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人β-防御素3在炎癥刺激下ApoE -/- 小鼠血管壁損傷中的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-26 07:30
  目的:探究人β-防御素3(human β-defensin 3,hBD3)在牙齦卟啉單胞菌內(nèi)毒素(Porphyromonasgingivalislipopolysaccharide,Pg-LPS)血癥產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)和促動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)病變中的作用;研究hBD3在Pg-LPS促巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用;探索hBD3在AS病變最初階段血管內(nèi)皮細(xì)胞活化的影響。方法:1.hBD3對Pg-LPS內(nèi)毒素血癥炎癥水平和促AS中的作用:體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,使用32只ApoE基因敲除(ApoE-/-小鼠,構(gòu)建慢性Pg-LPS內(nèi)毒素血癥模型,隨機(jī)分為4組,即NC組、Pg-LPS組、Pg-LPS+hBD3組、hBD3組。在到達(dá)實(shí)驗(yàn)節(jié)點(diǎn)時(shí),首先取小鼠全血,測血常規(guī);隨后,對小鼠進(jìn)行安樂死,取小鼠血清及主動脈壁組織進(jìn)行ELISA和定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)檢測;油紅O染色、免疫組化染色、彈力纖維染色等組織病理學(xué)方法觀察hBD3干預(yù)對AS病變形成的影響。2.hBD3對Pg-LPS刺激下巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的... 

【文章來源】:南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:126 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

人β-防御素3在炎癥刺激下ApoE -/- 小鼠血管壁損傷中的作用研究


圖1-1?p-防御素3的結(jié)構(gòu)示意圖

炎癥,附分,主動脈組織,引物二聚體


compared?wi化化e?NC?group.?**p?<?0.01,***p?<?0.001?compared?wi化化e?Pg-LPS?group.??2丄3.3?hBD3和Pg-LPS對ApoE-M、鼠血管壁描附分子表達(dá)的影響??小鼠主動脈組織進(jìn)行定量PC民檢測,如圖2-3可見,主動脈組織中的??ICAM-1和VCAM-1均能被檢測到,且擴(kuò)増曲線示樣本均擴(kuò)增良好,溶解曲線??形成單峰,表明沒有引物二聚體形成。擴(kuò)增結(jié)果如圖2-4所示,主動脈姐織中??ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)均受Pg-LPS刺激而盈著升高,hBD3干預(yù)后,兩者??表達(dá)水平均明蟲下調(diào),變化趨勢與血清中sICAM-1的表達(dá)相同。??第巧頁??

主動脈組織,胸主動脈,數(shù)據(jù)表示,腹主動脈


Tertperature?(*C)?Temperature?(*C)??圖2-3小鼠主動脈組織ICAM-1、VCAM-IQ-PCR的擴(kuò)增曲線和溶解曲線。??Figui'e?2-3?The?amplification?plot?and?melt?curve?plot?〇nCAM-l?and?VCAM-1?in?aortic?tissues??of?ApoE-/-?mice.??A?B??S'!?##?25#??ill::?^?i?平??竿?i?^?1.0-?了??>?"ILLBLi___??NO?Pg-LPS?PgIpS.hBD3?h8D3?NC?Pg4.PS?Pg-LPS+hBD3?hBD3??圖2-4?hBD3對Pg-LPS刺激下主動脈組織中ICAM-1和VCAM-1表達(dá)的影響。從胸主動脈??和腹主動脈中提取總RNA,用實(shí)時(shí)定量PCR的方法檢測mRNA水平。數(shù)據(jù)表示為均值+??第36頁??


本文編號:2939290

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