本文關(guān)鍵詞：單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中作用的臨床和實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(Diffuse Large B-cell Lymphoma,DLBCL),作為最常見的侵襲性非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin Lymphoma,NHL),多于50%該患者是可能治愈的。即使在利妥昔單抗時(shí)代,大約1/3 DLBCL患者最終將死于復(fù)發(fā)或難治。大劑量化療聯(lián)合自體造血干細(xì)胞移植(Autologous Stem Cell Transplantation,ASCT),作為是對(duì)挽救性化療敏感的復(fù)發(fā)/難治性DLBCL的標(biāo)準(zhǔn)治療,但是僅對(duì)30%此患者有效。因此,對(duì)復(fù)發(fā)難治性DLBCL患者的新的治療方案研究和探索是必須的。單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)(Mononuclear Phagocyte System,MPS)主要包括外周循環(huán)的單核細(xì)胞、組織中游走或固定的巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)作為固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分,不僅在機(jī)體抗感染、維持自身穩(wěn)態(tài)和免疫監(jiān)視等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用,而且因其分化或功能異常參與了如心血管疾病、慢性阻塞性肺疾病、肺結(jié)核和自身免疫性疾病等。近年來,因和腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切而備受關(guān)注。單核細(xì)胞作為一群異質(zhì)性細(xì)胞,在吞噬殺傷、炎癥、抗原提呈和免疫調(diào)節(jié)功能方面扮演了重要角色。人類單核細(xì)胞根據(jù)CD14和CD16表達(dá)水平分為三亞群,即經(jīng)典型(CD14++CD16-)、中間型(CD14++CD16+)和非經(jīng)典型(CD14+CD16++)。近些年,越來越多臨床證據(jù)表明CD16+單核細(xì)胞(包括CD14++CD16+單核細(xì)胞和CD14+CD16++單核細(xì)胞)和某些腫瘤密切相關(guān)。此外,不同單核細(xì)胞群也參與了腫瘤發(fā)生發(fā)展,如CD14+HLA-DR-/low單核細(xì)胞通過抑制機(jī)體抗腫瘤反應(yīng)而發(fā)揮免疫抑制作用,酪氨酸激酶受體Tie-2+單核細(xì)胞(tie2-expressingmonocytes,tems)參與腫瘤血管生成,ccr2+炎性單核細(xì)胞在促腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移方面具有重要作用。巨噬細(xì)胞是具有多功能的細(xì)胞,其中一些作用是相對(duì)立的:他們可以免疫刺激或免疫抑制,并促進(jìn)或抑制炎癥。這種功能的可塑性是受局部的巨噬細(xì)胞應(yīng)答信號(hào)調(diào)節(jié)的。腫瘤微環(huán)境中的巨噬細(xì)胞在不同因子刺激極化下,分為具有抗腫瘤作用的經(jīng)典激活巨噬細(xì)胞(m1型)和促腫瘤功能的選擇性激活巨噬細(xì)胞(m2型)。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associatedmacrophages,tams),大部分表現(xiàn)出m2樣的表型和功能,參與了腫瘤生長、浸潤、轉(zhuǎn)移和血管生成,且具有很強(qiáng)的免疫抑制功能。由此,近些年來,單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)已成為腫瘤靶向治療感興趣的重要靶點(diǎn)。然而目前,單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在彌漫大b細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中作用的臨床和實(shí)驗(yàn)研究甚少。目的全面分析單核細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(absolutemonocytecount,amc)對(duì)dlbcl患者預(yù)后預(yù)測(cè)的意義和價(jià)值。dlbcl患者外周血不同單核細(xì)胞亞群、相關(guān)細(xì)胞因子和基因水平檢測(cè),dlbcl腫瘤微環(huán)境中tams和相關(guān)趨化因子檢測(cè)及各自臨床意義和作用機(jī)制的初步探討。方法1.在244例初診dlbcl、163例復(fù)發(fā)/難治性dlbcl中分別回顧性分析初診amc、首次復(fù)發(fā)amc與dlbcl臨床預(yù)后的關(guān)系,220例隨訪dlbcl中amc預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的作用。2.收集32例初診、29例緩解、21例復(fù)發(fā)dlbcl患者及30例健康對(duì)照的外周血標(biāo)本,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)單核細(xì)胞亞群、cd14+hla-dr-/low單核細(xì)胞、ccr2+炎性單核細(xì)胞、tie-2+單核細(xì)胞的分布,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elasa)方法檢測(cè)血漿精氨酸酶-1(arginase-1,arg-1)、單核細(xì)胞趨化因子-1(monocytechemotacticfactor-1,mcp-1)和血管生成素-2(angiopoietin-2,ang-2)濃度,realtimepcr方法檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中ccr2、tie-2mrna表達(dá)水平。3.免疫組化方法檢測(cè)221例dlbcl石蠟組織標(biāo)本cd68、cd163、mcp-1、ccr2和pstat3表達(dá)特點(diǎn)及預(yù)后意義探索。結(jié)果1.高初診amc的初診dlbcl患者較低amc患者有更低的完全緩解率(completeremission,cr)、總體生存率(overallsurvival,os)和無疾病進(jìn)展生存率(progressionfreesurvival,pfs)。多因素cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型示高初診amc是dlbcl一獨(dú)立的不良預(yù)后因素,同時(shí)結(jié)合國際預(yù)后指數(shù)(internationalprognosticindex,ipi),amc可為dlbcl提供更多的預(yù)后信息,比如中危組按初診amc高低進(jìn)一步分層,有約20%患者有更低pfs和os,且單獨(dú)在接受聯(lián)合利妥昔單抗的免疫治療患者中分析也得到相似結(jié)果。再者,高首次復(fù)發(fā)amc對(duì)于接受二線治療或敏感者后行大劑量化療聯(lián)合asct的復(fù)發(fā)/難治性dlbcl是一獨(dú)立的不良預(yù)后因素。高首次復(fù)發(fā)amc的復(fù)發(fā)/難治性dlbcl患者與低amc患者相比,具有更低的治療反應(yīng)率、pfs和os率。結(jié)合復(fù)發(fā)時(shí)國際預(yù)后指數(shù)(internationalprognosticindexatrelapse,saaipi),首次復(fù)發(fā)amc可為復(fù)發(fā)/難治性dlbcl進(jìn)一步分層,比如中危組復(fù)發(fā)/難治性dlbcl中約有25%患者有更低生存期,且單獨(dú)在接受聯(lián)合利妥昔單抗的補(bǔ)救方案治療患者中也得到相似結(jié)果。最后,高隨訪amc是dlbcl復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素,且amc預(yù)測(cè)靈敏度和特意度分別是54.0%和66.7%。高隨訪amc的dlbcl較低amc患者有更高的復(fù)發(fā)率、相對(duì)危險(xiǎn)度及累計(jì)風(fēng)險(xiǎn)率。聯(lián)合隨訪乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,ldh)水平,不管ldh水平高低,能夠得到同樣結(jié)果。2.初診dlbcl患者外周血cd14+單核細(xì)胞比例(占外周血單個(gè)核細(xì)胞)、中間型單核細(xì)胞比例(占cd14+單核細(xì)胞)、cd14+hla-dr-/low單核細(xì)胞比例(占cd14+單核細(xì)胞)、ccr2+單核細(xì)胞比例(占外周血單個(gè)核細(xì)胞)和tie-2+單核細(xì)胞比例(占cd14+單核細(xì)胞)均高于健康對(duì)照。在dlbcl不同組別中,復(fù)發(fā)組患者上述細(xì)胞群比例分別均高于初診和緩解組,緩解組低于初診組。隨ipi評(píng)分升高,上述細(xì)胞比例均呈升高。上述細(xì)胞比例在接受標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)合利妥昔單抗方案免疫治療后,緩解患者緩解時(shí)比例低于初診時(shí),復(fù)發(fā)患者復(fù)發(fā)時(shí)胞比例高于初診時(shí)。利用受試者工作特征(receiveroperatingcharacteristic,roc)曲線分析初診dlbcl患者和健康對(duì)照組單核細(xì)胞數(shù)據(jù)比較發(fā)現(xiàn),升高的單核細(xì)胞群可作為dlbcl早期診斷的指標(biāo)。相關(guān)細(xì)胞因子arg-1、mcp-1和ang-2血漿濃度分別與cd14+hla-dr-/low單核細(xì)胞比例、ccr2+單核細(xì)胞比例和tie-2+單核細(xì)胞比例呈正相關(guān)。外周血單個(gè)核細(xì)胞中ccr2、tie-2mrna表達(dá)水平與相應(yīng)流式檢測(cè)結(jié)果一致。3.利用spearman相關(guān)分析知dlbcl腫瘤組織中cd68和cd163密度、初診amc分別和cd68及cd163密度均呈正相關(guān)。cd163高表達(dá)是dlbcl一獨(dú)立的不良預(yù)后因素。根據(jù)cd68和cd163表達(dá)高、低,能在ipi評(píng)分為低、中危組dlbcl中能篩選出高危患者,cd68高表達(dá)和cd163高表達(dá)率均隨ipi評(píng)分的升高而升高。mcp-1陽性表達(dá)主要在dlbcl腫瘤細(xì)胞胞質(zhì),ccr2陽性表達(dá)在腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)或胞膜,pstat3陽性表達(dá)于腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核,且還可觀察到ccr2陽性表達(dá)于dlbcl組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。mcp-1和ccr2表達(dá)水平,pstat3陽性表達(dá)分別和mcp-1及ccr2表達(dá)水平均呈正相關(guān)。mcp-1高表達(dá)、ccr2高表達(dá)和pstat3陽性表達(dá)均是dlbcl一獨(dú)立的不良預(yù)后因素。在不同ipi評(píng)分患者中,尤在低、中危組,三者均可篩選出高危患者而提供更多預(yù)后信息。mcp-1高表達(dá)、ccr2高表達(dá)和pstat3陽性表達(dá)率均隨疾病危險(xiǎn)度升高而升高,且有趣地是,利用roc曲線探討發(fā)現(xiàn)mcp-1或ccr2結(jié)合ipi較單獨(dú)ipi具有更好預(yù)后判斷能力。結(jié)論1.amc指標(biāo)在初診、復(fù)發(fā)/難治性dlbcl中是一獨(dú)立的預(yù)后因素,可篩選出高�；颊�,且隨訪過程中的動(dòng)態(tài)檢測(cè)能為復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)提供有效的信息。2.外周血中間型單核細(xì)胞,可作為dlbcl早期診斷的指標(biāo),可能在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起重要作用。此外,cd14+hla-dr-/low單核細(xì)胞、ccr2+炎性單核細(xì)胞及Tie-2+單核細(xì)胞可能分別在免疫抑制、促血管生成及腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移方面發(fā)揮至關(guān)重要作用。3.DLBCL腫瘤微環(huán)境中TAMs增多是一獨(dú)立的預(yù)后不良因素,且和AMC呈正相關(guān)。MCP-1/CCR2軸可能通過STAT3信號(hào)通路在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中扮演重要角色。
【關(guān)鍵詞】：彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤 單核細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 臨床預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.1
【目錄】：

• 英文縮略詞表7-10
• 中文摘要10-15
• 英文摘要15-21
• 1 引言21-27
• 1.1 彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）概述21-24
• 1.1.1 DLBCL簡(jiǎn)介21
• 1.1.2 DLBCL臨床預(yù)后模型21-22
• 1.1.3 DLBCL生物學(xué)預(yù)后指標(biāo)22-24
• 1.2 單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)（MPS）概述24-27
• 1.2.1 MPS簡(jiǎn)介24
• 1.2.2 單核細(xì)胞與腫瘤24-25
• 1.2.3 巨噬細(xì)胞與腫瘤25-27
• 1.3 本研究立項(xiàng)和意義27
• 2 材料和方法27-42
• 2.1 主要儀器和設(shè)備27-28
• 2.2 主要試劑和耗材28-29
• 2.3 引物序列29-30
• 2.4 病例與標(biāo)本30-36
• 2.4.1 病例與標(biāo)本收集方法30
• 2.4.2 病例資料及標(biāo)本特點(diǎn)30-31
• 2.4.3 病例資料整理31-36
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法及步驟36-41
• 2.5.1 標(biāo)本提取與凍存36
• 2.5.2 FCM分析36-37
• 2.5.3 ELISA分析37-38
• 2.5.4 PCR分析38-40
• 2.5.5 IHC分析40-41
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理41-42
• 3 結(jié)果42-100
• 3.1 外周血單核細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（AMC）與DLBCL臨床和預(yù)后分析42-61
• 3.1.1 初診AMC與初診DLBCL臨床和預(yù)后分析42-48
• 3.1.2 首次復(fù)發(fā)AMC與復(fù)發(fā)/難治性DLBCL臨床和預(yù)后分析48-55
• 3.1.3 隨訪 AMC 監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的作用和臨床分析55-61
• 3.2 DLBCL外周血單核細(xì)胞亞群、CD14+HLA-DR-/low單核細(xì)胞、 Tie-2+單核細(xì)胞、CCR2+單核細(xì)胞和及相關(guān)細(xì)胞因子、基因水平檢測(cè)及臨床意義分析61-74
• 3.2.1 單核細(xì)胞亞群在DLBCL患者和健康對(duì)照中的分布特征及臨床意義分析61-66
• 3.2.2 CD14+HLA-DR-/low 單核細(xì)胞、Tie-2+單核細(xì)胞、CCR2+單核細(xì)胞和在DLBCL 患者和健康對(duì)照中的分布特征、臨床意義分析及相關(guān)細(xì)胞因子和基因水平檢測(cè)66-74
• 3.3 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）、趨化因子MCP-1 及其受體、pSTAT3在DLBCL中浸潤及表達(dá)的臨床意義探索74-100
• 3.3.1 TAMs在DLBCL中浸潤及臨床預(yù)后研究，且和AMC的關(guān)系分析74-85
• 3.3.2 趨化因子MCP-1 及其受體在DLBCL中表達(dá)特點(diǎn)及臨床預(yù)后研究，，且和pSTAT3表達(dá)間關(guān)系分析85-100
• 4 討論100-112
• 5 結(jié)論112
• 6 本課題的創(chuàng)新點(diǎn)和對(duì)課題的進(jìn)一步設(shè)想112-113
• 7 參考文獻(xiàn)113-134
• 8 附錄134-136
• 8.1 基本個(gè)人信息134
• 8.2 教育背景134
• 8.3 在校期間所獲獎(jiǎng)勵(lì)134
• 8.4 在校期間參與的科研項(xiàng)目134
• 8.5 攻讀博士期間研究成果134-136
• 致謝136-137
• 綜述137-147
• 參考文獻(xiàn)142-147

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10 孫璐;中國人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤免疫亞型、遺傳學(xué)異常及其與臨床預(yù)后相關(guān)性的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 卓秀明;59例彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的預(yù)后因素分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王連靜;淋巴瘤中RASSF5A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)與mRNA表達(dá)的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 趙世華;年輕、高危彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的臨床研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

4 陳聰;IL-12不同亞基在經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤及彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及意義[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 劉申婷;自體外周血造血干細(xì)胞移植治療外周T細(xì)胞淋巴瘤1例報(bào)道并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

6 王宏;淋巴瘤中EB病毒潛伏膜蛋白1基因多態(tài)性研究[D];青島大學(xué);2015年

7 費(fèi)菊萍;福達(dá)拉濱治療惰性淋巴瘤臨床病例分析[D];浙江大學(xué);2007年

8 農(nóng)慶偉;104例外周T細(xì)胞淋巴瘤非特指型的臨床分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

9 馬瑞;腫瘤壞死因子-α與淋巴瘤關(guān)系的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2012年

10 江山;原發(fā)性皮膚外周T細(xì)胞淋巴瘤（非特殊類型）—病例報(bào)告與文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中作用的臨床和實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：255781