【摘要】：第一部分髓核細(xì)胞中p38亞型的差異性表達(dá)及其在椎間盤退變中的作用及機(jī)制研究研究背景:椎間盤(Intervertebral disc,IVD)位于椎體之間,主要由髓核(Nucleus pulposus,NP)和纖維環(huán)(Annulus fibrosus,AF)構(gòu)成,是人體脊柱結(jié)構(gòu)的重要組成部分。其生理功能主要包括參與脊柱屈、伸、旋轉(zhuǎn)等運(yùn)動(dòng)功能,維持椎間隙高度,以及承載負(fù)荷和分散應(yīng)力等。目前已經(jīng)證實(shí),椎間盤退行性病變(Intervertebral disc degeneration,IDD)是引起下腰痛(Low back pain,LBP)及成人腰椎間盤突出癥的主要原因之一。近年來,隨著椎間盤內(nèi)炎性介質(zhì)對(duì)椎間盤影響的研究快速發(fā)展,炎性反應(yīng)(Inflammation)成為了椎間盤退變的重要研究方向。促炎因子(Pro-inflammatory cytokines)如TNF-α、IL-1、COX-2、IL-6、IL-8,IL-10以及基質(zhì)金屬蛋白酶類(Matrix metalloproteinases,MMPs)等均和腰椎間盤退變有關(guān)。而上述相關(guān)產(chǎn)物的基因表達(dá)都與絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)息息相關(guān)。絲裂原活化蛋白激酶是一種細(xì)胞外刺激經(jīng)過一系列轉(zhuǎn)導(dǎo)引起細(xì)胞核反應(yīng)的重要信號(hào)通路。P38 MAPK是絲裂原活化蛋白激酶家族中的重要成員,在細(xì)胞內(nèi)擔(dān)負(fù)著將細(xì)胞外各種有絲分裂和應(yīng)急信號(hào)傳遞至細(xì)胞核以及調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達(dá)從而介導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生一系列反應(yīng)的重要使命,是細(xì)胞內(nèi)主要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)。在椎間盤退變過程中,髓核細(xì)胞中p38 MAPK發(fā)揮了重要作用。椎間盤退變時(shí),促炎因子(Pro-inflammatory cytokines)大量分泌聚集,此時(shí),p38 MAPK介導(dǎo)髓核細(xì)胞多種分解代謝酶如ADAMTS-4、ADAMTS-5以及MMPs等表達(dá)增高。這些分解代謝酶類表達(dá)增強(qiáng)導(dǎo)致collagen-II(Col-II)、aggrecan等椎間盤細(xì)胞外基質(zhì)成分大量降解。此外,p38 MAPK信號(hào)通路還參與一系列椎間盤退變的細(xì)胞生理病理過程如凋亡、自噬、缺氧、血管翳生成等密切相關(guān)。P38 MAPK家族有四個(gè)成員:p38α(MAPK14)、p38β(MAPK11)、p38γ(MAPK12/ERK-6)以及p38δ(MAPK13/SAPK4)。這四種亞型的同源性達(dá)60%,但卻由不同的上游激酶—絲裂原活化蛋白激酶激酶-3、-4、-6(MKK-3、MKK-4、MKK-6)—選擇性磷酸化。值得注意的是,盡管p38 MAPK在椎間盤退變過程中發(fā)揮了重要作用,然而有關(guān)p38 MAPK各亞型在參與椎間盤退變中的具體作用機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)研究首次證實(shí)了p38α、p38β、p38δ三種亞型在上游激酶MKK-3的的作用下激活進(jìn)而在椎間盤退變中發(fā)揮重要作用,其中,p38α、p38β可以增強(qiáng)ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13等細(xì)胞外基質(zhì)降解酶類的表達(dá),降低II型膠原(Collagen-II)、聚蛋白聚糖(Aggrecan)等基質(zhì)大分子從而加劇退變,而p38δ則相反,其抑制ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13等表達(dá)同時(shí)增強(qiáng)基質(zhì)成分aggrecan的表達(dá)而對(duì)椎間盤起保護(hù)作用。目的:探討p38 MAPK四種亞型各自在退變椎間盤髓核細(xì)胞中的表達(dá)情況,研究其上游激酶的活化情況,系統(tǒng)探討在椎間盤退變中p38 MAPK各亞型對(duì)相關(guān)分解代謝酶類及促炎因子的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制。方法:采用免疫印跡分析(Western blot analysis)方法分別檢測(cè)p38 MAPK四種亞型在退變的椎間盤髓核及纖維環(huán)組織中的表達(dá)水平;采用免疫印跡(Western blot)方法分別檢測(cè)退變髓核組織中p38α、p38β、p38γ以及p38δ亞型的表達(dá)水平;采用免疫印跡分析方法對(duì)分級(jí)后的退變椎間盤髓核組織中p38 MAPK各亞型及磷酸化p38 MAPK進(jìn)行檢測(cè)以研究各亞型表達(dá)水平與椎間盤退變程度的關(guān)系;利用免疫雙熒光標(biāo)記法(Double-labeling immunofluorescence stain)同時(shí)標(biāo)記CD24及p38MAPK各亞型,研究各亞型的表達(dá)情況;利用免疫雙熒光標(biāo)記法研究p38 MAPK各亞型在退變髓核細(xì)胞中的激活情況,利用拉下實(shí)驗(yàn)(Pull-down)進(jìn)一步確認(rèn)p38MAPK各亞型在退變椎間盤髓核細(xì)胞中的激活情況;利用免疫印跡方法進(jìn)一步分別檢測(cè)正常及不同退變程度椎間盤組織中p38 MAPK上游激酶MKK-3、MKK-4、MKK-6活化情況;為檢測(cè)p38 MAPK各亞型在椎間盤退變炎癥反應(yīng)中的作用,利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)分別沉默p38α、p38β、p38γ以及p38δ的表達(dá),利用定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)(Real-time quantitative PCR,q-PCR)和WB法證實(shí)沉默效果,隨后利用q-PCR法檢測(cè)IL-1β干預(yù)髓核細(xì)胞后,p38 MAPK各亞型對(duì)椎間盤退變相關(guān)指標(biāo)ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13,CCL-3,collagen-II、aggrecan等m RNA的表達(dá)水平的影響。結(jié)果:Western blot analysis顯示,與纖維環(huán)組織相比,p38 MAPK在退變的髓核組織中表達(dá)上調(diào);利用Western blot方法可以檢測(cè)出退變髓核組織中p38α、p38β、p38δ表達(dá),而p38γ并不表達(dá);不同退變程度的椎間盤髓核組織中p38各亞型及磷酸化p38(p-p38)表達(dá)情況檢測(cè)結(jié)果顯示,p38α、p38β及p-p38表達(dá)同退變嚴(yán)重程度呈正相關(guān);利用免疫雙熒光標(biāo)記檢測(cè)發(fā)現(xiàn)高達(dá)83%的細(xì)胞顯示CD24和p38α雙陽性,78%的陽性細(xì)胞CD24和p38β雙陽性,p38δ和CD24雙陽性的細(xì)胞表達(dá)率為56%,而p38γ和CD24雙陽性的細(xì)胞僅為9%左右;分別對(duì)p38各亞型及磷酸化p38進(jìn)行免疫雙熒光標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)約38%的細(xì)胞p38α和磷酸化表現(xiàn)同時(shí)陽性,33%的細(xì)胞p38β和磷酸化表現(xiàn)同時(shí)陽性,而p38δ及p38γ陽性同時(shí)磷酸化的細(xì)胞僅分別為24%和5%;進(jìn)一步檢測(cè)p38上游激酶活化,發(fā)現(xiàn)僅有MKK-3表達(dá)上調(diào),MKK-4,MKK-6未有明顯變化,MKK-3恰是激活p38α、p38β、p38δ的上游激酶;利用IL-1β干預(yù)人椎間盤細(xì)胞24小時(shí)后,利用q-PCR法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13、CCL-3等的m RNA表達(dá)上調(diào),而collagen-II及aggrecan的表達(dá)降低,利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)分別抑制p38α、p38β可顯著降低ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13、CCL-3的表達(dá),但是抑制p38δ卻發(fā)現(xiàn)ADAMTS-4、ADAMTS-5表達(dá)明顯增強(qiáng),此外,q-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),抑制p38α、p38β可以恢復(fù)collagen-II、aggrecan的m RNA表達(dá),抑制p38δ卻對(duì)aggrecan表達(dá)起抑制作用。結(jié)論:1.退變的椎間盤髓核組織p38 MAPK表達(dá)上調(diào),其四種亞型中,p38α、p38β、p38δ被激活并起到主導(dǎo)作用,而p38γ表達(dá)較弱或不表達(dá);p38α、p38β隨著椎間盤退變程度加重表達(dá)增加。2.椎間盤退變時(shí),MKK3是激活p38的上游激酶,其激活的亞型恰為p38α、p38β、p38δ。3.抑制p38α、p38β的表達(dá)可降低IL-1β誘導(dǎo)的退變相關(guān)產(chǎn)物如ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13、CCL-3等的表達(dá),同時(shí)增強(qiáng)collagen-II、aggrecan等細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá)水平,說明p38α、p38β促進(jìn)退變發(fā)生;而p38δ則相反,抑制p38δ表達(dá)后,IL-1β誘導(dǎo)的促進(jìn)退變相關(guān)因素如ADAMTS-4、ADAMTS-5,MMPs-13等的表達(dá)增強(qiáng),而細(xì)胞外基質(zhì)成分aggrecan的表達(dá)被明顯抑制,說明椎間盤退變過程中p38δ可能在一定程度上對(duì)椎間盤起保護(hù)作用。第二部分:椎間盤退變中髓核細(xì)胞p38亞型的差異性表達(dá)對(duì)巨噬細(xì)胞極化作用研究研究背景:下腰痛(Low back pain,LBP)是一類最常見的臨床病癥。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),在美國約有80%的成年人曾有過下腰痛的經(jīng)歷,而目前每年僅用于其治療和康復(fù)的費(fèi)用達(dá)數(shù)百億美元之多。我國的下腰痛發(fā)病率與美國無明顯差異,而患者數(shù)量估計(jì)為美國的4-5倍。目前已經(jīng)證實(shí),椎間盤退變(Intervertebral disc degeneration,IDD)是引起下腰痛的主要原因之一。盡管目前關(guān)于椎間盤退變的確切發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚,但普遍觀點(diǎn)認(rèn)為以年齡、機(jī)械應(yīng)力、炎性反應(yīng)、創(chuàng)傷、內(nèi)分泌以及營養(yǎng)狀態(tài)為主的多重因素在其發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用。目前公認(rèn)在椎間盤退變過程中,p38 MAPK發(fā)揮了重要作用。椎間盤退變時(shí),促炎因子(Pro-inflammatory cytokines)大量分泌聚集激活髓核細(xì)胞中的p38 MAPK,介導(dǎo)分泌更多促炎因子,從而加劇椎間盤的炎性反應(yīng),同時(shí),p38 MAPK介導(dǎo)髓核(Nucleus pulposus,NP)細(xì)胞產(chǎn)生多種分解代謝酶如ADAMTS-4、ADAMTS-5以及MMPs等大量降解細(xì)胞外基質(zhì),同時(shí)p38 MAPK的激活還抑制了基質(zhì)主要成分如collagen II、aggrecan等的表達(dá)進(jìn)一步加重退變。此外,p38 MAPK信號(hào)通路還參與一系列椎間盤退變的細(xì)胞生理病理過程如凋亡、自噬等。研究表明,巨噬細(xì)胞在如骨性關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)等多種炎性疾病中發(fā)揮了重要作用,我們的前期工作表明,退變的椎間盤髓核組織中,巨噬細(xì)胞可能是唯一浸潤的炎癥細(xì)胞,但其在椎間盤退行性病變中的作用及機(jī)制尚不清楚。值得注意的是,有研究表明,在促炎因子刺激下,髓核細(xì)胞可以通過p38 MAPK介導(dǎo)趨化因子配體3(CCL3)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的遷移。當(dāng)巨噬細(xì)胞遷移至受傷組織后,會(huì)由于微環(huán)境的影響,巨噬細(xì)胞可被誘導(dǎo)極化分為兩型:M1型及M2型,M1型巨噬細(xì)胞起清除外源物及受損細(xì)胞的作用,M2型則促增殖起修復(fù)作用。M1型巨噬細(xì)胞特異性表達(dá)一氧化氮合酶(i NOS)和CD86,產(chǎn)生大量炎性因子如腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介素-12(IL-12);Arginase-1與CD206為M2型巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物,M2型巨噬細(xì)胞主要分泌IL-10及CCL18等免疫調(diào)節(jié)因子。目前,椎間盤退變中巨噬細(xì)胞極化情況尚未有報(bào)道。值得一提的是,一系列由p38 MAPK介導(dǎo)椎間盤髓核細(xì)胞表達(dá)的細(xì)胞因子如干擾素γ(IFNγ)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)都可以誘使巨噬細(xì)胞極化。因而,進(jìn)一步深入探討p38 MAPK與巨噬細(xì)胞在椎間盤退變中的具體作用機(jī)理并闡明巨噬細(xì)胞在椎間盤退變中的作用,可以為下一步制定能延緩乃至阻止椎間盤退變的分子生物學(xué)治療方案提供理論依據(jù)。目的:研究炎癥細(xì)胞在退變的椎間盤髓核組織中的浸潤情況,探討巨噬細(xì)胞與椎間盤退變的關(guān)系及作用機(jī)理,明確p38 MAPK與巨噬細(xì)胞在椎間盤退變中的具體作用機(jī)制,進(jìn)而為針對(duì)椎間盤退變的分子生物學(xué)治療提供一定的理論支撐。方法:利用免疫雙熒光標(biāo)記檢測(cè)法(Double-labeling immunofluorescence stain)檢測(cè)退變髓核組織中炎癥細(xì)胞浸潤情況,利用CD20、CD45RO、CD4、CD8等特異性標(biāo)志物檢測(cè)淋巴細(xì)胞表達(dá)情況;利用CD1a、S100檢測(cè)樹突狀細(xì)胞浸潤情況;為進(jìn)一步明確炎癥細(xì)胞類型,利用CD45、CD68及CD11b等巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物和CD24(髓核細(xì)胞表面標(biāo)志物)再次進(jìn)行免疫雙熒光檢測(cè),因結(jié)果提示在髓核組織樣本中,僅有CD11b可作巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)志物,再次利用CD24和CD11b進(jìn)行標(biāo)記證實(shí)巨噬細(xì)胞是唯一浸潤退變椎間盤髓核組織中的炎癥細(xì)胞。利用免疫雙熒光標(biāo)記法對(duì)CD11b陽性的細(xì)胞與p38 MAPK各亞型分別表達(dá)情況進(jìn)行研究;利用免疫雙熒光標(biāo)記法檢測(cè)CD11b陽性的細(xì)胞分別表達(dá)M1型巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物i NOS或CD86,M2型巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物Arginase-1及CD206的情況,明確巨噬細(xì)胞極化類型;為測(cè)定髓核細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞極化作用的影響,將RAW264.7巨噬細(xì)胞與不同退變程度椎間盤組織中的髓核細(xì)胞及正常髓核細(xì)胞分別共培養(yǎng)3天,利用WB法分別檢測(cè)i NOS表達(dá)情況;為進(jìn)一步研究髓核細(xì)胞中p38 MAPK各亞型對(duì)巨噬細(xì)胞極化的作用,利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)分別抑制退變髓核細(xì)胞中p38α、p38β、p38γ以及p38δ,三天后與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),對(duì)比i NOS及Arginase-1的表達(dá)情況;為明確髓核細(xì)胞中誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化的細(xì)胞因子產(chǎn)物,利用微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量(Flow cytometric bead array)技術(shù)對(duì)共培養(yǎng)液中可能與M1型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)的細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)p38α介導(dǎo)表達(dá)的IFNγ,p38α、p38β及p38δ介導(dǎo)表達(dá)的GM-CSF可能是退變髓核細(xì)胞促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化的關(guān)鍵因素;為進(jìn)一步證實(shí),將原代髓核細(xì)胞培養(yǎng)2天后,分別加入抗IFNγ抗體及抗GM-CSF抗體,24小時(shí)后與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),明確其各自對(duì)巨噬細(xì)胞極化作用的影響。結(jié)果:利用免疫熒光標(biāo)記檢測(cè)(Double-labeling immunofluorescence stain)法結(jié)果顯示,在退變的椎間盤髓核組織中未發(fā)現(xiàn)有淋巴細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞的浸潤,約70%的樣本中可以檢測(cè)到CD11b陽性細(xì)胞的表達(dá),提示為巨噬細(xì)胞,而所有的正常髓核組織中CD11b均為陰性結(jié)果。利用CD45、CD68及CD11b等巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物和CD24(髓核細(xì)胞表面標(biāo)志物)進(jìn)行免疫雙熒光檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),II、III、IV、V級(jí)退變樣本中表現(xiàn)CD45、CD68雙陽性的髓核細(xì)胞分別為5%、88%、91%、84%;CD24和CD68雙陽性細(xì)胞在III、IV、V級(jí)退變樣本中的比率分別為80%、86%和91%,提示CD68并非巨噬細(xì)胞特異性表面標(biāo)記物,在髓核細(xì)胞中只有CD11b可作為巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物,為更明確區(qū)別開髓核細(xì)胞與巨噬細(xì)胞,利用CD24和CD11b進(jìn)行標(biāo)記,無細(xì)胞同時(shí)表現(xiàn)CD24和CD11b陽性,證實(shí)巨噬細(xì)胞是退變髓核組織中唯一浸潤的炎癥細(xì)胞。利用免疫雙熒光標(biāo)記法檢測(cè)退變的髓核組織,83%的細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD24和p38α,78%的細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD24和p38β,而CD24和p38β同時(shí)陽性的細(xì)胞約56%,p38γ與CD24同時(shí)陽性的細(xì)胞僅占9%,幾乎所有CD11b陽性的細(xì)胞(約占細(xì)胞總數(shù)的20%)均同時(shí)顯示p38α、p38β、p38δ陽性。利用免疫雙熒光標(biāo)記法發(fā)現(xiàn)CD11b陽性的細(xì)胞都同時(shí)表達(dá)M1型巨噬細(xì)胞的標(biāo)記物i NOS或CD86的細(xì)胞率分別為84%和80%,而表達(dá)M2型的表面標(biāo)志物Arginase-1及CD206的比率分別為5%和7%,提示椎間盤退變時(shí)巨噬細(xì)胞向M1型極化;為測(cè)定椎間盤細(xì)胞與巨噬細(xì)胞極化的影響,將RAW264.7巨噬細(xì)胞分別與不同程度退變的髓核細(xì)胞或正常髓核細(xì)胞共培養(yǎng)3天,利用Western blot analysis法測(cè)得退變髓核細(xì)胞組i NOS表達(dá)明顯增強(qiáng);為進(jìn)一步研究髓核細(xì)胞中p38各亞型在巨噬細(xì)胞極化中的作用,利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)分別抑制退變髓核細(xì)胞中p38α、p38β、p38γ以及p38δ,三天后將其培養(yǎng)液與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),與對(duì)照組相比,sh-p38α組i NOS表達(dá)被完全抑制,sh-p38β、p38δ組被不完全抑制,抑制p38γ的表達(dá)對(duì)巨噬細(xì)胞的極化未見影響,同時(shí)未檢測(cè)到Arginase-1的表達(dá)。利用微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)對(duì)共培養(yǎng)液中可能與M1型極化相關(guān)的細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示分別抑制p38α、p38β、p38γ以及p38δ對(duì)TNF-α、IL-1β及MCP-1表達(dá)無明顯影響,單獨(dú)抑制p38α可顯著抑制IFNγ的表達(dá),單獨(dú)抑制p38α、p38β、p38δ可顯著抑制GM-CSF的表達(dá);將原代髓核細(xì)胞培養(yǎng)2天后,分別加入抗IFNγ抗體及抗GM-CSF抗體,24小時(shí)后與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)抑制IFNγ可以部分抑制i NOS的表達(dá),而抑制GM-CSF可完全抑制i NOS的表達(dá)。結(jié)論:1.巨噬細(xì)胞可能是退變的椎間盤髓核組織中唯一存在的炎癥細(xì)胞,其作用更像是對(duì)組織損傷的一般性炎癥反應(yīng)而非以淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答。2.椎間盤退變時(shí)p38 MAPK表達(dá)陽性的髓核細(xì)胞釋放GM-CSF和IFNγ從而誘導(dǎo)侵入椎間盤的巨噬細(xì)胞向M1型極化,其中p38α可介導(dǎo)GM-CSF和IFNγ的分泌表達(dá),p38β、p38δ可介導(dǎo)GM-CSF的分泌表達(dá)從而影響巨噬細(xì)胞的極化。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R681.53

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6 劉瑞平;徐南偉;;退變兔髓核細(xì)胞和正常髓核細(xì)胞生物學(xué)特性的比較[J];實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志;2009年21期

7 梁偉國;葉冬平;戴麗冰;沈雁;;體外培養(yǎng)人正常椎間盤髓核細(xì)胞與退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)性狀比較:可以為干預(yù)退變髓核細(xì)胞提供最佳時(shí)機(jī)嗎?[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年28期

8 王鋒;朱悅;;影響髓核細(xì)胞表達(dá)水通道蛋白1相關(guān)因素的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年06期

9 牛建鵬;衛(wèi)陳剛;任龍韜;;髓核細(xì)胞及其生物力學(xué)研究進(jìn)展[J];臨床醫(yī)藥實(shí)踐;2011年08期

10 李鋒生;梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;體外培養(yǎng)人退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)性狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年28期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 趙秀寶;馬信龍;馬劍雄;李稚君;李爽;孫曉雷;;周期性牽張力聯(lián)合灌注培養(yǎng)對(duì)大鼠髓核細(xì)胞影響的研究[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第30次學(xué)術(shù)年會(huì)暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

2 王會(huì)仁;董健;周曉崗;李熙雷;林紅;;人脂肪及骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞與髓核細(xì)胞非接觸共培養(yǎng)后的類髓核分化效應(yīng)研究[A];第十九屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2012年

3 李長青;周躍;羅剛;張傳志;;仿生髓核組織工程支架材料對(duì)體外培養(yǎng)髓核細(xì)胞合成代謝的影響[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

4 余磊;廖華;熊紹虎;;人髓核細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

5 梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;BMP-2對(duì)人退變椎間盤髓核細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會(huì)論文選集[C];2011年

6 梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;bFGF對(duì)人退變椎間盤髓核細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會(huì)論文選集[C];2011年

7 王海強(qiáng);;CK8在退變椎間盤髓核細(xì)胞中的表達(dá)[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)脊柱醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第六屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2013年

8 葉冬平;梁偉國;戴麗冰;沈雁;;GFP-hTERT轉(zhuǎn)染人正常髓核細(xì)胞構(gòu)建永生化髓核細(xì)胞株的實(shí)驗(yàn)研究[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會(huì)論文選集[C];2011年

9 李長青;周躍;羅剛;張傳志;;仿生髓核組織工程支架材料對(duì)體外培養(yǎng)髓核細(xì)胞生長增殖的影響[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

10 伍耀宏;徐寶山;李秀蘭;楊強(qiáng);張楊;夏群;張春秋;許海委;;軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)多孔支架與山羊髓核細(xì)胞生物相容性研究[A];第十九屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 葉冬平;microRNA-155通過下調(diào)ERK1/2水平影響人正常椎間盤髓核細(xì)胞退變的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2015年

2 王崢;FOXC2和BMP-7在椎間盤退變性疾病中的作用及其機(jī)制的相關(guān)研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 江維;SIRT1調(diào)控自噬對(duì)人椎間盤髓核細(xì)胞退變的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 陶軼卿;Ⅱ型膠原荷載成髓核細(xì)胞分化的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)椎間盤退變的體內(nèi)外研究[D];浙江大學(xué);2016年

5 王建喜;Caveolin-1通過Wnt/β-Catenin信號(hào)通路介導(dǎo)炎癥因子對(duì)髓核細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 蔡峰;酸敏感離子通道1a在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)退變椎間盤中的作用機(jī)制研究[D];東南大學(xué);2016年

7 陳松峰;壞死性凋亡在壓力誘導(dǎo)的髓核細(xì)胞損傷中的作用及其相關(guān)機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2016年

8 高陽;髓核細(xì)胞中p38亞型的差異性表達(dá)及其對(duì)椎間盤退變中巨噬細(xì)胞的極化作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2017年

9 高鋒;低強(qiáng)度脈沖超聲波促進(jìn)人髓核細(xì)胞合成胞外基質(zhì)功能性成分的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2011年

10 李喜功;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與退變髓核細(xì)胞體外共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 任國梁;退變毮核細(xì)胞拉伸實(shí)驗(yàn)的形態(tài)學(xué)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 唐浩;CD24在人髓核細(xì)胞鑒定應(yīng)用中的相關(guān)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉永明;過表達(dá)NDRG2基因促進(jìn)人髓核細(xì)胞衰老的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 楊晨;活化T細(xì)胞核因子對(duì)髓核細(xì)胞中ADAMTS-4及-5表達(dá)的調(diào)控作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 胡津銓;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)于髓核細(xì)胞炎性損傷的保護(hù)作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 趙光宇;不同共培養(yǎng)條件下兔NPCs誘導(dǎo)BMSCs向類髓核細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

7 周栩;Id1基因?qū)MP-2維持兔髓核細(xì)胞軟骨特性的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

8 宋鵬;高氧微環(huán)境刺激與細(xì)胞連續(xù)分裂在體外人髓核細(xì)胞老化中作用的初探[D];東南大學(xué);2015年

9 崔佳瞿;老化髓核細(xì)胞的致退變效應(yīng)及其機(jī)制的探索[D];東南大學(xué);2015年

10 孫灰灰;人老化髓核細(xì)胞的炎性因子表達(dá)變化分析[D];東南大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：2326617