第一部分 Fascin-1促進(jìn)下咽鱗癌侵襲和轉(zhuǎn)移的機制研究實驗?zāi)康?Fascin-1是一種肌動蛋白成束蛋白,主要與F-actin結(jié)合并連接成有序、平行的微絲束,參與細(xì)胞粘附和細(xì)胞遷移的調(diào)控,在多種腫瘤呈高表達(dá),并與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。然而fascin-1在下咽鱗癌組織中的表達(dá)情況以及fascin-1在下咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的內(nèi)在分子機制尚不明確。因此,本實驗主要研究以下二個方面的內(nèi)容:1、探討fascin-1在下咽鱗癌組織的表達(dá)及其與臨床病理資料和預(yù)后的關(guān)系;2、探討fascin-1表達(dá)變化對下咽癌FaDu細(xì)胞形態(tài)、遷移和侵襲能力的影響以及fascin-1促進(jìn)下咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移的內(nèi)在分子機制。實驗方法:1、以96例下咽鱗癌組織標(biāo)本為研究對象,采用免疫組織化學(xué)法,檢測fascin-1蛋白在下咽鱗癌癌組織和癌旁組織的表達(dá)情況,并進(jìn)一步分析其表達(dá)與下咽鱗癌臨床病理資料（年齡,性別、腫瘤大小、臨床分期、病理分級、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肺轉(zhuǎn)移）及預(yù)后的關(guān)系。2、以下咽癌FaDu細(xì)胞系為研究對象,分別應(yīng)用fascin-1 siRNA和fascin-1過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染下咽癌FaDu細(xì)胞,沉默或上調(diào)fascin-... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．?Ｆａｓｃｉｎ－１蛋白結(jié)構(gòu)??

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???試驗結(jié)果??１．?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌組織的表達(dá)及其與下咽癌臨床病理資料和預(yù)后的關(guān)系??１．１?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌組織及癌旁組織的表達(dá)??為研宂ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌組織的表達(dá)情況，應(yīng)用免疫組織化學(xué)ＳＰ法對??９６例下咽鱗癌組織標(biāo)本進(jìn)行ｆａｓｃｉｎ－１檢測，明確ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌組織??和癌旁組織的表達(dá)水平。結(jié)果如圖１所示：Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌組織和癌旁??組織中均有不同程度的表達(dá)，其表達(dá)主要位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。Ｆａｓｃｉｎ－１在下??咽癌癌旁組織中多呈低表達(dá)或部分中表達(dá)，并且ｆａｓｃｉｎ－１表達(dá)主要局限十粘膜??基底層細(xì)胞（圖ＩＤ）；?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌組織中可呈現(xiàn)低、中、高不同程度??的表達(dá)，并且ｆａｓｃｉｎ－１在腫瘤組織侵襲前緣的表達(dá)強度明顯高于其它區(qū)域（圖??１Ｈ）。??Ａ?＿＿°????癌旁組織??ｘｉｂａ?ｘ２〇ｏ?ｘｉｂｏ?＂?■?？?ｘ２〇ｏ??Ｅ？??／Ｆ?＼????癌姐織■，舞：ｐ．＇；?ｆｃ：ｖ?？??％?ｖ??Ｌ?Ｌ?Ｉ??ｘｉｂｕ?ｘ２〇ｏ?ｘｉｂａ?＂?－?ｉｘ２〇ｏ??圖１免疫組織化學(xué)檢測ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌組織的表達(dá)Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁??組織（Ａ，?Ｂ，Ｃ和Ｄ）和癌組織（Ｅ，Ｆ，?Ｇ和Ｈ）的表達(dá)；Ｂ，?Ｄ，Ｆ和Ｈ分別為Ａ，?Ｃ，?Ｅ和??Ｇ中框內(nèi)區(qū)域的高倍鏡下表現(xiàn)；Ａ，?Ｂ，?Ｅ和Ｆ顯示ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁組織和癌??組織的陰性表達(dá)；Ｃ，?Ｄ，?Ｇ和Ｈ顯示ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁組織和癌組織的陽性??表達(dá)（Ｘ１００，Ｘ２００）。??進(jìn)一

ｎ－１??？?一?Ｕ??—？?＇Ｎｅｇａｔｉｖｅ??＿｜４ｎ?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ??—ｉ—?Ｎｅｇａｔｉｖｅ－ｃｅｎｓｏｒｅｄ??ｑ?ｇ－?—｜Ｐｏｓｉｔｉｖｅ－ｃｅｎｓｏｒｅｄ??＾?Ｐ?二?０．３６５??■§?＿?￣？￣＇￣—??匕?０．６－??＞??＞??ｗ?０．４－??１??ａｉ??＞??Ｏ??０．２－??ｏ．ｏ－??Ｉ?ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２０?４０?６０?８０??Ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｔｉｍｅ?（ｍｏｎｔｈｓ）??圖２?Ｆａｓｃｉｎ－１表達(dá)與下咽癌患者預(yù)后關(guān)系采用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ法統(tǒng)計分析??ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌組織的表達(dá)與下咽癌患者３年生存率的關(guān)系，結(jié)果顯示??Ｐ＝０．?３６５，兩者無明顯相關(guān)。??２．?Ｆａｓｃｉｎ－１表達(dá)變化對下咽癌ＦａＤｕ細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響??２．１轉(zhuǎn)染ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮＡ或質(zhì)粒ＧＶ１４４－ｆａｓｃｉｎ－ｌ可下調(diào)或上調(diào)下咽癌ＦａＤｕ細(xì)??胞中ｆａｓｃｉｎ－１的表達(dá)??為了進(jìn)一步研究ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用，我們利用??ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮＡ?和?ｆａｓｃｉｎ－１?質(zhì)粒（ＧＶ１４４－ｆａｓｃｉｎ－ｌ）轉(zhuǎn)染下咽癌?ＦａＤｕ?細(xì)胞，??分別沉默和過表達(dá)ｆａｓｃｉｎ－１，并應(yīng)用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測轉(zhuǎn)染效率。為了驗證轉(zhuǎn)??染效率，通過設(shè)置２４?ｈ、４８?ｈ和７２?ｈ三個時間梯度，應(yīng)用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測??ｆａｓｃｉｎ－１蛋白在轉(zhuǎn)染ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮＡ或ＧＶ１４４－ｆａｓｃｉｎ－ｌ的下咽癌ＦａＤｕ細(xì)胞中??表達(dá)變化。結(jié)果如圖３Ａ所示：在轉(zhuǎn)染ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Fascin promotes the motility and invasiveness of pancreatic cancer cells[J]. Yan-Feng Xu, Shuang-Ni Yu, Zhao-Hui Lu, Jian-Ping Liu, Jie Chen, Department of Pathology, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Tsinghua University, Beijing 100730, China.  World Journal of Gastroenterology. 2011(40)



本文編號：2979169