本文關(guān)鍵詞：中藥“十八反”：白芍、丹參與藜蘆配伍相互作用及藥理作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：中醫(yī)藥是我國的傳統(tǒng)文化瑰寶,歷史悠久。中藥“十八反”是中藥藥性理論的重要組成部分,傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論認為“十八反”中相反的藥物配伍使用時會導(dǎo)致毒副作用增加或藥效降低,屬于中藥配伍禁忌的范疇。藜蘆(Veratrum nigrum L)與白芍(Radix Paeoniae Alba.)為相反的藥對之一,因此,在數(shù)千年的用藥過程中被禁止合用。然而,歷代醫(yī)家亦有用其治療疾病,安全有效未見毒性反應(yīng)者,部分學(xué)者認為“十八反”藥物配伍合用仍可治療一些疾病。因此本文通過探索中藥“十八反”中藜蘆-白芍配伍使用對動物毒性的影響及其與物質(zhì)基礎(chǔ)的相關(guān)性,試圖揭示藜蘆-白芍配伍后增毒、減效的禁忌條件及化學(xué)本質(zhì),試圖說明其產(chǎn)生毒性作用的機制,明確組成—劑量—物質(zhì)—毒效的關(guān)聯(lián)性。通過小鼠急性毒性實驗,我們得到了藜蘆的毒性劑量(LD50)為2.566g/kg,并且發(fā)現(xiàn)當(dāng)藜蘆：白芍在8：1、1：1比例配伍時,合煎液毒性增加。通過UPLC-TOF-MS技術(shù)以及Masslynx軟件分析各組物質(zhì)成分變化,結(jié)果顯示：藜蘆用量均相同,但合煎液中藜蘆主要生物堿成分含量卻發(fā)生明顯改變,藜蘆主要生物堿溶出變化趨勢與急性毒性實驗中小鼠死亡率趨勢呈現(xiàn)出高度正向相關(guān)性。當(dāng)白芍劑量小于或相當(dāng)于藜蘆劑量的配比時,白芍可增加藜蘆主要成分的溶出,從而致毒、增毒；當(dāng)白芍劑量高于藜蘆劑量時,白芍則抑制藜蘆主要生物堿的溶出,在藜蘆-白芍1：1合煎的配伍組合條件下,白芍-藜蘆合煎液的致毒、增毒作用最為顯著。丹參(Salvia miltiorrhiza radix)作為“十八反”中的一個重要的常用中藥,在世界范圍內(nèi)被用于治療心血管疾病、代謝性疾病、肝炎、炎癥性腸病等。丹參酮ⅡA是唇形科植物丹參中的主要天然活性成分之一,因其顯著的藥理活性而廣泛應(yīng)用于臨床實踐,市場上已經(jīng)有丹參提取物制作的的各種劑型藥品,主要的藥理作用有：具有抗炎、抗高血壓、抗動脈粥樣硬化等作用。細胞色素P450廣泛參與藥物代謝及機體的生理病理過程,并且可產(chǎn)生藥物間相互作用,而PXR作為P450酶的重要轉(zhuǎn)錄調(diào)控子,具有重要的生理病理學(xué)意義。因此我們研究丹參酮ⅡA與PXR的相關(guān)性,旨在揭示丹參酮ⅡA產(chǎn)生藥物之間相互作用的機制。利用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PXR-CYP3A報告基因的HepG2工程細胞株,對“十八反”中藥物主要成分進行篩選,發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA具有顯著的PXR-CYP3A4誘導(dǎo)能力,且在20μM,48 h最為顯著。利用HepG2細胞和LS174T細胞,采用EMSA, qRT-PCR, Western blot等分子生物學(xué)技術(shù),結(jié)合在體內(nèi)外實驗,我們探討以下三個科學(xué)問題：1：丹參酮ⅡA誘導(dǎo)CYP3A是否由PXR介導(dǎo),即丹參酮ⅡA是否為PXR激動劑;2：丹參酮ⅡA治療代謝性疾病,對LCA誘導(dǎo)的膽汁淤積型肝損傷治療作用是否有PXR的參與；3：丹參酮ⅡA作為PXR的激動劑,是否可產(chǎn)生治療ⅠBD的作用。體外實驗初步探索丹參主要效應(yīng)成分丹參酮ⅡA對PXR靶點的誘導(dǎo)機制。實驗表明,丹參酮ⅡA可劑量依賴性的誘導(dǎo)PXR、CYP3A4的表達,誘導(dǎo)效應(yīng)始于PXR與CYP3A4調(diào)控區(qū)的結(jié)合階段,且對CYP3A4的激活作用是通過PXR介導(dǎo)的。石膽酸LCA為二級膽汁酸,可因在體內(nèi)的蓄積而引起膽汁淤積型肝損傷,。研究顯示,在生理狀態(tài)下,LCA可通過激活PXR而誘導(dǎo)CYP3A的表達,加速LCA轉(zhuǎn)化為親水的羥基化的LCA,促進其排出體外,減少由于膽汁淤積造成的肝損傷,維持機體穩(wěn)態(tài)。實驗通過動物病理模型,丹參酮ⅡA可濃度依賴性防治LCA引起的膽汁淤積型肝損傷,結(jié)合PXR低表達小鼠實驗得出結(jié)論,丹參酮ⅡA防治LCA引起膽汁淤積型肝損傷可能部分通過上調(diào)PXR及Cyp3a11,Cyp3a13和MDR1α的表達,從而增加對LCA的代謝,產(chǎn)生肝臟保護作用。此外,古方就有丹參治療結(jié)腸炎的記載,現(xiàn)代研究也報道了丹參酮ⅡA對結(jié)腸炎的治療作用,目前,PXR作為結(jié)腸炎的一個最新治療靶點,已得到了廣泛的關(guān)注。我們通過實驗發(fā)現(xiàn),丹參酮ⅡA治療ⅠBD與炎癥機制和PXR靶點相關(guān),動物實驗及PXR沉默小鼠實驗表明,給予丹參酮ⅡA后,PXR低表達小鼠對DSS誘發(fā)的小鼠ⅠBD治療效果顯著低于野生型小鼠。丹參酮ⅡA對DSS誘發(fā)的ⅠBD治療作用,部分是由PXR介導(dǎo)的上調(diào)代謝酶和下調(diào)炎癥介質(zhì)介導(dǎo)的。實驗證明了丹參酮ⅡA通過調(diào)控PXR,可預(yù)防及治療LCA所致的膽汁淤積型肝損傷以及對DSS誘導(dǎo)的小鼠IBD,證明了PXR在丹參酮ⅡA在肝保護和IBD治療中具有的重要作用。我們的新的發(fā)現(xiàn)有助于丹參酮ⅡA及其衍生物作為PXR配體在人類IBD的治療中的潛在作用。本課題創(chuàng)造性的將配伍化學(xué)成分改變與毒性變化進行關(guān)聯(lián),挖掘與毒性密切相關(guān)的貢獻成分及其變化,屬方法學(xué)創(chuàng)新。挖掘出對毒性貢獻大的毒性生物堿可能是藜蘆與反藥特定比例配伍后毒性增強主要化學(xué)標(biāo)志物。課題還將將基于藥物相互作用的篩選體系運用到中藥配伍相互作用中,對配伍藥物單體成分篩選,間接反映其是否具有CYP3A的誘導(dǎo)特性,是對中藥毒性研究領(lǐng)域的拓展。此外,PXR在毒理學(xué)領(lǐng)域特別是藥物相互作用具有重要作用外,在機體內(nèi)源性物質(zhì)代謝以及維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)具有重要作用,本研究拓展了PXR受體藥理學(xué)研究,有助于發(fā)現(xiàn)更多的具有PXR激活特性和藥理活性的天然產(chǎn)物。
【關(guān)鍵詞】：十八反 藜蘆 白芍 丹參酮ⅡA 急性毒性 UPLC-TOF-MS 孕烷X受體 炎性腸病 葡聚糖硫酸鈉 石膽酸 膽汁淤積型肝損傷
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-15
• 第一部分 中藥“十八反”:與藜蘆配伍白芍的毒性特征與機理研究15-43
• 第一節(jié)：藜蘆、白芍單煎液急性毒性實驗17-27
• 1. 實驗材料17-18
• 2. 實驗方法18-21
• 3. 實驗結(jié)果21-26
• 4 討論26-27
• 第二節(jié)：藜蘆配伍白芍的毒性特征與機理研究27-43
• 1. 實驗材料27-28
• 2. 實驗方法28-31
• 3. 實驗結(jié)果31-41
• 4 討論41-43
• 第二部分：丹參與藜蘆配伍相互作用及藥理作用研究43-98
• 第一節(jié)：丹參酮ⅡA對石膽酸所致小鼠膽汁淤積型肝損傷的保護作用45-71
• 1 實驗材料48-50
• 2 實驗方法50-56
• 3 實驗結(jié)果56-69
• 4 討論69-71
• 第二節(jié)：丹參酮ⅡA對DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎的治療作用療效觀察71-98
• 1. 實驗材料74
• 2. 實驗方法74-78
• 3 實驗結(jié)果78-96
• 4 討論96-98
• 參考文獻98-111
• 致謝111-113
• 個人簡介113-115
• 綜述 淺析中藥“十八反”中“諸參辛芍叛藜蘆”配伍禁忌115-124
• 參考文獻119-124
• 附錄：論著124-125
• 附件125-172

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王宇光;王升啟;高月;;PXR受體調(diào)控的CYP3A誘導(dǎo)及其在藥物代謝中的重要意義[J];藥學(xué)學(xué)報;2006年01期

2 范欣生;尚爾鑫;陶靜;華浩明;楊環(huán);段金廒;;“十八反”同方配伍探討[J];中醫(yī)雜志;2011年12期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李國棟;藜蘆生物堿降壓作用及其作用機制的實驗研究[D];延邊大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：中藥“十八反”：白芍、丹參與藜蘆配伍相互作用及藥理作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：281554