??GAPHD??(圖3?1:模型組2:假手術(shù)組)??組別?3d?7d?14d??假手術(shù)組?0.334±0.001?0.356±0.002?0.397±0.003??模型組?0.225±0.005a?0.451±0.005a?0.478±0.001a??表1各組大鼠脊髓組織中GFAP蛋白表達(dá)相對(duì)水平(Y±S,n=3)??注:與假手術(shù)組比較,aP<〇.〇5??2.3各組大鼠GFAP?mRNA動(dòng)態(tài)表達(dá)??不同時(shí)間點(diǎn)正常組脊髓損傷區(qū)GFAPmRNA表達(dá)量較為恒定,長(zhǎng)時(shí)間保持為1;??未經(jīng)造模的大鼠,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的三個(gè)時(shí)間點(diǎn),采樣后行GFAPmRNA檢測(cè),數(shù)值??同正常組大鼠相比,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。大鼠成功造模后在開始階段GFAP??mRNA表達(dá)低,3天后表達(dá)量逐漸上升,并第7天到達(dá)最高值,其后數(shù)據(jù)逐步降低,??但其高峰后的最低值仍高于假手術(shù)組。成功造模的大鼠,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的三個(gè)時(shí)間??點(diǎn),標(biāo)本采樣后行GFAP?mRNA檢測(cè),數(shù)值同正常大鼠相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<?0.05)。??(見(jiàn)表2)??組別?3d?7d?14d??假手術(shù)組?1.13±0.03?1.03±0.04?丨.12±0.02??模型組?0.34?土?0.02*?1.65?±0.02*?L57±0.03*??表2各組大鼠脊髓組織中GFAP的動(dòng)態(tài)變化(Y±S,?n=3)??3小結(jié)??近年來(lái),因脊髓損傷的修復(fù)難度高、患者致殘率大,一直是科學(xué)研究的熱點(diǎn)。??多年來(lái)的研究并未攻克這一難題。如何改善病損局部微環(huán)境、延緩繼發(fā)性損傷進(jìn)展、??促進(jìn)

放大倍數(shù),膠質(zhì),脊髓


?南京中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文???U1斜板實(shí)驗(yàn)、肌力檢測(cè)評(píng)價(jià)??斜板實(shí)驗(yàn):將SD大鼠置于傾斜木板頂端,觀察其下落角度。以其能夠靜止于??板上的最大角度為指標(biāo)。隨機(jī)抽。樱拇笫螅谝(guī)定時(shí)間點(diǎn),完成測(cè)試。??肌力:按改良的Tarlov標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)SCI后肌力情況。分為五個(gè)等級(jí):1分,大鼠??后肢未見(jiàn)肌肉收縮;2分,大鼠后肢可見(jiàn)肌肉收縮,無(wú)關(guān)節(jié)活動(dòng);3分,后肢肌肉??收縮、無(wú)法站立;4分,能站立,但行走不能;5分,大鼠后肢肌力正常。各組大鼠??術(shù)前均為5分。隨機(jī)抽。樱拇笫螅谝(guī)定時(shí)間點(diǎn),完成測(cè)試。??2結(jié)果??2.1大鼠脊髓組織HE染色??假手術(shù)組可見(jiàn)分散的星形膠質(zhì)細(xì)胞,無(wú)明顯出血灶和明顯的星形膠質(zhì)細(xì)胞肥??大。模型組病變區(qū)神經(jīng)纖維受損,局部出血灶,大量星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖并相互連接。??脊髓康組(高劑量、低劑量)中可見(jiàn)肥大的星形膠質(zhì)細(xì)胞,與假手術(shù)組相比,膠質(zhì)??增生明顯。強(qiáng)的松組均可見(jiàn)星形細(xì)胞與少突膠質(zhì)細(xì)胞,相對(duì)于脊髓康組,數(shù)量減少,??星形細(xì)胞有部分肥大(見(jiàn)圖1)。??■■??假手術(shù)組?模型組??誓喚#托謂々麵金.養(yǎng)??Of-.::????強(qiáng)的松組?脊髓康組??(圖1?HE染色,放大倍數(shù)X200)??2.2大鼠脊髓組織Nissl染色??尼氏體廣泛存在于細(xì)胞質(zhì)。在機(jī)體內(nèi)它的功能是合成蛋白質(zhì)并為神經(jīng)活動(dòng)提供??能量。與HE染色相比,Nissl染色能更清楚地觀察神經(jīng)元的細(xì)胞結(jié)構(gòu),并能確定神??經(jīng)元的損傷程度。未經(jīng)造模的大鼠脊髓組織內(nèi)可見(jiàn)尼氏體無(wú)異常,正常的胞仁、胞??47??


本文編號(hào):3070926

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