發(fā)布時(shí)間：2017-03-26 11:15

  本文關(guān)鍵詞：順鉑誘導(dǎo)HBV再激活和肝細(xì)胞損傷的分子機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：乙型病毒性肝炎是一種嚴(yán)重威脅人類健康的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題,據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道,全世界約20億人曾感染過(guò)HBV,其中近4億成為HBsAg性的慢性攜帶者,而其中的3/4是來(lái)源于中國(guó)；全球每年因HBV感染所致死的近100萬(wàn),其中約半數(shù)在中國(guó)。同時(shí)據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì),癌癥是目前人類最主要的死亡原因之一；而這些腫瘤患者合并有HBV感染的數(shù)目也極其龐大,當(dāng)這些患者在接受化療或免疫抑制劑治療時(shí),其中部分患者會(huì)發(fā)生HBV再激活的現(xiàn)象,大量瞬時(shí)活化的HBV則可能導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)嚴(yán)重的肝功能損傷甚至是肝衰竭,從而引起治療減緩或是中斷,繼而耽誤腫瘤患者的有效治療,必將嚴(yán)重影響其預(yù)后甚至是危及其生命。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外已有多項(xiàng)臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)順鉑等化療藥物可以誘導(dǎo)HBV再激活,從而引起HBV復(fù)制增強(qiáng),同時(shí)伴隨急性肝功能損傷或肝衰竭的危象,導(dǎo)致病死率急劇上升。但是順鉑誘導(dǎo)HBV再激活的分子機(jī)制至今仍不清楚。本研究中,我們首先在體外成功構(gòu)建了基于環(huán)化自連的HBV DNA (circularized HBV DNA)感染的細(xì)胞和動(dòng)物模型,并通過(guò)與線性HBV DNA感染模型比較,發(fā)現(xiàn)circularized HBV DNA的感染效率和復(fù)制水平明顯優(yōu)于線性的HBV DNA (P0.05),由于circularized HBV DNA在結(jié)構(gòu)上完全等同于HBV cccDNA,因而在沒(méi)有外源載體DNA的干擾下,可以更加真實(shí)地反應(yīng)HBV感染的基本病理生理過(guò)程；進(jìn)而為下一步的實(shí)驗(yàn)研究及HBV慢性持續(xù)感染的機(jī)制和抗病毒的治療提供強(qiáng)有力的依據(jù)。其次,我們分別在體內(nèi)和體外證實(shí)：順鉑一方面可以通過(guò)直接上調(diào)HBV復(fù)制相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PGC-1α和HNF-4α的表達(dá),從而增強(qiáng)HBV核心啟動(dòng)子活性,繼而在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)HBV的復(fù)制；另一方面可以直接上調(diào)HBV cccDN A的表達(dá),從而導(dǎo)致HBV D NA水平顯著增加。最后,我們通過(guò)RT-PCR、Western-blot、BrdU、siRNA和流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)證實(shí),DDP誘導(dǎo)HBV再激活致肝細(xì)胞損傷的分子機(jī)制主要通過(guò)以下兩個(gè)途徑來(lái)完成：其一,順鉑可以直接誘導(dǎo)肝細(xì)胞氧化應(yīng)激(ROS水平上調(diào)),并抑制其細(xì)胞的增殖從而阻滯于S期；高氧化狀態(tài)下的內(nèi)環(huán)境導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,從而引發(fā)未折疊蛋白反應(yīng),當(dāng)UPR超載時(shí),誘發(fā)細(xì)胞凋亡,參與急性肝細(xì)胞損傷甚至肝功能衰竭的病理生理過(guò)程；其二,順鉑顯著上調(diào)細(xì)胞Alix蛋白表達(dá),并增加HBV核心顆粒的直接釋放,顯著增加的HBcAg有可能作為一種強(qiáng)免疫原,從而激發(fā)機(jī)體發(fā)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng),繼而導(dǎo)致急性肝細(xì)胞損傷及肝衰竭；同時(shí)姜黃素和NAC可以成功規(guī)避在臨床上由順鉑所引發(fā)的HBV再激活的風(fēng)險(xiǎn),因此可將姜黃素和NAC作為阻斷其關(guān)鍵靶點(diǎn)的潛在靶向性藥物。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),順鉑誘導(dǎo)HBV再激活的主要機(jī)制為：順鉑通過(guò)直接上調(diào)HBVcccDNA、PGC-1α和HNF-4α的表達(dá),從而引起HBV的復(fù)制水平顯著增加,同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及ROS的產(chǎn)生和病毒核心顆粒的直接釋放,參與了患者急性肝細(xì)胞損傷及肝衰竭的病理生理過(guò)程,該研究有望為全面解析臨床HBV再激活奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：乙型肝炎病毒 病毒復(fù)制 核心顆粒 再激活 順鉑
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R512.62
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-17
• 第一部分 采用環(huán)化自連的HBV DNA構(gòu)建HBV水動(dòng)力小鼠模型17-65
• 1 材料與方法18-50
• 2 結(jié)果50-61
• 3 討論61-65
• 第二部分 順鉑誘導(dǎo)HBV再激活的分子機(jī)制研究65-105
• 1 材料與方法65-85
• 2 結(jié)果85-99
• 3 討論99-105
• 第三部分 順鉑誘導(dǎo)HBV再激活致肝細(xì)胞損傷的分子機(jī)制研究105-136
• 1 材料與方法105-113
• 2 結(jié)果113-125
• 3 討論125-136
• 全文總結(jié)136-138
• 參考文獻(xiàn)138-149
• 文獻(xiàn)綜述149-161
• 參考文獻(xiàn)154-161
• 致謝161-162
• 攻讀博士學(xué)位期間參加的會(huì)議162-163
• 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文163

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Establishment and primary application of a mouse model with hepatitis B virus replication[J];World Journal of Gastroenterology;2007年40期

  本文關(guān)鍵詞：順鉑誘導(dǎo)HBV再激活和肝細(xì)胞損傷的分子機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：268731