背景:小檗堿（Berberine,BBR）是一種從天然藥物中提取的異喹啉類生物堿,常用于胃腸道疾病的治療。近年的研究證實其可通過增加LDL-C受體的表達(dá),激活A(yù)MP激酶和阻斷MAPK/ERK通路來降低低密度脂蛋白和甘油三脂的水平。他汀類藥物主要通過抑制甲羥戊酸的合成,減少膽固醇在肝臟的合成而降低低密度脂蛋白水平,是臨床常用的調(diào)血脂藥�；贐BR與他汀類藥物調(diào)血脂作用機(jī)制的不同,臨床上常將BBR與他汀類藥聯(lián)合應(yīng)用于高脂血癥的治療。但有報道他汀類藥物引發(fā)的橫紋肌溶解副作用,60%是因聯(lián)合用藥改變代謝或轉(zhuǎn)運(yùn)特性所致,故而BBR對藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的影響備受學(xué)者關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn),BBR及其（40）相代謝產(chǎn)物小檗紅堿（Berberrubine,BRB）、去亞甲基小檗堿（Demethylene berberine,DBB）在肝臟中濃度遠(yuǎn)高于血漿中濃度,且可影響藥物的代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體功能,然BBR與他汀類藥物聯(lián)合應(yīng)用后,是否因其對藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的作用導(dǎo)致藥物相互作用的發(fā)生尚屬未知,確應(yīng)系統(tǒng)探究。值得一提的是,諸多研究表明,核受體在調(diào)控藥物代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的靶基因方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,BBR亦通過激... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：158 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 小檗堿、小檗紅堿和去亞甲基小檗堿對HepG2 細(xì)胞中CYP1A2、3A4、2B6 表達(dá)的影響
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 主要藥品
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 主要工作液的配置
        2.2.2 HepG2 細(xì)胞培養(yǎng)及生長曲線繪制
        2.2.3 BBR、BRB、DBB、RIF、PHE、OME對 HepG2 細(xì)胞的毒性實驗
        2.2.4 細(xì)胞中蛋白濃度的測定
        2.2.5 BBR、BRB、DBB對 Hep G2 細(xì)胞中CYP1A2、3A4、2B6 mRNA表達(dá)的影響
        2.2.6 BBR和 BRB對 Hep G2 細(xì)胞中CYP1A2、CYP3A4 蛋白表達(dá)的影響[51]
        2.2.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)及其生長曲線的繪制
        2.3.2 BBR、BRB、DBB、RIF、PHE、OME對 HepG2 細(xì)胞的毒性實驗
        2.3.3 細(xì)胞中蛋白濃度的測定
        2.3.4 RT-qPCR引物及擴(kuò)增產(chǎn)物特異性
        2.3.5 BBR、BRB和 DBB對 HepG2 細(xì)胞中CYP1A2、3A4、2B6mRNA表達(dá)的影響
        2.3.6 BBR和 BRB對 HepG2 細(xì)胞中CYP1A2、3A4 蛋白表達(dá)的影響
    2.4 討論
第3章 小檗堿和小檗紅堿對HepG2 細(xì)胞代謝非那西汀、咪達(dá)唑侖和阿托伐他汀的影響
    3.1 材料
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 主要藥品
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器和設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 主要工作液的配制
        3.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2.3 HepG2 細(xì)胞樣品中非那西汀、咪達(dá)唑侖、阿托伐他汀濃度測定
        3.2.4 BBR、BRB對 HepG2 細(xì)胞代謝PHE、MDZ和 ATV的影響
        3.2.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 細(xì)胞樣品中PHE、MDZ、ATV濃度測定的方法學(xué)評價結(jié)果
        3.3.2 BBR、BRB對 HepG2 細(xì)胞代謝PHE、MDZ和 ATV的影響
    3.4 討論
第4章 小檗堿、小檗紅堿和去亞甲基小檗堿對HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的影響
    4.1 材料
        4.1.1 細(xì)胞株
        4.1.2 主要藥品
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 主要儀器設(shè)備
    4.2 方法
        4.2.1 主要工作液的配置
        4.2.2 HepG2 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2.3 細(xì)胞中蛋白濃度的測定
        4.2.4 BBR及 BRB、DBB對 HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 mRNA表達(dá)的影響
        4.2.5 BBR及 BRB、DBB對 HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)的影響
        4.2.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 細(xì)胞樣品中蛋白濃度的測定
        4.3.2 RT-qPCR引物及擴(kuò)增產(chǎn)物特異性
        4.3.3 BBR及 BRB、DBB對 HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 mRNA表達(dá)的影響
        4.3.4 BBR、BRB和 DBB對 HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)的影響
    4.4 討論
第5章 小檗堿、小檗紅堿對HepG2 細(xì)胞攝取阿托伐他汀和瑞舒伐他汀的影響
    5.1 材料
        5.1.1 細(xì)胞株
        5.1.2 主要藥品
        5.1.3 主要試劑
        5.1.4 主要儀器和設(shè)備
    5.2 方法
        5.2.1 主要工作液的配制
        5.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        5.2.3 細(xì)胞中蛋白濃度的測定
        5.2.4 HepG2 細(xì)胞樣品中RSV、ATV濃度測定方法的建立
        5.2.5 ATV和 RSV在 HepG2 細(xì)胞中攝取條件的優(yōu)化
        5.2.6 BBR、BRB對 HepG2 細(xì)胞攝取ATV和 RSV的影響
        5.2.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 細(xì)胞樣品中RSV、ATV濃度測定的方法學(xué)部分驗證結(jié)果
        5.3.2 ATV和 RSV在 HepG2 細(xì)胞中攝取條件的優(yōu)化結(jié)果
        5.3.3 BBR、BRB對 HepG2 細(xì)胞攝取ATV和 RSV的影響
    5.4 討論
第6章 小檗堿對阿托伐他汀鈣、瑞舒伐他汀鈣在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)影響
    6.1 材料
        6.1.1 實驗動物
        6.1.2 主要藥品與試劑
        6.1.3 主要儀器
    6.2 方法
        6.2.1 主要溶液的配制
        6.2.2 大鼠血漿中RSV、ATV濃度測定的LC-MS/MS方法建立
        6.2.3 長期給予BBR對 ATV在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響研究
        6.2.4 長期給予BBR對 RSV在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響研究
    6.3 結(jié)果
        6.3.1 LC-MS/MS法測定大鼠血漿中ATV、RSV濃度的方法學(xué)驗證
        6.3.2 長期給予BBR對 ATV在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響
        6.3.3 BBR對 RSV在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響
    6.4 討論
第7章 基于核受體AhR和 PXR研究小檗堿和小檗紅堿對CYP1A2和CYP3A4 表達(dá)的影響
    7.1 材料
        7.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        7.1.2 主要藥品
        7.1.3 主要試劑
        7.1.4 主要儀器設(shè)備
    7.2 方法
        7.2.1 主要溶液的配制
        7.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        7.2.3 質(zhì)粒的構(gòu)建及提取
        7.2.4 質(zhì)粒瞬時共轉(zhuǎn)染
        7.2.5雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br>        7.2.6 細(xì)胞蛋白的提取
        7.2.7 基于AhR、PXR探究BBR及 BRB對 CYP1A2和CYP3A4 報告基因活性的影響
        7.2.8 沉默AhR、PXR對 BBR及 BRB調(diào)控CYP1A2和CYP3A4 蛋白的影響
        7.2.9 BBR及 BRB對核受體AhR、PXR胞核蛋白表達(dá)的影響
        7.2.10 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    7.3 結(jié)果
        7.3.1 基于AhR、PXR探究BBR及 BRB對 CYP1A2和CYP3A4 報告基因活性的影響
        7.3.2 沉默AhR、PXR對 BBR及 BRB調(diào)控CYP1A2和CYP3A4 蛋白的影響
        7.3.3 BBR及 BRB對核受體AhR、PXR胞核蛋白表達(dá)的影響
    7.4 討論
第8章 基于RXRα研究小檗堿及小檗紅堿對OATP1B1 表達(dá)的影響
    8.1 材料
        8.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        8.1.2 主要藥品
        8.1.3 主要試劑
        8.1.4 主要儀器設(shè)備
    8.2 方法
        8.2.1 主要溶液的配制
        8.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        8.2.3 質(zhì)粒的構(gòu)建及提取
        8.2.4 質(zhì)粒瞬時共轉(zhuǎn)染
        8.2.5雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br>        8.2.6 細(xì)胞蛋白的提取
        8.2.7 基于RXRα研究BBR及 BRB對 OATP1B1 報告基因活性的影響
        8.2.8 分別沉默F(xiàn)XR、LXRα 和RXRα 對BBR及BRB調(diào)控OATP1B1 蛋白表達(dá)的影響
        8.2.9 BBR及BRB對FXR、LXRα 和RXRα 胞核蛋白表達(dá)的影響
        8.2.10 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    8.3 結(jié)果
        8.3.1 基于RXRα 研究BBR及BRB對OATP1B1 報告基因活性的影響
        8.3.2 分別沉默F(xiàn)XR、LXRα 和RXRα 對BBR及BRB調(diào)控OATP1B1 影響
        8.3.3 BBR及BRB對FXR、LXRα 和RXRα 胞核蛋白表達(dá)的影響
    8.4 討論
第9章 結(jié)論與展望
    9.1 結(jié)論
    9.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：2907723