本文關(guān)鍵詞：不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)夫婦WNT6基因突變位點(diǎn)篩查及KIR2DL4基因多態(tài)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學(xué)》 2015年

不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)夫婦經(jīng)微陣列比較基因組雜交技術(shù)行胚胎植入前遺傳學(xué)篩查的回顧性分析

張磊  

【摘要】：研究背景：流產(chǎn)為妊娠未滿28周、胎兒未足1000g而終止者,流產(chǎn)分為自然流產(chǎn)和人工流產(chǎn),其中自然流產(chǎn)發(fā)生率為10%-15%。與同一性伴侶發(fā)生的3次或3次以上自然流產(chǎn)者稱為復(fù)發(fā)性流產(chǎn),復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的已知原因可分為染色體異常、子宮結(jié)構(gòu)異常、內(nèi)分泌異常、免疫功能異常、感染因素、遺傳性凝血異常及環(huán)境因素。約50%復(fù)發(fā)性流產(chǎn)夫婦檢查以上已知相關(guān)原因均未見異常,稱為不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(unexplained recurrent miscarriage, uRM)。uRM嚴(yán)重影響患者夫婦的生理及心理健康,是生殖醫(yī)學(xué)的難題。其潛在的原因復(fù)雜多變,目前認(rèn)為母胎界面異常、免疫因素等都是其可能的原因。另外,胎兒染色體異常為HRM的重要因素之一,尤其是對(duì)于前幾次流產(chǎn)未行絨毛檢測(cè)患者或者高育齡且符合助孕指征的患者來說,胚胎植入前遺傳學(xué)篩查(preimplantation genetic screening, PGS)是必要的,可以從胚胎學(xué)角度減少?gòu)?fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。PGS是行體外受精(in vitro fertilization, IVF)助孕夫婦在胚胎移植前,取極體、卯裂球細(xì)胞、囊胚滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞行遺傳學(xué)檢測(cè),以檢測(cè)胚胎是否有染色體異常,進(jìn)而提高胚胎著床能力及降低與非整倍體相關(guān)的流產(chǎn)及胎兒的出生。PGS主要應(yīng)用于發(fā)生在染色體核型正常夫婦的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、女方高育齡、反復(fù)胚胎植入失敗及嚴(yán)重男性因素引起的不育。常規(guī)PGS技術(shù)為熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)技術(shù),隨著技術(shù)的發(fā)展,比較基因組雜交(comparative genomic hybridization, CGH)技術(shù)逐漸在PGS中運(yùn)用。微陣列比較基因組雜交(array-based comparative genomic hybridization, a-CGH)技術(shù)為新發(fā)展起來的一種高效細(xì)胞染色體核型分析技術(shù),通過一次分子雜交實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全基因組高分辨率、高通量核型分析,適用于PGS中行3-5個(gè)胚胎細(xì)胞染色體核型分析。由于技術(shù)的限制,FISH技術(shù)不能檢測(cè)胚胎全基因組24條染色體的情況,而a-CGH技術(shù)不僅能分析出染色體數(shù)目異常,更能分析出缺失、重復(fù)等結(jié)構(gòu)異常,但不能分析出平衡易位及多倍體異常者。研究目的：回顧性分析uRM夫婦經(jīng)a-CGH技術(shù)行PGS助孕后,胚胎染色體異常類型及異常比例。研究方法：統(tǒng)計(jì)就診于山東大學(xué)附屬生殖醫(yī)院的夫婦中診斷為uRM行PGS技術(shù)助孕的2013年01月至2014年10月a-CGH胚胎染色體核型分析結(jié)果,共45對(duì)夫婦47周期169枚胚胎染色體核型分析結(jié)果,運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。研究結(jié)果：1. 患者夫婦中女方平均年齡33.62±5.21歲(23-43歲),平均流產(chǎn)次數(shù)為3.89±1.17次(3-7次)。169枚胚胎中96枚為整倍體胚胎,整倍體胚胎比率為56.80%,73枚為非整倍體胚胎,包括染色體數(shù)目異常及結(jié)構(gòu)異常,非整倍體胚胎比率為43.20%。2. 單條染色體異常(單體、三體、染色體大片段缺失或增加)的胚胎數(shù)為43枚,其中,單體胚胎17枚,比率為39.53%(17/43),三體胚胎14枚,比率為32.56%(14/43),單體與三體胚胎比率為1.31。3.將胚胎染色體異常按照染色體編號(hào)進(jìn)行分類,其中若一枚胚胎中有2條或2條以上染色體出現(xiàn)異常,則每條染色體異常各計(jì)數(shù)一次,按照染色體編號(hào)行柱狀圖后發(fā)現(xiàn),染色體組中每條染色體均會(huì)發(fā)生異常,其中16、22、8、2、6號(hào)染色體出現(xiàn)異常的比例相對(duì)較高。4.將患者夫婦按照女方年齡分為23-29、30-39、40-43歲組,各年齡組異常胚胎率分別為48.78%、36.75%、71.43%,統(tǒng)計(jì)分析示30-39歲組與40-43歲組之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01),23-29歲組與30-39歲組之間和23-29歲組與40-43歲組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。5.將患者夫婦按照女方年齡分組,分為23-37、38-43歲組,各年齡組異常胚胎率分別為38.93%、60.53%,統(tǒng)計(jì)分析示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.截止至2015年4月,共移植35周期38枚胚胎,胚胎著床率為73.68%,移植周期臨床妊娠率為71.43%,流產(chǎn)率為32%,繼續(xù)妊娠及活產(chǎn)率為68%。研究結(jié)論：1.形態(tài)學(xué)正常的胚胎可出現(xiàn)染色體異常,因此,形態(tài)學(xué)不能作為胚胎篩選的唯一標(biāo)準(zhǔn)。2.不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)夫婦經(jīng)a-CGH行PGS助孕,篩查整倍體胚胎對(duì)于胚胎著床及繼續(xù)妊娠有幫助。3.在uRM夫婦中,隨著女方年齡的增加,uRM夫婦所獲胚胎非整倍體比率增加,年齡超過37歲女性所獲非整倍體胚胎的比率明顯大于年輕的女性。4.除外胚胎染色體異常,不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)還有其他致病原因需要探索。5.由于樣本數(shù)量、病歷篩選及技術(shù)應(yīng)用時(shí)間的限制,本研究仍需后續(xù)進(jìn)行。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R714.8
【目錄】：

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：243525