本文關(guān)鍵詞：陰陽互根理論在腎虛證中的臨床應(yīng)用及機(jī)制探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[研究背景與研究目的]陰陽學(xué)說是中醫(yī)學(xué)理論的基石和源頭,然而迄今為止其科學(xué)內(nèi)涵尚未完全闡述明確。《素問·陰陽應(yīng)象大論》說：“陰陽者,天地之道也,萬物之綱紀(jì),變化之父母,生殺之本始,神明之府也,治病必求于本�！敝赋鲫庩柕膶�(duì)立統(tǒng)一運(yùn)動(dòng)是萬事萬物之本源,世界上一切事物發(fā)生、發(fā)展、變化及消亡的根本原因。王冰注《素問·生氣通天論》曰：“陽氣根于陰,陰氣根于陽,無陰則陽無以生,無陽則陰無以化�！币馑际钦f陰陽不僅有對(duì)立的關(guān)系,還具有統(tǒng)一的關(guān)系,即相互依存、相互資生的關(guān)系,這就是陰陽的“互根互用”理論。陰陽互根互用理論是陰陽學(xué)說的重要組成部分,在此基礎(chǔ)上,明代張景岳提出了著名的“善補(bǔ)陽者必于陰中求陽,則陽得陰助而生化無窮；善補(bǔ)陰者必于陽中求陰,則陰得陽升而化源不竭”——即“陰中求陽,陽中求陽”的治療方法,同時(shí)創(chuàng)制出“陰中求陽”之右歸丸治療腎陽虛證、“陽中求陰”之左歸丸治療腎陰虛證,具有重大理論與臨床意義,是陰陽互根互用理論在調(diào)理腎中陰陽臨床實(shí)踐上的具體應(yīng)用,但是目前腎中陰陽互根互用的機(jī)制尚未完全闡明。陰陽學(xué)說的現(xiàn)代研究中最受關(guān)注的是美國(guó)生物學(xué)家Glodberg于1975首次提出的環(huán)磷酸腺苷(cAMP)與環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)的陰陽假說。隨后國(guó)際上Cell、 Science、Nat Cell Biol、Nat Rev Rheumatol、Proc Natl Acad Sci USA 以及 Circ Res等一系列著名的科學(xué)雜志都陸續(xù)刊登了應(yīng)用陰陽概念探討概念來探討免疫與炎癥、氧化與抗氧化、蛋白磷酸化信號(hào)傳導(dǎo)通路、核轉(zhuǎn)錄因子(Yin-Yang1、E2F-1、 MeCP2)抑制與激活等細(xì)胞內(nèi)的諸多事件。這些結(jié)果在細(xì)胞水平上表明了陰陽學(xué)說的普適性與科學(xué)性。國(guó)內(nèi)外既往研究中關(guān)于功能拮抗性的物質(zhì)與陰陽對(duì)立制約的關(guān)系的報(bào)道較多,但鮮有關(guān)于陰陽互根互用方面的現(xiàn)代研究。中醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)理論從古至今傳為經(jīng)典,主要在于反復(fù)運(yùn)用有效,可以經(jīng)得起臨床的考驗(yàn)。因此,將中醫(yī)學(xué)理論活學(xué)活用,通過臨床的實(shí)踐觀察,并結(jié)合現(xiàn)代研究方法,從療效、基因、免疫等多角度、全方位去探討及闡明中醫(yī)基礎(chǔ)理論的機(jī)制,是當(dāng)今中醫(yī)研究學(xué)者應(yīng)該走的道路。中醫(yī)“證”是疾病發(fā)生過程中不同階段病因病機(jī)的高度概括,由于同一證有其共同的臨床表達(dá)和病理機(jī)制,那么我們可以推斷其肯定有著共同的物質(zhì)基礎(chǔ)。而生命的中心法則認(rèn)為基因型(DNA或基因)處于最原始和本質(zhì)的地位,腎所藏之精稟受于父母,是構(gòu)成胚胎發(fā)育的原始物質(zhì),與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的遺傳物質(zhì)DNA具有同一性。本課題組在前期的腎陰虛證相關(guān)基因、腎陰虛證和腎陽虛證基因表達(dá)譜的比較研究中,通過西醫(yī)的辨病與中醫(yī)的辨證相結(jié)合,從慢性腎炎、糖尿病腎病、狼瘡性腎炎以及亞健康狀態(tài)等的腎虛證入手,提取外周血白細(xì)胞RNA和DNA,應(yīng)用基因芯片、抑制性消減雜交(SSH)、基因多態(tài)性分析和基因克隆等技術(shù)和方法,系統(tǒng)地開展了腎陰虛證、腎陽虛證的相關(guān)基因研究,成功地構(gòu)建了腎陰虛證的cDNA文庫,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同病種腎陰虛證的消減文庫中存在明顯差異；腎陰虛證組和正常對(duì)照組間存在79條差異表達(dá)基因；腎陽虛證組和正常對(duì)照組間存在75條差異表達(dá)基因；腎陰虛證和腎陽虛證與正常對(duì)照比較存在9條共同差異表達(dá)基因。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),腎陰虛證、腎陽虛證具有各自不同的基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò),提示腎中陰陽有不同的物質(zhì)基礎(chǔ),使其表現(xiàn)為對(duì)立制約的關(guān)系；然而它們又有共同的基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò),提示腎中陰陽有共同的物質(zhì)基礎(chǔ),使其表現(xiàn)為互根互用的關(guān)系。因此,從基因組學(xué)方面深入探討腎虛證的分子機(jī)制對(duì)于闡明腎虛證的本質(zhì)有著至關(guān)重要的意義,可能是闡明腎中陰陽互根理論的重要突破口之一。綜上所述,本研究擬在前期研究工作的基礎(chǔ)上,將具有濃郁中醫(yī)特色的“陰中求陽、陽中求陰”臨床拆方治療及現(xiàn)代指標(biāo)觀察相結(jié)合的途徑,通過對(duì)腎虛證患者服藥前后的臨床觀察,熒光定量PCR監(jiān)測(cè)腎陰虛證與腎陽虛證的共同差異表達(dá)基因,免疫功能測(cè)試等,開展對(duì)腎陰虛證和腎陽虛證的相關(guān)研究,以進(jìn)一步驗(yàn)證陰陽的互根互用理論,利用現(xiàn)代技術(shù),探尋腎虛證的本質(zhì),闡述其作用機(jī)制,為中醫(yī)證候研究提供科學(xué)依據(jù)。[方法](1)系統(tǒng)回顧與總結(jié)腎中陰陽互根的中醫(yī)理論及中西醫(yī)治療腎陰虛、腎陽虛證的現(xiàn)狀；(2)采用“病證結(jié)合”方法,選取慢性腎小球腎炎及糖尿病的腎陰虛證、腎陽虛證患者以及選擇性別、年齡等人口學(xué)資料相似的健康的正常人共同作為研究對(duì)象。按照“陰中求陽、陽中求陰”的治療方法,對(duì)相應(yīng)的中藥復(fù)方(左歸丸、右歸丸)進(jìn)行拆方研究：將腎陰虛證患者隨機(jī)分為陽中求陰(即左歸丸)治療組和滋補(bǔ)腎陰(即左歸丸之滋腎陰中藥復(fù)方)治療組；將腎陽虛證患者隨機(jī)分為陰中求陽(即右歸丸)治療組、溫補(bǔ)腎陽(即右歸丸之溫腎陽中藥復(fù)方)治療組,觀察給藥前后相應(yīng)的臨床指標(biāo)變化。(3)通過對(duì)左歸丸、左歸丸中滋腎陰中藥、右歸丸,右歸丸中溫腎陽中藥及健康對(duì)照組服藥前后淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),NK細(xì)胞活性測(cè)定,外周血白細(xì)胞、血清抗體、補(bǔ)體及淋巴細(xì)胞亞群觀察等進(jìn)行觀察,對(duì)實(shí)驗(yàn)各組進(jìn)行相關(guān)免疫分析。(4)收集不同組治療前后外周血白細(xì)胞總RNA,制備樣品,利用熒光定量PCR技術(shù)觀察腎陰虛證、腎陽虛證與正常人服藥前后白細(xì)胞的特定基因表達(dá)變化,通過統(tǒng)計(jì)軟件,對(duì)左歸丸、右歸丸治療作用相關(guān)的基因表達(dá)的變化進(jìn)行分析。[結(jié)果]1.系統(tǒng)回顧與總結(jié)了腎中陰陽互根的中醫(yī)理論基礎(chǔ)；2.臨床觀察結(jié)果：(1)將腎陰虛證患者隨機(jī)分為陽中求陰(即左歸丸)治療組、滋補(bǔ)腎陰(即左歸丸之滋腎陰中藥復(fù)方)治療組進(jìn)行臨床觀察：①主要臨床癥狀及舌象脈象觀察：60例腎陰虛證的主要臨床癥狀依次是：手足心熱52例(占86.7%)、腰部酸痛33例(占55%)、腿膝酸軟46例(占76.7%)、五心煩熱43例(占71.7%)、潮熱35例(占58.3%)、盜汗28例(占46.7%)、咽喉干燥23例(占38.3%)、失眠15例(占25%)、耳鳴18例(占60%),另外還有牙齒松動(dòng)、月經(jīng)過少等癥狀,出現(xiàn)頻率較少見。舌象情況：60例腎陰虛證中,舌質(zhì)紅46例(76.7%),舌上有裂紋9例(15%),舌質(zhì)暗紅包括舌有瘀點(diǎn)5例(8.3%)。舌苔出現(xiàn)頻數(shù)最多的是少苔43例(71.7%),其后依次為無苔11例(18.3%),薄黃苔5例(8.3%),苔黃膩1例(1.7%)。脈象情況：60例腎陰虛證中,脈數(shù)28例(46.7%),脈細(xì)21例(35%),脈弦8例(13.3%),脈緩出現(xiàn)的較少,為3例(5%)。從脈象性質(zhì)看,腎陰虛證多表現(xiàn)為細(xì)脈及數(shù)脈。②兩組臨床療效比較經(jīng)秩和檢驗(yàn)分析,Z=-1.975,P=0.0480.05,兩組療效差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示左歸丸組療效優(yōu)于左歸丸之滋腎陰對(duì)照組；兩組治療前后癥狀積分比較組內(nèi)比較用配對(duì)t檢驗(yàn),治療前兩組組間比較用方差分析,兩組治療后積分比較使用協(xié)方差分析。結(jié)果表明,治療前兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,治療后組內(nèi)比較配對(duì)t檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩組治療前后癥狀積分的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t治療組=18.139,t對(duì)照組=7.732,P0.01),治療組與對(duì)照組的干預(yù)后癥狀積分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=62.413,P0.01),說明治療組在改善腎陰虛證癥狀方面優(yōu)于對(duì)照組。(2)將腎陽虛證患者隨機(jī)分為陰中求陽(即右歸丸)治療組、溫補(bǔ)腎陽(即右歸丸之溫腎陽中藥復(fù)方)治療組進(jìn)行臨床觀察：①主要臨床癥狀及舌象脈象觀察：60例腎陽虛證的主要臨床癥狀依次是：畏寒55例(占91.7%)、腰部酸痛51例(占85%)、腿膝酸軟48例(占80%)、疲倦乏力42例(占70%)、脫發(fā)36例(占60%)、下肢水腫22例(占36.7%)、性欲減退21例(占35%)、手足冷17例(占28.3%)、夜尿多16例(占26.7%),另外還有牙齒松動(dòng)、記憶力減退等癥狀,出現(xiàn)頻率較少見。舌象情況：60例腎陽虛證中,舌質(zhì)淡紅38例(占63.3%),舌質(zhì)淡12例(占20%),舌淡有齒印7例(占11.7%),舌質(zhì)暗紅包括舌有瘀點(diǎn)3例(占5%)。舌苔出現(xiàn)頻數(shù)最多的是苔薄白47例(占78.3%),其后依次為苔薄黃6例(占10%),少苔6例(占10%),苔黃膩或黃稍膩1例(占1.7%)。脈象情況：60例腎陽虛證中,脈沉32例(53.3%),脈細(xì)22例(36.7%),脈細(xì)弱4例(占6.7%),脈緩出現(xiàn)的較少,為2例(占3.3%)。從脈象性質(zhì)看,腎陽虛證多表現(xiàn)為虛脈：脈沉、脈細(xì)、脈細(xì)弱、脈緩。②兩組臨床療效比較：經(jīng)秩和檢驗(yàn)分析,Z=-2.062,P=0.0390.05,兩組療效差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示右歸丸組療效優(yōu)于右歸丸之溫腎陽對(duì)照組,兩組治療前后癥狀積分比較：組內(nèi)比較用配對(duì)t檢驗(yàn),治療前兩組組間比較用方差分析,治療后兩組間比較用協(xié)方差分析。結(jié)果表明,治療前兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,治療后組內(nèi)比較配對(duì)t檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩組治療前后癥狀積分的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),治療組與對(duì)照組的干預(yù)后癥狀積分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=84.257,P0.01),說明治療組在改善腎陽虛證癥狀方面優(yōu)于對(duì)照組。3.免疫功能測(cè)試：①淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)顯示：左歸丸三組治療前后T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的刺激指數(shù)實(shí)驗(yàn)顯示,治療前左歸丸組及左歸丸中滋腎陰治療組SI均下降,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。治療后左歸丸治療組與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而左歸丸之滋腎陰組與正常組比較差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明治療后,左歸丸治療組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化刺激指數(shù)較治療前上升明顯,接近正常值,療效明顯優(yōu)越于左歸丸之滋腎陰治療組。右歸丸三組治療前后淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的刺激指數(shù)實(shí)驗(yàn)顯示,治療前右歸丸組及右歸丸中溫腎陽治療組SI均下降,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。治療后右歸丸治療組與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而右歸丸之溫腎陽組與正常組比較差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明治療后,右歸丸治療組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化刺激指數(shù)較治療前上升明顯,接近正常值,療效明顯優(yōu)越于右歸丸之溫腎陽治療組。②NK細(xì)胞活性測(cè)定：左歸丸三組治療前后NK細(xì)胞活性測(cè)定顯示,治療前左歸丸組及左歸丸中滋腎陰治療組NK細(xì)胞活性%均下降,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。治療后左歸丸治療組與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而左歸丸之滋腎陰組與正常組比較差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明治療后,NK細(xì)胞活性%較治療前上升明顯,與正常組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,療效明顯優(yōu)越于左歸丸之滋腎陰治療組。右歸丸三組治療前后NK細(xì)胞活性測(cè)定顯示,治療前右歸丸組及右歸丸中溫腎陽治療組NK細(xì)胞活性均下降,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。治療后右歸丸治療組與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而右歸丸之溫腎陽組與正常組比較差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明治療后,NK細(xì)胞活性較治療前上升明顯,接近正常值,療效明顯優(yōu)越于右歸丸之溫腎陽治療組。③外周血白細(xì)胞、血清抗體、補(bǔ)體及淋巴細(xì)胞亞群觀察：外周血白細(xì)胞比較：左歸丸兩組治療前后外周血白細(xì)胞比較t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,治療前后兩組組內(nèi)比較外周血白細(xì)胞比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t治療組=-7.227,t對(duì)照組=-4.401,P0.01),治療前兩組間白細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.229,P0.05),治療后兩組間白細(xì)胞比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.708,P0.05)。說明左歸丸組及左歸丸之滋腎陰組有促進(jìn)外周血白細(xì)胞增高作用,并且治療組優(yōu)于對(duì)照組。右歸丸兩組治療前后外周血白細(xì)胞比較：t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,兩組治療前后組內(nèi)比較外周血白細(xì)胞比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t治療組=-11.794,t對(duì)照組=-8.094,P0.01),治療前兩組間白細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.150,P0.05),治療后兩組間白細(xì)胞比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=48.724,P0.05)。說明右歸丸組及右歸丸之溫腎陽組有促進(jìn)外周血白細(xì)胞增高作用,并且治療組優(yōu)于對(duì)照組。血清抗體、補(bǔ)體和淋巴細(xì)胞亞群比較：左歸丸兩組治療前后血清抗體和補(bǔ)體比：t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,兩組治療前后血清抗體IgG、IgA、IgM和補(bǔ)體C3、C4比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。說明此次試驗(yàn)兩組方藥對(duì)治療前后血清抗體和補(bǔ)體影響不大。兩組治療前后淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)比較t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,兩組治療前后淋巴細(xì)胞亞群CD3、CD4、CD8比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。說明此次試驗(yàn)兩組方藥對(duì)治療前后淋巴細(xì)胞亞群影響不大。右歸丸兩組治療前后血清抗體和補(bǔ)體比較：t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,兩組治療前后血清抗體IgG、IgA、IgM和補(bǔ)體C3、C4比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。說明此次試驗(yàn)兩組方藥對(duì)治療前后血清抗體和補(bǔ)體影響不大。4.熒光定量PCR測(cè)基因表達(dá)：經(jīng)治療后,左歸丸組及左歸丸之滋腎陰組中6條基因較治療前均有上調(diào),但仍未達(dá)正常表達(dá)水平。左歸丸組各條基因表達(dá)較左歸丸之滋腎陰組中均上調(diào)更明顯,治療后兩組間比較有顯著性差異。經(jīng)治療后,右歸丸組及右歸丸之溫腎陽組中6條基因較治療前均有上調(diào),但仍未達(dá)正常表達(dá)水平。右歸丸組各條基因表達(dá)較右歸丸之溫腎陽組中均上調(diào)更明顯,治療后兩組間比較有顯著性差異。[結(jié)論]1.左歸丸組在臨床治療腎陰虛證方面優(yōu)于單純滋腎陰中藥復(fù)方對(duì)照組,提示“陽中求陰”法優(yōu)于單純滋陰治療。右歸丸組在治療腎陽虛證方面優(yōu)于單純溫腎陽中藥復(fù)方治療組,驗(yàn)證了景岳“陰中求陽”法優(yōu)于單純溫腎陽治療方法。驗(yàn)證了張景岳“陰中求陽”、“陽中求陰”方法的科學(xué)性。2.從免疫學(xué)及基因表達(dá)角度均驗(yàn)證了左歸丸治療組較單純的滋腎陰組,右歸丸治療組較單純溫腎陽組,均有明顯的優(yōu)越性。提示腎中陰陽互根理論在免疫水平及基因水平得到驗(yàn)證,為腎中陰陽互根理論的現(xiàn)代進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：陰陽互根 腎陰虛證 腎陽虛證 熒光定量PCR 免疫學(xué)
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R277.5
【目錄】：

• 摘要3-10
• ABSTRACT10-21
• 前言21-24
• 第一章 腎中陰陽互根的理論基礎(chǔ)24-50
• 1 腎及腎虛證的中醫(yī)理論基礎(chǔ)24-40
• 2 文獻(xiàn)研究40-46
• 3 本研究思路及構(gòu)想46-50
• 第二章 臨床研究部分50-90
• 臨床研究一 左歸丸治療組臨床觀察52-70
• 第一節(jié) 左歸丸及其拆方治療腎陰虛證的臨床研究方案52-63
• 第二節(jié) 左歸丸及其拆方治療腎陰虛證的臨床研究結(jié)果63-70
• 臨床研究二 右歸丸治療組臨床觀察70-80
• 第一節(jié) 右歸丸及其拆方治療腎陽虛證的臨床研究方案70-73
• 第二節(jié) 右歸丸及其拆方治療腎陽虛證的臨床研究結(jié)果73-80
• 本章討論80-90
• 第三章 免疫功能實(shí)驗(yàn)90-106
• 實(shí)驗(yàn)一 T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)90-93
• 實(shí)驗(yàn)二 NK細(xì)胞活性測(cè)定93-96
• 實(shí)驗(yàn)三 外周血白細(xì)胞、血清抗體、補(bǔ)體及淋巴細(xì)胞亞群觀察96-100
• 本章討論100-106
• 第四章 熒光定量檢測(cè)基因表達(dá)106-127
• 1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)106-107
• 2 病例選擇107-108
• 3 材料與方法108-127
• 全文小結(jié)127-129
• 本研究的不足之處128
• 研究展望128-129
• 參考文獻(xiàn)129-139
• 附錄139-163
• 附錄1 中英文縮寫詞表139-140
• 附錄2 中醫(yī)證候調(diào)查表140-156
• 附錄3 文獻(xiàn)綜述156-163
• 參考文獻(xiàn)160-163
• 攻讀學(xué)位期間成果163-165
• 致謝165-167
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)審稿證明167

【參考文獻(xiàn)】

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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  本文關(guān)鍵詞：陰陽互根理論在腎虛證中的臨床應(yīng)用及機(jī)制探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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